բևեռացված մանրադիտակ: Լույսի մանրադիտակի միջոցով միկրոօրգանիզմների ներբջջային կառուցվածքների պատկերացում: Հյուսվածքային կուլտուրա, միկրոուրգիա

Բառարան:

  • Բևեռացված լույսը լույսի ալիքներ են, որոնք թրթռում են մեկ ուղղությամբ:
  • Լույսի ալիքը էլեկտրական և մագնիսական ճառագայթում է՝ ալիքի տարածման հարթությանը ուղղահայաց տատանման հարթությամբ։
  • Բևեռացնողը (Nicol I) սարք է, որը թույլ է տալիս անցնել միայն ամբողջությամբ կամ մասնակի բևեռացված լույսի միջով: Նախատեսված է բևեռացված լույսը (միջոցով) փոխանցել ուսումնասիրվող թափանցիկ օբյեկտին և կտրել (ցրել) ոչ բևեռացված լույսը (բնական լույս, արհեստական ​​լույս, ներառյալ մանրադիտակի լուսավորիչի ճառագայթումը): Բևեռացնողի միջով անցնող լույսի ինտենսիվությունը ընկնում է բևեռացման և անալիզատորի բևեռացման հարթությունների միջև անկյան կոսինուսի քառակուսու համամասնությամբ (Մալուսի օրենք).

Որտեղ՝ I-ն ինտենսիվությունն է բևեռացման միջով անցնելուց առաջ, I-ն լույսի ինտենսիվությունն է բևեռացնողի միջով անցնելուց հետո, φ-ն անկյունն է բևեռացված լույսի բևեռացման հարթությունների և բևեռացնողի միջև։

  • Անալիզատոր (Nicol II) - սարք, որը նման է բևեռացմանը, բայց նախատեսված է բևեռացված լույսը վերլուծելու համար:

Անալիզատորի պտույտը բևեռացնողի նկատմամբ ϕ անկյան տակ: Լույսի ինտենսիվությունը ցուցադրվում է կարմիր սլաքով:

  • Կոմպենսատորը որոշելու սարք է քանակական բնութագրերբևեռացում. Բարձր կոնտրաստով տեսանելի պատկերը վերածում է գունավոր պատկերի՝ սպիտակ լույսի ներքո թուլացնելով որոշակի ալիքի երկարություն:
  • Գծային բևեռացված լույսը լույս է, որի տատանումների հարթությունը սահմանափակված է մեկ ուղղությամբ և տարածվում է մեկ հարթության վրա:
  • Լույսի ալիքների տատանումների փուլը, մաթեմատիկական տեսանկյունից, լուսային ալիքի ֆունկցիայի փաստարկն է, այսինքն՝ ωt+φ 0 sin(ωt+φ 0) ֆունկցիայում։ Ֆիզիկապես դա որոշակի էլեկտրամագնիսական վիճակ է ժամանակի որոշակի կետում:
  • Ալիքի երկարությունը հեռավորությունն է երկու ամենամոտ կետերի միջև, որոնք գտնվում են նույն փուլում:
  • Արտացոլումը ալիքի ուղղության փոփոխություն է: Ամբողջական արտացոլումկոչվում է ալիքի բեկման անկյան փոփոխություն 90 °-ից պակաս:
  • Ռեֆրակցիան ալիքի ուղղության փոփոխությունն է երկու միջավայրերի սահմանին: Երկհարվածությունը անիզոտրոպ միջավայրում լույսի մեկ ճառագայթի բաժանումն է երկու ճառագայթների:


Նկար 4 - Ճառագայթների բեկում իսլանդական սպարի բյուրեղում:

  • Երկխրոիզմը նյութի կողմից լույսի մասնակի կլանումն է՝ կախված դրա բևեռացումից։
  • Միջամտությունը լույսի ինտենսիվության փոփոխությունն է, երբ երկու կամ ավելի լույսի ալիքներ են վերադրվում:
  • Լույսի ճառագայթների ուղու տարբերությունը մի արժեք է, որը բնութագրում է լույսի արագության դանդաղումը թափանցիկ նյութի միջով անցնելիս։ Ուղու տարբերությունը չափվում է վակուումում լույսի անցած հեռավորությամբ, որը անհրաժեշտ է ուսումնասիրվող նյութի մեջ տարածության ուսումնասիրված կետերում անցնելու համար:
  • Կոնոսկոպիան բևեռացված լույսի միաձուլվող ճառագայթների մեջ անիզոտրոպ առարկաների օպտիկական հատկությունների ուսումնասիրության մեթոդ է: Կոնոսկոպիայի ընթացքում անալիզատորի պտտման ժամանակ վերահսկվում են միջամտության օրինաչափության փոփոխությունները: Պտտեցնելով անալիզատորն ու բևեռացնողը միմյանց նկատմամբ՝ հետազոտողը մանրադիտակում դիտում է կոնոսկոպիկ պատկերներ՝ բաղկացած իզոգիրներից (դրանք բևեռացնողում լույսի ալիքների տատանման ուղղությանը համապատասխանող մուգ շերտեր են) և իզոխրոմներից (դրանք տարբեր ինտերֆերենց գույների շերտեր են։ որոնք համապատասխանում են բյուրեղի մեջ գտնվող ճառագայթների ուղղություններին՝ նույն ուղու տարբերությամբ):
  • Օրթոսկոպիան բևեռացված լույսի զուգահեռ ճառագայթների մեջ անիզոտրոպ առարկաների օպտիկական հատկությունների ուսումնասիրության մեթոդ է:
  • Պլեոխրոիզմը որոշ անիզոտրոպ առարկաների նկատվող գույնի փոփոխություն է՝ դիտման անկյան փոփոխությամբ (բյուրեղների գույնի փոփոխություն, երբ սեղանը պտտվում է)։

Բևեռացնող մանրադիտակը մանրադիտակ է, որը նախատեսված է անիզոտրոպ միջավայրի միջով անցնող բևեռացված լույսի երկակի կոտրվածքն ուսումնասիրելու համար։

Առաջին բևեռացնող մանրադիտակը նախագծվել է 1863 թվականին Հենրի Քլիֆթոն Սորբիի կողմից և տարբերվում է օպտիկական մանրադիտակից, որին մենք սովոր ենք երկու Նիկոլ պրիզմայով, որոնք տեղադրված են օպտիկական ուղու վրա։ Նիկոլի պրիզման լույս է փոխանցում իր միջով միայն մեկ ուղղությամբ և մեկ հարթությունում, այսինքն՝ հարթ բևեռացված լույս, մնացած լույսը, որը մտնում է այս պրիզմաները, ամբողջությամբ արտացոլվում և ցրվում է: Այս պրիզմաները կառուցվածքային առումով չեն տարբերվում միմյանցից և գործում են որպես բևեռացնողներ (անալիզատոր և բևեռացնող): Երբ անալիզատորի բևեռացման հարթությունը պտտվում է բևեռացման հարթության նկատմամբ 90º-ով, հետազոտողը դիտում է երկակի ճեղքող օբյեկտի բևեռացման օրինաչափությունը, և բոլոր առարկաները, որոնք չունեն երկբեկում, մթնում են: Ժամանակակից մանրադիտակներում ձեռք բերելու համար ավելինՏեղեկատվության համար՝ DIC պրիզմաներ (ռելիեֆը համատեղելով բևեռացման օրինաչափության հետ, չգունավոր նմուշներ ուսումնասիրելու համար), փոխհատուցիչներ (քանակական բևեռացման համար), կլոր սեղան (պլեոխրոիզմ ուսումնասիրելու համար) և պարզ բևեռոիդներ պարզ դիտարկումների համար (օրինակ՝ կենսաբանության և բժշկության մեջ) կարող է օգտագործվել.

Բևեռացումը առավել հաճախ օգտագործվում է բյուրեղագրական մանրադիտակներում, որտեղ անիզոտրոպ առարկաների հատկությունները կարող են որոշվել կոնոսկոպիայի և օրթոսկոպիայի միջոցով: Ուշադրություն դարձրեք կոնոսկոպիայի և օրթոսկոպիայի նմանություններին և տարբերություններին. լույսի ճառագայթը անցնում է բևեռացնողով (1), սահմանափակվում է բացվածքի դիֆրագմայով (2), անցնում է կոնդենսատորի ոսպնյակներով (3); անալիզատոր (որը դարձնում է հետազոտողին) (8) և փոխհատուցիչներ (7):


Նկար 1 - բևեռացնող մանրադիտակի սխեման՝ ա) օրթոսկոպիայի համար, բ) կոնոսկոպիայի համար

Լեգենդ՝ 1 - բևեռացնող, 2.6 - դիֆրագմներ; 3 - կոնդենսատոր; 4 - դեղ; 5 - ոսպնյակ; 7 - փոխհատուցող; 8 - անալիզատոր; 9 - Բերտրանի ոսպնյակ; 10 - ակնաբույժի կիզակետային հարթություն; 11 - ակնաբույժ.

Դիտարկված պատկերը բաղկացած է կոնոսկոպիկ պատկերներից։ կոնոսկոպիկ ֆիգուրներ - բաղկացած են իզոգիրներից (սրանք մուգ ուղիղ կամ կոր շերտեր են, որոնցում թրթռման ուղղությունները զուգահեռ են նիկոլների հիմնական հատվածներին) և իզոխրոմներից (սրանք շերտեր են, որոնք ներկված են տարբեր ինտերֆերենց գույներով: Յուրաքանչյուր ժապավեն համապատասխանում է գծերի ուղղություններին: ճառագայթներ, որոնք ձևավորվել են կրկնակի տրոհման ժամանակ և ունեն նույն ճանապարհի տարբերությունը):

Օրինակ բերենք. օպտիկական առանցքին ուղղահայաց միակողմանի բյուրեղյա կտրվածքի թիթեղներում կտեսնենք իզոգիրա խաչի և համակենտրոն իզոխրոմ օղակների տեսքով, տես Նկ. 5.


Նկար 5 - Ա) Միասռնի կալցիտի միներալի կոնոսկոպիկ պատկերներ Բ) Երկառանցքային ֆլոգոպիտ միներալ՝ տեղադրված կոմպենսատորով։

Ստացված միջամտության օրինաչափության բնույթով չափվում են երկբեկման արժեքը, բևեռացման հարթության պտտման անկյունները, մարման անկյունները, օպտիկական առանցքների քանակը և այլ բնութագրեր: Այս բոլոր հատկանիշները ցույց են տալիս, թե որ բյուրեղն է դիտում հետազոտողը, նրա կառուցվածքը։ Մանրադիտակները, ինչպիսիք են BX53P-ը և H600P-ը, նախագծվել են հանքաբանության և բյուրեղագիտության համար: Դրանք հագեցված են ժամանակակից սարքավորումների վրա պատրաստված լավագույն առանց սթրեսի օպտիկաներով և փոխհատուցիչներով, որոնք վերացնում են խաղն ու բացերը մանրադիտակի մեջ տեղադրվելիս:

Երկբեկումը օգտագործվում է ոչ միայն բյուրեղագրության մեջ, այլև բժշկության, կենսաբանության, դատաբժշկական և մետալոգրաֆիայի մեջ, քանի որ հետազոտողների համար կարևոր է արագ և ճշգրիտ մեկուսացնել վիտամինները, թթուները, հանքանյութերը, իզոտրոպ առարկաների սթրեսները, բնօրինակ նմուշում ոչ մետաղական ընդգրկումները, եւ ուրիշներ. Օրինակ՝ հյուսվածքաբանության և բջջաբանության համար նախատեսված մանրադիտակները հագեցած են բևեռացնողներով՝ տարբեր տեսակի առարկաներ հայտնաբերելու համար: Մոտ 2,4 մկմ տրամագծով կլոր առարկաները, լիպոիդները և կաթիլները, խաչված բևեռացուցիչներով կազմում են մալթական խաչի միջամտության նախշը: Ոչ բոլոր նյութերն ունեն բեկման նույն հատկությունները տարբեր ջերմաստիճաններԱյսպիսով, օրինակ, կարելի է տարբերակել 1) նյութեր, որոնք սառչելիս ձեռք են բերում անիզոտրոպ հատկություններ և կորցնում են դրանք տաքացնելիս՝ խոլեստերինը և դրա էսթերները, 2) տաքացնելիս չեն կորցնում իրենց անիզոտրոպ հատկությունները՝ ցերեբրոզիդներ, ֆոսֆատիդներ, միելիններ։ Հատկությունների նման փոփոխականությունը պայմանավորված է նյութի բյուրեղային կառուցվածքը պահպանելու ունակությամբ, տկ. Սա այն է, ինչ առաջացնում է երկակի բեկում: Դիտելով անիզոտրոպ առարկաները բևեռացնող մանրադիտակով և որոշելով դրանց կոնցենտրացիան՝ կարելի է ախտորոշել այնպիսի հիվանդություններ, ինչպիսիք են արթրիտը, աթերոսկլերոզը, լիպոիդուրիան, ցիլինուրիան և լիպիդոզը խաչաձև բևեռացնողներով լիպիդների փայլով, ինչպես նաև հոդատապ, միզաքար, սելիկոզ և ասբեստ: համապատասխանաբար միզանյութ, սիլիցիումի երկօքսիդ և ասբեստի մանրաթելեր: Հյուսվածքաբանության և բջջաբանության համար մշակվել է BX46 մանրադիտակը, որը հագեցած է ցածր բեմով, հզոր լուսավորիչով և բարձրությունը կարգավորվող խողովակով, որը կփրկի հետազոտողի մեջքը թրթռումից։

Բևեռացված լույսի ներքո իզոտրոպ առարկաներից տարբերվող գույներն են՝ օսլա, ցելյուլոզ, որոշ թթուներ, վիտամին C, հետևաբար դեղագիտության և դեղագործության համար նախատեսված մանրադիտակները նույնպես պետք է հագեցած լինեն բևեռացնողներով: Դեղաբանական մանրադիտակը ներառում է ինչպես CX43, այնպես էլ BX43, և այլ մոդելներ, քանի որ տարեցտարի այս ոլորտում ավելի ու ավելի շատ հետազոտություններ են կատարվում, և նոր հետազոտական ​​օբյեկտները պահանջում են այլ մոտեցում:

Դատաբժշկական գիտության մեջ կարևոր է տարբերակել քվարցի և այլ օգտակար հանածոների հատիկները օրգանական նյութերից և այլ նյութերից, որոնք կարելի է գտնել հանցագործության վայրում, ուստի մանրադիտակը պետք է հագեցած լինի արտացոլված լույսով, որպեսզի տեսնի նաև անթափանց առարկաները: BX53M մանրադիտակը հարմար է դատաբժշկական փորձաքննության համար, քանի որ այն հագեցած է ոչ միայն փոխանցվող լույսի հզոր աղբյուրով, այլև նույն հզոր արտացոլված լույսի լուսավորիչով, իսկ մանրադիտակի աշխատանքային հեռավորությունը մեծացնելու ներդիրները թույլ կտան ուսումնասիրել շատ մեծ առարկաներ։ առանց երկար նախնական նախապատրաստման.

Բևեռացնող մանրադիտակները նույնպես օգտագործվում են մետաղագրության մեջ, սակայն նման ուսումնասիրությունների համար բավական է իմանալ անիզոտրոպ առարկաների առկայությունը կամ բացակայությունը, ինչպես նաև դրանց տարածական բաշխումը։ Հենց նման առարկաների դասակարգման և հաշվման համար կարող են օգտագործվել մետաղագրության մեջ տեղադրված Stream-ով VHX6000, BX53P մանրադիտակները։

Ֆազային հակադրության մանրադիտակի մեթոդ

Բջջային կառուցվածքների մեծ մասը քիչ է տարբերվում լույսի բեկման ինդեքսով, միմյանցից և շրջակա միջավայրից ճառագայթների կլանմամբ։ Նման բաղադրիչներն ուսումնասիրելու համար պետք է փոխել լուսավորությունը (պատկերի հստակության կորստով) կամ օգտագործել հատուկ մեթոդներ և սարքեր։ Ֆազային կոնտրաստային մանրադիտակը նման մեթոդներից մեկն է: Այն լայնորեն կիրառվում է բջիջների կենսական ուսումնասիրության մեջ։ Մեթոդի էությունն այն է, որ նույնիսկ դեղամիջոցի տարբեր տարրերի բեկման ինդեքսների շատ փոքր տարբերությունների դեպքում դրանց միջով անցնող լույսի ալիքը ենթարկվում է տարբեր փուլային փոփոխությունների։ Այս փուլային փոփոխությունները, որոնք ուղղակիորեն անտեսանելի չեն ոչ աչքին, ոչ էլ լուսանկարչական ափսեին, հատուկ օպտիկական սարքի միջոցով փոխակերպվում են լույսի ալիքի ամպլիտուդի փոփոխության, այսինքն՝ պայծառության փոփոխությունների, որոնք արդեն տեսանելի են աչքին կամ գրանցվում են ալիքի վրա։ լուսազգայուն շերտ. Ստացված տեսանելի պատկերում պայծառության բաշխումը (ամպլիտուդները) վերարտադրում է փուլային ռելիեֆը: Ստացված պատկերը կոչվում է փուլային հակադրություն: Օբյեկտները կարող են մուգ երևալ բաց ֆոնի վրա (դրական փուլային հակադրություն) կամ բաց մուգ ֆոնի վրա (բացասական փուլային հակադրություն):

Միջամտության հակադրության մեթոդ (միջամտության մանրադիտակ)

Միջամտության հակադրության մեթոդը նման է նախորդին. երկուսն էլ հիմնված են միկրոմասնիկի միջով անցած և այն անցած ճառագայթների միջամտության վրա: Լուսավորիչից զուգահեռ լույսի ճառագայթները բաժանվում են երկու հոսքերի՝ մտնելով մանրադիտակ։ Ստացված ճառագայթներից մեկն ուղղված է դիտարկվող մասնիկի միջով և փոփոխություններ է ձեռք բերում տատանումների փուլում, մյուսը՝ շրջանցելով առարկան մանրադիտակի նույն կամ լրացուցիչ օպտիկական ճյուղով։ Մանրադիտակի աչքի հատվածում երկու ճառագայթները նորից միանում են և խանգարում միմյանց: Միջամտության արդյունքում կկառուցվի պատկեր, որի վրա տարբեր հաստությամբ կամ տարբեր խտությամբ բջիջի հատվածները կտարբերվեն միմյանցից կոնտրաստով։ Միջամտության հակադրության մեթոդը հաճախ օգտագործվում է միկրոսկոպիայի այլ մեթոդների հետ համատեղ, մասնավորապես՝ բևեռացված լույսի ներքո դիտումը: Դրա օգտագործումը ուլտրամանուշակագույն մանրադիտակի հետ համատեղ հնարավորություն է տալիս, օրինակ, որոշել բովանդակությունը նուկլեինաթթուներօբյեկտի ընդհանուր չոր քաշի մեջ:

Բևեռացնող մանրադիտակ

Բևեռացնող մանրադիտակը բևեռացված լույսի օբյեկտներում դիտարկելու մեթոդ է, որոնք ունեն իզոտրոպիա, այսինքն. ենթամանրադիտակային մասնիկների պատվիրված կողմնորոշում. Բևեռացնող մանրադիտակի կոնդենսատորի դիմաց տեղադրվում է բևեռացուցիչ, որը բևեռացման որոշակի հարթությամբ հաղորդում է լուսային ալիքներ։ Պատրաստումից և ոսպնյակից հետո տեղադրվում է անալիզատոր, որը կարող է լույս փոխանցել բևեռացման նույն հարթությամբ։ Եթե ​​այնուհետև անալիզատորը պտտվի 90o-ով առաջինի նկատմամբ, լույս չի անցնի: Այն դեպքում, երբ նման խաչաձև պրիզմաների միջև կա մի առարկա, որն ունի լույսը բևեռացնելու հատկություն, այն կդիտվի որպես փայլող մութ դաշտում: Բևեռացնող մանրադիտակի միջոցով կարելի է ստուգել, ​​օրինակ, միցելների կողմնորոշված ​​դասավորությունը բջջային պատըբույսեր.

Բևեռացնող մանրադիտակ— մորֆոլոգիական հետազոտության բարձր արդյունավետ մեթոդներից մեկը, որն ունի կենսաբանական կառուցվածքների նույնականացման լայն հնարավորություններ, ինչը մատչելիության և հարաբերական պարզության հետ միասին որոշում է դրա բարձր արժեքը։ Մեթոդը թույլ է տալիս ուսումնասիրել ոչ միայն պատրաստուկի հյուսվածաբանական կառուցվածքը, այլեւ նրա որոշ հիստոքիմիական պարամետրեր։ XX դարի 40-50-ական թթ. բևեռացման մանրադիտակը համարվում էր ուլտրակառուցվածքային մեթոդ, քանի որ այն հնարավորություն էր տալիս տեսնել հյուսվածքների ուլտրակառուցվածքային կարողությունները:

Բևեռացման մանրադիտակը նախատեսված է ուսումնասիրելու հյուսվածաբանական կառուցվածքների հատկությունները, որոնք ունեն երկակի բեկման (անիզոտրոպիա) հատկություն՝ լուսային ճառագայթի բիֆուրկացիա, երբ այն անցնում է անիզոտրոպ միջավայրով: Լույսի ալիքը անիզոտրոպ միջավայրում բաժանվում է երկու ալիքների՝ էլեկտրամագնիսական ալիքների տատանումների փոխադարձ ուղղահայաց հարթություններով: Այս հարթությունները կոչվում են բևեռացման հարթություններ: Բևեռացված լույսը սովորական (չբևեռացված) լույսից տարբերվում է նրանով, որ վերջինում լույսի ալիքի տատանումները տեղի են ունենում տարբեր հարթություններում, մինչդեռ բևեռացված լույսի դեպքում դրանք տեղի են ունենում միայն որոշակի հարթությունում։

Բևեռացման էֆեկտ ստեղծելու համար բևեռացման մանրադիտակում օգտագործվում են երկու բևեռաոիդներ: Առաջինը, որը կոչվում է բևեռացնող, տեղադրվում է մանրադիտակի լուսատուի և հյուսվածաբանական պատրաստուկի միջև, երկրորդը, որը գտնվում է հյուսվածքաբանական պատրաստուկի և հետազոտողի աչքի միջև, անալիզատորն է։ Ե՛վ բևեռացնողը, և՛ անալիզատորը օպտիկապես նույն բևեռացնող ֆիլտրերն են, ուստի դրանք կարող են փոխանակվել (եթե մանրադիտակի դիզայնը դա թույլ է տալիս): Նախկինում բևեռացնող մանրադիտակի համար օգտագործվում էին Նիկոլի, Արենսի կամ Թոմսոնի պրիզմաները, որոնք պատրաստված էին իսլանդական սպարից։ Այս պրիզմաներն ունեին լույսի բեկման սահմանափակ անկյուն։ Ներկայումս դրա փոխարեն օգտագործվում են հարթ բևեռացնող զտիչներ՝ արտադրելով լայն դաշտի բևեռացված լույս:

Բևեռացման լույսի ստեղծման գործում որոշիչ դեր է խաղում բևեռացման և անալիզատորի հարաբերական դիրքը մանրադիտակի օպտիկական առանցքի նկատմամբ: Եթե ​​դրանք կողմնորոշված ​​են այնպես, որ երկուսն էլ բևեռացված լույսը փոխանցեն նույն հարթության վրա, այսինքն. երբ դրանց բևեռացման հարթությունները համընկնում են, երկու բևեռացնող ֆիլտրերն էլ ունակ են բևեռացված լույս փոխանցելու. մանրադիտակի տեսադաշտն այս դեպքում վառ է (նկ. 1ա):

Բրինձ. 1 Մարդու թոքերի պատրաստում լուսավոր դաշտում, OlympusCX41, 10x օբյեկտ

Եթե ​​բևեռացնող ֆիլտրերի բևեռացման հարթությունները փոխադարձաբար ուղղահայաց են (դա ձեռք է բերվում անալիզատորը մանրադիտակի օպտիկական առանցքի շուրջ 90°-ով պտտելով), ապա բևեռացված լույսը չի անցնում և հետազոտողը տեսնում է մութ տեսադաշտ (նկ. . 2).

Երբ բևեռացնողը պտտվում է 360° իր պտտման ընթացքում, տեսադաշտը երկու անգամ ամբողջովին մթնում է և երկու անգամ ամբողջովին լուսավորվում: Նախկինում օգտագործվել են Bernauer փոխհատուցող զտիչներ, որոնցում մթնած տեսադաշտն ունի կարմրավուն երանգ ( U-TP530 ) Երբ կիրառվում են սև սպեկուլյար զտիչներ, մթնած տեսադաշտը չի երևում ամբողջովին մութ, այլ թույլ լուսավորված:

Նկ. 2 Մարդու թոքերի պատրաստում բևեռացված լույսի ներքո, 10x օբյեկտ

Այն դեպքերում, երբ բևեռացնող ֆիլտրերի խաչաձև դիրքով (այսինքն՝ օրթոսկոպիայում), բևեռացված լույսի ճանապարհին հանդիպում են հյուսվածքաբանական նմուշում պարունակվող անիզոտրոպ նյութեր, այդ նյութերը բևեռացված լույսը բաժանում են երկու ճառագայթների՝ լույսի փոխադարձ ուղղահայաց հարթություններով։ ալիքային տատանումներ. Բևեռացման հարթությանը համընկնող տատանման հարթությամբ լույսի ճառագայթները անցնում են անալիզատորով, իսկ ուղղահայացով կտրվում են, ինչի հետևանքով հետազոտողի աչքը և տեսախցիկը ներթափանցող լուսային հոսքի ինտենսիվությունը կազմում է ինտենսիվության միայն կեսը։ սկզբնական լույսի ճառագայթից: Նկարագրված գործընթացների արդյունքում երկու խաչաձև բևեռացնողների միջև տեղակայված անիզոտրոպ նյութերը տեսանելի են մուգ ֆոնի վրա՝ պայծառ լուսավոր առարկաների տեսքով։ Տվյալ դեպքում իզոտրոպ կառուցվածքները, որոնք չունեն երկհարվածության հատկություն, մնում են մութ։

Դա նույնպես ազդում է ընտրության վրա տեսախցիկներ բևեռացնող մանրադիտակի համար. Քանի որ խնդիրը մուգ ֆոնի վրա փոքր լուսային ազդանշաններ ֆիքսելն է, պայծառ դաշտային մանրադիտակի տեսախցիկը սովորաբար բավարար չէ տեսախցիկի ցածր զգայունության և նկարահանման ընթացքում առաջացող մեծ քանակությամբ աղմուկի պատճառով: Բևեռացնող մանրադիտակում նկարահանելու համար Ձեզ անհրաժեշտ է տեսախցիկ միկրոսկոպիայի համար՝ բարձր զգայունությամբ և ճշգրիտ գունային վերարտադրմամբ. Նախընտրելի է օգտագործել CCD մատրիցների վրա հիմնված տեսախցիկներ ( , VZ-CC50S), սակայն ներկա փուլում կարող եք նաև օգտագործել բյուջետային տարբերակներ Sony IMX շարքի CMOS մատրիցների վրա հիմնված տեսախցիկների համար ():

Կենսաբանական հյուսվածքները պարունակում են բավարար քանակությամբ անիզոտրոպ կառուցվածքներ՝ մկանների կծկվող ապարատի տարրեր, ամիլոիդ, միզաթթու, կոլագենի գոյացումներ, որոշ լիպիդներ, մի շարք բյուրեղներ և այլն։

Լույսի ճառագայթները, որոնք տրոհվում են անիզոտրոպ օբյեկտի մեջ և անցնում անալիզատորի միջով, բնութագրվում են ալիքի տարածման անհավասար արագությամբ։ Կախված այս տարբերության մեծությունից (այն նաև կոչվում է լույսի ճառագայթի ուշացման չափը) և անալիզատորում լույսի կլանման տարբերություններից, անիզոտրոպ առարկաների փայլը կարող է լինել սպիտակ կամ գունավոր: Վերջին դեպքում խոսքը երկխոսության երեւույթի մասին է ( կրկնակի կլանումԵս): Գունային էֆեկտները բևեռացման ոլորտում ուսումնասիրության մեջ տալիս են, օրինակ, բազմաթիվ բյուրեղներ:

Երկբեկման գործընթացը կարող է ուժեղացվել որոշակի ներկանյութերի կիրառմամբ, որոնց մոլեկուլները կարող են կողմնորոշվել անիզոտրոպ կառուցվածքների վրա: Հիստոքիմիական ռեակցիաները, որոնց արդյունքում առաջանում է անիզոտրոպության ազդեցություն, կոչվում են տոպոպտիկական ռեակցիաներ (Գ. Ռոմհանյի)։ Նման ռեակցիաների երկու տեսակ կա՝ հավելում և հակադարձ: Ավելացման ռեակցիաների դեպքում լույսի ճառագայթի ուշացումը մեծանում է, որը կոչվում է դրական անիզոտրոպիա, հակադարձ ռեակցիաներով՝ նվազում՝ բացասական անիզոտրոպիա։

ՍԱՐՔԱՎՈՐՈՒՄՆԵՐ ԵՎ ՍԱՐՔԱՎՈՐՈՒՄՆԵՐ

Բևեռացնող մանրադիտակն իրականացվում է հատուկ բևեռացնող մանրադիտակների միջոցով: Որպես օրինակ կարող ենք անվանել ներմուծված մանրադիտակներ. Ժամանակակից օպտիկական մանրադիտակների մեծ մասը հագեցած է բևեռացնող մանրադիտակի պարագաներով:

Բևեռացնող մանրադիտակի համար կարող է հարմարեցվել լաբորատոր և հետազոտական ​​աստիճանի ցանկացած լուսային մանրադիտակ: Բավական է ունենալ երկու բևեռացնող ֆիլտր, որոնցից մեկը, որպես բևեռացնող, տեղադրվում է լույսի աղբյուրի և նմուշի միջև, իսկ մյուսը, որը կատարում է անալիզատորի դեր, տեղադրված է նմուշի և հետազոտողի աչքի միջև։ Բևեռացնողը կարող է տեղադրվել կոնդենսատորի մեջ կամ դրվել դրա տակ՝ դաշտային դիֆրագմայի վերևում, իսկ անալիզատորը կարող է տեղադրվել ատրճանակի բնիկում կամ միջանկյալ ներդիրում:

Նկ. 3-ը բևեռացնող մանրադիտակի սխեմատիկ դիագրամ է: Բացի բոլոր լուսային մանրադիտակների համար ընդհանուր բաղադրիչներից, բևեռացնող մանրադիտակն ունի երկու բևեռացնող ֆիլտր (բևեռացնող, որը սովորաբար տեղադրված է կոնդենսատորի տակ և անալիզատոր, որը գտնվում է ակնաբույժում), ինչպես նաև փոխհատուցիչ: Անալիզատորը պետք է անպայման պտտվի, և պտտման աստիճանը որոշելու համար անհրաժեշտ է համապատասխան աստիճանավոր սանդղակ:

Բևեռացնող մանրադիտակն օգտագործում է լույսի աղբյուր, որն ապահովում է բարձր խտությանլույսի ճառագայթ. Որպես այդպիսի աղբյուր առաջարկվում է 100 Վտ հզորությամբ լամպ 12 Վ լարմամբ: Որոշ տեսակի հետազոտությունների համար պահանջվում է մոնոխրոմատիկ լույս: Այդ նպատակով օգտագործվում է մետաղական միջամտության ֆիլտր, որը լավագույնս տեղադրվում է հայելու վերեւում: Լույսը ցրող ցրտահարված ապակին տեղադրվում է բևեռացնողի դիմաց, այսինքն. դրա և լույսի աղբյուրի միջև, բայց ոչ մի դեպքում բևեռացնողից հետո, քանի որ դա խախտում է բևեռացնող ֆիլտրի գործառույթը:

Նախկինում բևեռացնող մանրադիտակի համար օգտագործվում էին առանց ներքին լարվածության ախրոմատիկ օբյեկտներ, սակայն դրանք այժմ հազվադեպ են: Մինչ օրս բևեռացնող մանրադիտակում օգտագործվում են միայն պլանային ախրոմատիկ օբյեկտներ, որոնք չունեն ներքին լարվածություն: Ապոքրոմատիկ ոսպնյակները կարող են օգտագործվել միայն այն դեպքերում, երբ միկրոլուսանկարչության համար անհրաժեշտ է գունային նորմալ վերարտադրություն:

Բևեռացնող մանրադիտակները հագեցված են պտտվող օբյեկտի աստիճանով, որի դիրքը օպտիկական առանցքի նկատմամբ կարող է փոխվել: Սեղանի պտտման անկյունը չափվում է դրա շրջագծի վրա նշված աստիճանի սանդղակի միջոցով: Ապահովելու նախադրյալներից մեկը արդյունավետ կիրառությունբևեռացնող մանրադիտակը պտտվող փուլի մանրակրկիտ կենտրոնացումն է՝ օգտագործելով կենտրոնացնող պտուտակները:

Բևեռացնող մանրադիտակի կարևոր տարրը փոխհատուցիչն է, որը տեղադրված է օբյեկտի և անալիզատորի միջև, սովորաբար մանրադիտակի խողովակում: Կոմպենսատորը գիպսի, քվարցի կամ միկայի հատուկ սորտերից պատրաստված ափսե է: Այն թույլ է տալիս չափել ճեղքված լույսի ճառագայթների ուղու տարբերությունը՝ արտահայտված նանոմետրերով։ Կոմպենսատորի աշխատանքը ապահովվում է լույսի ճառագայթների ուղու տարբերությունը փոխելու ունակությամբ՝ այն զրոյի հասցնելով կամ առավելագույնի հասցնելով։ Սա ձեռք է բերվում փոխհատուցիչը օպտիկական առանցքի շուրջ պտտելով:

ՄԻԿՐՈՍԿՈՊԻԱՅԻ ՄԵԹՈԴ ԲԵՎԵՎԱԾ ԼՈՒՅՍՈՒՄ

Ավելի հարմար է բևեռացման մանրադիտակն անցկացնել մութ սենյակում, քանի որ հետազոտողի աչքը մտնող լույսի հոսքի ինտենսիվությունը սկզբնականի համեմատ նվազում է 2 անգամ: Մանրադիտակի լուսավորիչը միացնելուց հետո տեսադաշտի հնարավոր ամենապայծառ լուսավորությունը նախ ձեռք է բերվում բևեռացնողը կամ անալիզատորը պտտելով: Բևեռացնող ֆիլտրերի այս դիրքը համապատասխանում է դրանց բևեռացման հարթությունների համընկնմանը: Դեղը դրվում է օբյեկտի սեղանի վրա և նախ ուսումնասիրվում է լուսավոր դաշտում։ Այնուհետև, բևեռացնողը (կամ անալիզատորը) պտտելով, տեսադաշտը հնարավորինս մթնում է. ֆիլտրի այս դիրքը համապատասխանում է բևեռացման հարթությունների ուղղահայաց դասավորությանը: Անիզոտրոպիայի ազդեցությունը բացահայտելու համար անհրաժեշտ է միավորել անիզոտրոպ օբյեկտի բևեռացման հարթությունը բևեռացված լույսի հարթության հետ։ Էմպիրիկորեն դա ձեռք է բերվում օբյեկտի փուլը օպտիկական առանցքի շուրջ պտտելով: Եթե ​​բևեռացնող մանրադիտակի համար օգտագործվում է լուսային մանրադիտակ, որը հագեցած չէ պտտվող բեմով, ապա անհրաժեշտ է ձեռքով պտտել հյուսվածքաբանական նմուշը: Սա ընդունելի է, բայց այս դեպքում անհնար է իրականացնել որոշակի տեսակներբևեռացնող մանրադիտակ, որը պահանջում է քանակականացում(երկբեկման նշանի որոշումը, լույսի ճառագայթների ուղու տարբերության մեծությունը):

Եթե ​​ուսումնասիրված պատրաստուկում անիզոտրոպ առարկաները դասավորված են կարգով (օրինակ՝ գծավոր մկանային մանրաթելերի անիզոտրոպ սկավառակներ), ապա հարմար է դրանք ուսումնասիրել բեմի ֆիքսված դիրքում, որտեղ այդ առարկաները տալիս են առավելագույն փայլ՝ ընդդեմ մթության։ ֆոն. Եթե, այնուամենայնիվ, պատրաստման մեջ անիզոտրոպ կառուցվածքները դասավորված են պատահականորեն (օրինակ՝ բյուրեղները), ապա դրանց ուսումնասիրության ընթացքում անհրաժեշտ է անընդհատ պտտել առարկայի աղյուսակը՝ հասնելով առարկաների այս կամ այն ​​խմբի փայլին։

Տոպոոպտիկ ռեակցիաների ավելի խորը վերլուծության և գնահատման համար անհրաժեշտ է իմանալ երկբեկման հարաբերական նշանի որոշման մեթոդը, ճառագայթների ուղու տարբերության մեծությունը և բեկման ինդեքսը (գործակիցը):

Երկբեկման նշանը բնութագրում է անալիզատորով անցնող լուսային ճառագայթների տեղաշարժման աստիճանը և ուղղությունը։ Այս տեղաշարժը պայմանավորված է տոպո-օպտիկական ներկերով, և այն դեպքում, երբ այն ուղղված է ճառագայթների ուղու տարբերության նվազմանը, խոսվում է երկհարվածության բացասական նշանի մասին ( բացասական անիզոտրոպիա), բայց եթե դա նպաստում է ճառագայթների ուղու տարբերության ավելացմանը, ապա պարզվում է երկակի բեկման դրական նշան ( դրական անիզոտրոպիա) Եթե ​​ճառագայթների ուղու տարբերությունը վերանում է, ապա անիզոտրոպիայի ազդեցությունը հարթվում է։

Երկբեկման նշանը որոշվում է կոմպենսատորի միջոցով: Դրա կիրառման կարգը հետևյալն է. Ուսումնասիրվող օբյեկտը տեղադրվում է այնպիսի դիրքում, որտեղ անիզոտրոպ կառուցվածքների առավելագույն փայլը ձեռք է բերվում մութ տեսադաշտում: RI-փոխհատուցիչի թիթեղը անալիզատորի բևեռացման հարթության նկատմամբ պտտվում է օպտիկական առանցքի շուրջ +45° անկյան տակ: Օբյեկտը, կախված լույսի ճառագայթների ուղու տարբերությունից, որը կարող է տատանվել 20-ից մինչև 200 նմ, ձեռք է բերում կամ կապույտ կամ դեղին գույն: Առաջին դեպքում կրկնակի տրոհման նշանը դրական է, երկրորդում՝ բացասական։ Պետք է նկատի ունենալ, որ այն դեպքում, երբ փոխհատուցիչը գտնվում է +45° անկյան տակ, մթնած տեսադաշտի ընդհանուր ֆոնն ունի կարմիր երանգ։

Կարող եք նաև օգտագործել λ/4 փոխհատուցիչը (U-TP137): Դրա կիրառման կարգը նույնն է, միայն տեսադաշտը կարմիրի փոխարեն ունի մոխրագույն երանգ, իսկ առարկան փայլում է բեկման դրական նշանով, իսկ բացասականով մգացվում է։

Լույսի ճառագայթների ուղու տարբերության քանակական որոշումը՝ արտահայտված նանոմետրերով, իրականացվում է Köhler Braque փոխհատուցիչի միջոցով։ Դա անելու համար օգտագործեք բանաձևը.

Գ=Γλ×sinφ

որտեղ λ-ն արտադրողի կողմից փոխհատուցողի վրա դրված հաստատուն է, φ-ն փոխհատուցիչի պտտման անկյունն է անալիզատորի բևեռացման հարթության նկատմամբ:

Անիզոտրոպ օբյեկտի բեկման ինդեքսը որոշվում է՝ համեմատելով այն (մանրադիտակի տակ) մոտակայքում տեղադրված փորձարկման առարկայի հետ։ Որպես փորձարկման առարկաներ օգտագործվում են հայտնի բեկման ինդեքսով ստանդարտ հեղուկներ: Օբյեկտն ու նմուշը կողք կողքի դրված են բեմի վրա։ Եթե ​​դրանց բեկման ինդեքսները չեն համընկնում, օբյեկտի և նմուշի միջև տեսանելի է վառ գիծ, ​​որը կոչվում է Բեկի գիծ: Մանրադիտակի խողովակը կենտրոնացված դիրքի համեմատ բարձրացնելը հանգեցնում է Բեկի գծի տեղաշարժի դեպի միջավայր, ինչը տալիս է բեկման ավելի ընդգծված ազդեցություն: Երբ օբյեկտի և նմուշի բեկման գործակիցները համընկնում են, Բեկի գիծը անհետանում է։ Սովորաբար, բեկման ինդեքսը որոշվում է մոնոխրոմատիկ լույսի ներքո սպեկտրի նատրիումի գծի համար (589 նմ ալիքի երկարությամբ և 20 ° C ջերմաստիճանում): Ճակատումը պետք է որոշվի բևեռացման երկու փոխադարձ ուղղահայաց հարթությունների համար: Այդ նպատակով անալիզատորը հանվում է, և օբյեկտի բեկումը գրանցվում է իր երկու փոխադարձ ուղղահայաց դիրքերում: Երկու բեկման ինդեքսների (ng - nk) տարբերությունը բնութագրում է բեկման ուժը։

ՆՅՈՒԹԻ ՄՇԱԿՄԱՆ ԵՎ ՊԱՏՐԱՍՏՄԱՆ ՊԱՏՐԱՍՏՄԱՆ ԱՌԱՆՁՆԱՀԱՏԿՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԸ

Բևեռացման մանրադիտակի նյութի ամրագրումը թթվային ֆորմալինում անցանկալի է, քանի որ հյուսվածքային հեմոգլոբինի և թթվային ֆորմալդեհիդի փոխազդեցության ժամանակ ձևավորված ֆորմալինի պիգմենտը ունի անիզոտրոպ հատկություններ և դժվարացնում է բևեռացված լույսի տակ պատրաստուկների ուսումնասիրությունը: G. Scheuner և J. Hutschenreiter (1972) խորհուրդ են տալիս օգտագործել 10% չեզոք ֆորմալին, Baker's կալցիում-ֆորմոլ լուծույթը, Carnoy-ի հեղուկը:

10%-անոց չեզոք ֆորմալինում ֆիքսման տևողությունը 24-72 ժամ է 4°C-ում, կալցիում-ֆորմոլ լուծույթում ըստ Բեյքերի՝ 16-24 ժամ 4°C-ում։ Ֆիքսացիան կալցիումի ֆորմոլում հատկապես նախընտրելի է լիպիդ-սպիտակուցային միացությունների ուսումնասիրության ժամանակ։ Carnoy-ի հեղուկը արագորեն թափանցում է գործվածքներ: 1 - 2 մմ հաստությամբ կտորները պրոֆիլավորված են 1 ժամ հետո 4 ° C ջերմաստիճանում: Լիպիդների ուսումնասիրության համար ֆիքսումը Կարնոյի հեղուկում պիտանի չէ։ Բացի այդ, օգտագործվում է Zenker-ի հեղուկը, հատկապես ոսկու և արծաթի աղերով ներծծվելիս։ Zenker-ի հեղուկի և քացախաթթվի խառնուրդով բուժումից հետո էրիթրոցիտները ձեռք են բերում երկակի բեկման հատկություն։

Բևեռացնող մանրադիտակով խիտ հյուսվածքները (ոսկորներ, ատամներ) ուսումնասիրելիս, բացի թթվային դեկալցիֆիկացիայից, անհրաժեշտ է լրացուցիչ մշակում կոլագենի մանրաթելերը հեռացնելու համար: Այդ նպատակով նման հյուսվածքների հատվածները մի քանի րոպե եփում են գլիցերինի և կալիումի հիդրօքսիդի (10 մլ գլիցերին և 2 հատիկ կալիումի հիդրօքսիդ) խառնուրդում մինչև ամբողջովին սպիտակելը, այնուհետև ալկալին զգուշորեն քամում են, հատվածը լվանում ջրով։ և պինցետով տեղափոխվում է մանրադիտակի փուլ։

Բևեռացնող մանրադիտակի համար օգտագործվում են պարաֆին, սառեցված և կրիոստատիկ հատվածներ: Բևեռացված լույսի հետազոտման համար սառեցված չբիծված հատվածները ներկառուցված են գլիցերինի մեջ: Չֆիքսված կրիոստատի հատվածները հարմար են բևեռացման մանրադիտակային վերլուծության համար պատրաստումից անմիջապես հետո: Վնասակար ազդեցությունների նկատմամբ նրանց բարձր զգայունության պատճառով տարբեր գործոններշրջակա միջավայրում, այս հատվածները դեռ խորհուրդ է տրվում ամրացնել 10% չեզոք ֆորմալինի կամ կալցիում-ֆորմոլի լուծույթում:

Բևեռացնող մանրադիտակի արդյունքների վրա ազդում է հյուսվածքաբանական հատվածների հաստությունը: Հաստ հատվածներն ուսումնասիրելիս պայմաններ են ստեղծվում տարբեր անիզոտրոպ կառուցվածքներ իրար վրա դնելու համար։ Բացի այդ, ուսումնասիրվող կառույցների անիզոտրոպ հատկությունները կարող են փոխվել տարբեր շերտերի հաստության դեպքում, հետևաբար, շատ կարևոր է, հատկապես համեմատական ​​ուսումնասիրություններում, ապահովել շերտի հաստությունը: Շերտի առաջարկվող առավելագույն հաստությունը չպետք է գերազանցի 10 մկմ:

Մեկ այլ նախապայման է հատվածների մանրակրկիտ ապապարաֆինացումը, քանի որ չհեռացված պարաֆինի մնացորդները տալիս են ընդգծված անիզոտրոպային էֆեկտ՝ դժվարացնելով ուսումնասիրությունը: Պարաֆինը հատկապես երկար է մնում էրիթրոցիտների և բջջային միջուկների վրա: Պարաֆինը հատվածներից ամբողջությամբ հեռացնելու համար խորհուրդ է տրվում իրականացնել դրանց հետևյալ մշակումը.

  • Քսիլեն 30 ր
  • Ալկոհոլ 100% 5 րոպե
  • Մեթանոլի և քլորոֆորմի խառնուրդ (1:1) 50 °С 24 ժ.
  • Ալկոհոլ 100% 5 րոպե
  • Ալկոհոլ 70% 10 րոպե Ջուր

Պետք է նաև նկատի ունենալ, որ բևեռացման մանրադիտակի ենթարկված հատվածները չպետք է շփվեն ֆենոլների հետ (օրինակ, դրանք չեն կարող մաքրվել կարբոքսիլաթթվի մեջ):

Բևեռացնող մանրադիտակի և փոխհատուցիչների օգտագործման մասին լրացուցիչ տեղեկություններ կարելի է գտնել (http://www.olympusmicro.com/primer/techniques/polarized/polarizedhome.html):

Եթե ​​բևեռացնող մանրադիտակի վերաբերյալ հարցեր ունեք, դիմեք մանրադիտակի դպրոց:

Մանրադիտակի տարբեր սարքերից բևեռացնող մանրադիտակները տեխնիկապես ամենաբարդն են: Սարքի դիզայնի նկատմամբ նման ուշադրությունը արտադրական առումով պայմանավորված է պատկեր ստանալու անհրաժեշտությամբ ամենաբարձր որակը, որի վրա անմիջականորեն ազդում է մանրադիտակի օպտիկական և լուսավորող մասերի դիզայնը։ Մանրադիտակի համար բևեռացնող սարքերի օգտագործման հիմնական ոլորտը հանքանյութերի, բյուրեղների, խարամների, անիզոտրոպ առարկաների, տեքստիլ և հրակայուն արտադրանքների, ինչպես նաև այլ նյութերի ուսումնասիրությունն է, որոնք բնութագրվում են երկակի բեկում. Վերջին սկզբունքը հիմք է հանդիսանում մանրադիտակի այնպիսի սարքերում պատկերի ձևավորման համար, որոնցում հետազոտվող նմուշը ճառագայթվում է բևեռացման ճառագայթներով: Այս դեպքում նմուշների անիզոտրոպ հատկությունները հայտնվում են ճառագայթի ուղղությունը փոխելուց հետո։ Այս նպատակների համար բևեռացնող մանրադիտակները նախագծված են դաշտային զտիչներով, որոնք պտտվում են միմյանց նկատմամբ տարբեր հարթություններում. անալիզատորը պտտվում է 180 աստիճանով, իսկ բևեռացնողը պտտվում է 360. այլ տեսակի մանրադիտակներով:

Նմուշի ուսումնասիրությունը բևեռացնող մանրադիտակի տակ սկսվում է բևեռացնողի տեղադրմամբ մանրադիտակի լուսավորող մասում կոնդենսատորի տակ, բացվածքի դիֆրագմայի կողքին: Միևնույն ժամանակ, անալիզատորը գտնվում է ակնոցի և ոսպնյակի միջև՝ վերջինիս հետևում լույսի ճառագայթների ճանապարհով: Մանրադիտակի համար նման գործիքի ճիշտ տեղադրման դեպքում ֆիլտրի դաշտերը հատելուց հետո տեսանելի դաշտը միատեսակ մութ կլինի՝ ձևավորելով այսպես կոչված մարման էֆեկտը։ Սարքի կարգավորումներն ավարտելուց հետո փորձանմուշը ամրացվում է բեմի վրա և կատարվում է դրա ուսումնասիրությունը։ Բևեռացնող մանրադիտակների փուլերը կենտրոնացած են օպտիկական առանցքի նկատմամբ և կարող են պտտվել 360 աստիճանով, իսկ լաբորատոր և հետազոտական ​​նպատակներով նմանատիպ սարքերում ունեն նաև վերնիե։ Բևեռացնող մանրադիտակների օպտիկան և լուսավորության համակարգը ամենաբարձր որակի և այնպիսի ճշգրիտ արտադրության են, որոնք թույլ են տալիս ստանալ ամենապարզ պատկերն առանց աղավաղումների: Հաճախ բևեռացված լույսի ներքո նմուշների ուսումնասիրման սարքերի մի շարք ներառում է փոխհատուցիչ և Բերտրանդի ոսպնյակ: Առաջինը հնարավորություն է տալիս արդյունավետորեն ուսումնասիրել հանքանյութերի կառուցվածքը, իսկ ոսպնյակը՝ մեծացնել և կենտրոնացնել դիտարկման տարածքը, երբ պատկերի փոփոխությունները հայտնվում են բեմի շրջադարձից հետո: Այսօր շուկայում առկա են միկրոսկոպիայի համար նախատեսված նման սարքերի երեք հիմնական տեսակ՝ դրանք արդեն նշված հետազոտական ​​և լաբորատոր սարքերն են, ինչպես նաև գործող բևեռացնող մանրադիտակը։

E. Մութ դաշտի մանրադիտակ:

18. Մանրադիտակը բաղկացած է օպտիկական եւ մեխանիկական մասերից։ Որոնք են օպտիկական մասերը:

A. Խողովակ, ակնաբույժ, կոնդենսատոր

B. Ռևոլվեր, մակրո և միկրո պտուտակ, հայելի

Գ. Ռևոլվեր, ակնաբույժ

Դ. Ակնափոր, Կոնդենսատոր, Օբյեկտիվ

E. Խողովակ, ակնոց, ատրճանակ

19. Ուլտրամանուշակագույն ճառագայթները որպես լույսի աղբյուր օգտագործելիս մանրադիտակի թույլտվությունը մեծանում է։ Ո՞ր մանրադիտակային գործիքներն են օգտագործում այս լույսի աղբյուրը:

A. Darkfield և լյումինեսցենտ

B. Լյումինեսցենտ, ուլտրամանուշակագույն

Գ. Լուսավոր և էլեկտրոնային

D. Ֆազային հակադրություն, ուլտրամանուշակագույն

E. բևեռացնող, ուլտրամանուշակագույն

20. Մանրադիտակը բաղկացած է մեխանիկական և օպտիկական մասերից։ Մանրադիտակի ո՞ր մասն ունի դիֆրագմա:

Ա. Ակնոց և ոսպնյակ

Բ. Ակնափոր և կոնդենսատոր

C. Խողովակ և ակնաբույժ

D. Ոսպնյակներ և կոնդենսատոր

E. Խողովակ, ոսպնյակ, ակնաբույժ

21. Փորձի ժամանակ օգտագործվել են կենդանի առարկաներ, որոնցում անհրաժեշտ է որոշել շարքը քիմիական բաղադրիչներօգտագործելով կենսական դիտարկում: Մանրադիտակային հետազոտության ի՞նչ մեթոդ է կիրառվելու:

Ա. Ֆազային կոնտրաստային մանրադիտակ

B. Էլեկտրոնային մանրադիտակ

Գ. Ֆլուորեսցենտային մանրադիտակ

E Մութ դաշտի մանրադիտակ:

22. Բջիջների հյուսվածաբանական հետազոտության համար օգտագործվել են ֆոսֆորներ։ Ի՞նչ տեսակի մանրադիտակ է օգտագործվել այս դեպքում:

Ա. Լույսի մանրադիտակ

B. Էլեկտրոնային մանրադիտակ

Գ. Ֆլուորեսցենտային մանրադիտակ

E. բևեռացնող մանրադիտակ

E. Մութ դաշտի մանրադիտակ:

23. Հետազոտողին հանձնարարվում է ստանալ տարածական ներկայացումուսումնասիրվող օբյեկտի կառուցվածքների մասին. Ի՞նչ մանրադիտակային սարքով է աշխատելու մասնագետը։

Ա. Ուլտրամանուշակագույն մանրադիտակ,

Բ. Ֆազային կոնտրաստային մանրադիտակ,

Գ. Փոխանցման էլեկտրոնային մանրադիտակ,

Դ. Սկանավորող էլեկտրոնային մանրադիտակ,

E. բևեռացնող մանրադիտակ

24. Որպես լույսի աղբյուր օգտագործվում են սնդիկ-քվարցային լամպերը։ Որքա՞ն է այս լույսի աղբյուրով մանրադիտակի լուծողական ուժը:

25. Մանրադիտակի լուծումը կախված է լույսի աղբյուրի ալիքի երկարությունից: Որքա՞ն է լուսային մանրադիտակի լուծողական ուժը:

26. Հյուսվածքաբանական պատրաստուկի ուսումնասիրությունը սկսելուց առաջ անհրաժեշտ է հավասարաչափ լուսավորել տեսադաշտը։ Մանրադիտակի ո՞ր մասերն են օգտագործվում դրա համար:

A. Micro- և macrovit

B. Կոնդենսատոր և հայելի

C. Խողովակի և խողովակի պահող

D. Խողովակ և ակնաբույժ

27. Հետազոտողին հանձնարարվել էր ուսումնասիրել էրիթրոցիտների պլազմոլեմայի ուլտրամանրադիտակային կառուցվածքը: Ինչ մանրադիտակային գործիք է օգտագործվելու:

Ա Լույս

B. Ֆազային հակադրություն

C. Էլեկտրոնային

D. Բևեռացում

E. Ուլտրամանուշակագույն

28. Կմախքի մկանային հյուսվածքն ուսումնասիրելիս անհրաժեշտ է որոշել հյուսվածքի իզո- եւ անիզոտրոպ կառուցվածքները: Ինչ տեսակի մանրադիտակ է օգտագործվելու:

Ա Լույս

B. Ֆազային հակադրություն

C. Էլեկտրոնային

D. Բևեռացում

E. Ուլտրամիկրոսկոպիկ

29. Լյումինեսցենտային մանրադիտակի լուծումը կախված է լույսի աղբյուրի ալիքի երկարությունից: Ինչի՞ն է դա հավասար։

A. 0.1 մկմ C. 0.4 մկմ

H. 0.2 մկմ D. 0.1 նմ

30. Կլինիկական լաբորատորիայում արյան ընդհանուր անալիզն ուսումնասիրելու համար կիրառվում են մանրադիտակային հետազոտություններ: Ինչպիսի՞ մանրադիտակ է անհրաժեշտ դրա համար:

Ա. Լույս,

Բ. Ֆազային հակադրություն,

Գ. Էլեկտրոնային,

Դ. Բևեռացում,

E. Ուլտրամանուշակագույն.

31. Հետազոտության է ներկայացվում բնական լյումինեսցենտով կենդանի առարկա: Ինչ տեսակի մանրադիտակ պետք է օգտագործվի այս հետազոտության մեջ:

Ա Լույս

B. Ֆազային հակադրություն

C. Էլեկտրոնային

D. Բևեռացում

E. Ուլտրամանուշակագույն

32. Բիոպսիայի արդյունքում ստացվել է ուռուցքային բջիջների նյութ։ Անհրաժեշտ է ուսումնասիրել դրանց ուլտրամիկրոսկոպիկ կառուցվածքը։ Ինչ տեսակի մանրադիտակ է օգտագործվում այս ուսումնասիրության մեջ:

Ա Լույս

B. Ֆազային հակադրություն

C. Էլեկտրոնային

D. Բևեռացում

E. Ուլտրամանուշակագույն

ԹԵՄԱ 2. ՀԻՄՆԱԲԱՆԱԿԱՆ ՏԵԽՆԻԿԱ

Լույսի և էլեկտրոնային մանրադիտակի պատրաստման հիմնական սկզբունքները, նյութ վերցնելը (բիոպսիա, ասեղային պունկցիոն բիոպսիա, դիահերձում). Ֆիքսացիա, ջրազրկում, առարկաների խտացում, միկրոտոմների և ուլտրամիկրոտոմների վրա հատվածների պատրաստում։ Մի պատրաստուկների տեսակները՝ կտրվածք, քսում, դրոշմում, թաղանթներ, բարակ հատված։ Գունավորում և հակադրություն պատրաստուկներ. Հյուսվածքաբանական բծերի հայեցակարգը.

Մանրադիտակային տեխնիկա.

Բջջաբանական և հյուսվածքաբանական վերլուծության հիմնական փուլերը.

Ուսումնասիրության օբյեկտի ընտրություն

Պատրաստել այն մանրադիտակի տակ հետազոտության համար

Մանրադիտակի մեթոդների կիրառում

Ստացված պատկերների որակական և քանակական վերլուծություն

Հյուսվածքաբանական տեխնիկայում օգտագործվող մեթոդները.

1. Կյանքի ընթացքում:

2. Հետմահու.

I ԿՅԱՆՔԻ ՄԵԹՈԴՆԵՐ

Ցմահ հետազոտության նպատակն է տեղեկատվություն ստանալ բջջի կյանքի մասին՝ շարժում, բաժանում, աճ, տարբերակում, բջիջների փոխազդեցություն, կյանքի տևողությունը, ոչնչացումը, տարբեր գործոնների ազդեցության տակ ռեակտիվ փոփոխություններ:

Կենդանի բջիջների և հյուսվածքների ուսումնասիրությունը հնարավոր է մարմնից դուրս (in vitro) կամ մարմնի ներսում (in vivo):

Ա. Կուլտուրայում կենդանի բջիջների և հյուսվածքների ուսումնասիրություն (in vitro)

Մշակության մեթոդ

Կան՝ ա) կասեցման կուլտուրաներ (սննդային միջավայրում կասեցված բջիջներ), բ) հյուսվածք, գ) օրգան, դ) միաշերտ։

Ամենատարածվածը մարմնից դուրս հյուսվածքների մշակման մեթոդն է: Հյուսվածքը կարելի է մշակել հատուկ թափանցիկ հերմետիկ փակ խցիկներում։ Ստերիլ պայմաններում խցիկում տեղադրվում է սննդարար միջավայրի կաթիլ: Լավագույն սննդարար միջավայրը արյան պլազման է, որին ավելացվում է սաղմնային էքստրակտ (սաղմի հյուսվածքներից քաղվածք, որը պարունակում է մեծ քանակությամբ աճը խթանող նյութեր)։ Այնտեղ տեղադրվում է նաև օրգանի կամ հյուսվածքի մի կտոր (1 մմ3-ից ոչ ավելի), որը պետք է մշակվի։

Մշակված հյուսվածքը պետք է պահել օրգանիզմի մարմնի ջերմաստիճանում, որի հյուսվածքը վերցվել է հետազոտության համար։ Որովհետեւ կուլտուրայի միջավայրարագ դառնում է անօգտագործելի (այն կուտակում է մշակովի հյուսվածքի կողմից թողարկված քայքայված մթերքները), ապա 3-5 օրը մեկ այն պետք է փոխել։

Կուլտիվացման մեթոդի կիրառումը հնարավորություն է տվել բացահայտել դիֆերենցման մի շարք օրինաչափություններ, բջիջների չարորակ փոխակերպումներ, բջիջների փոխազդեցություններ միմյանց հետ, ինչպես նաև վիրուսների և մանրէների հետ։ Սաղմնային հյուսվածքների մշակումը հնարավորություն տվեց ուսումնասիրել ոսկորների, աճառների, մաշկի և այլնի զարգացումը։

Մշակման մեթոդը առանձնահատուկ նշանակություն ունի մարդու բջիջների և հյուսվածքների վրա փորձարարական դիտարկումներ անցկացնելու, մասնավորապես սեռը որոշելու, չարորակ այլասերվածությունը, ժառանգական հիվանդությունները և այլն:

Մեթոդի թերությունները.

1. Այս մեթոդի հիմնական թերությունն այն է, որ հյուսվածքը կամ օրգանը հետազոտվում է մարմնից առանձին: Չզգալով մարմնի նյարդահումորալ ազդեցությունը, այն կորցնում է իր բնորոշ տարբերակումը:

2. Հաճախակի փոխպատվաստումների անհրաժեշտություն (երկարատև աճեցմամբ):

3. Հյուսվածքների բեկման նույն գործակիցը.


Նմանատիպ տեղեկատվություն.