ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #1

ՍՆՆԴԻԿ ՄԻՋՈՑՆԵՐԻ ՊԱՏՐԱՍՏՈՒՄ ԵՎ ԴՐԱՆՑ ՍՏԵՐԼԻԶՄԱՆ ՄԵԹՈԴՆԵՐ.

ՄԻԿՐՈՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ԱՇԽԱՏԱԿՑՄԱՆ ԱՌԱՆՁՆԱՀԱՏԿՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԸ

Թիրախ: Ուսումնասիրել մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատանքի կանոնները, միկրոօրգանիզմների մշակման առանձնահատկությունները, սննդարար միջավայրերի պատրաստման եղանակները և դրանց մանրէազերծման եղանակները:

Առաջադրանքներ

Ծանոթացեք վարքագծի կանոններին մանրէաբանական սեմինար անցկացնելիս:

Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմների աճեցման առանձնահատկությունները:

Իմացեք մշակութային միջավայրի պատրաստման և լցնելու մեթոդները:

Սովորել ապակե սպասքի և կուլտուրական միջավայրի մանրէազերծման մեթոդներ:

Պատրաստել և լցնել MPA սնուցող միջավայրը:

Ձեռք բերեք խոտի և կարտոֆիլի ձողիկների հարստացման մշակույթ:

գրականություն

Անիկեև Վ.Վ., Լուկոմսկայա Կ.Ա. Մանրէաբանության գործնական վարժությունների ուղեցույց. Մ.: Լուսավորություն, - 1983:

Գուսև Մ.Վ. Մանրէաբանություն. դասագիրք համալսարանների համար / M.V. Գուսև, Լ.Ա. Մինեեւը։ - Մոսկվա, 2004 թ

Էմցեւ Վ.Տ. Մանրէաբանություն. դասագիրք համալսարանների համար / V.T. Էմցև, Է.Ն. Միշուստին. - Մ.: Բուստարդ, 2005 թ.

Լուկոմսկայա Կ.Ա. Մանրէաբանություն՝ վիրուսաբանության հիմունքներով. Մ.: Լուսավորություն, - 1983:

Մանրէաբանության, վիրուսաբանության և իմունոլոգիայի հիմունքներ. / Տակ. Խմբագրվել է Վորոբյով Ա.Ա. and Krivoshein Yu.S. - Մ.: Masterstvo, 2001:

Պիմենովա Մ.Ն. Մանրէաբանության գործնական վարժությունների ուղեցույց. Մոսկվա, 1971 թ.

Սեմինար մանրէաբանության վերաբերյալ. Էդ. Նետրուսովա Ա.Ի. - Մ .: Ակադեմիա, - 2005 թ.

Tepper E.Z. Սեմինար մանրէաբանության վերաբերյալ. - Մ.: Բուստարդ, 2004:

Նյութեր և սարքավորումներ.Ստերիլ Petri սպասք, հետստերիլ կոնաձև կոլբաներ 100-150 մլ,սնուցող ագար, պեպտոն, խոտ, կարտոֆիլի պալար, կավիճ, սալիկներ, սպիրտային լամպեր, կոլբաներ, բամբակյա բուրդ, շղարշ, պիպետներ, կշեռքներ, կշիռներ, թերմոստատ:

Հիմնական հասկացություններ.Մշակություն, մշակույթ, մակերեսային մշակույթ, խորը մշակույթ, խմբաքանակային մշակույթ, շարունակական մշակույթ, մաքուր մշակույթ, հարստացման մշակույթ, պատվաստում, ինկուբացիա, անցում, ընտրովի միջավայր, հարստացման միջավայր, օպտիմալ միջավայր, բնական միջավայր, սինթետիկ միջավայր, կիսասինթետիկ միջավայր, ագար, ստերիլիզացում, բոցավառում, թինդալացում, պաստերիզացում, ավտոկլավացում, MPA:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Իմացեք աշխատանքի կանոնները մանրէաբանական սեմինար կատարելիս:

Առաջադրանք թիվ 2. Ուսումնասիրել սննդանյութերի դասակարգումը, դրանց պատրաստման և շշալցման առանձնահատկությունները, սննդանյութերի և ապակյա իրերի մանրէազերծման եղանակները:

Առաջադրանք թիվ 3. Պատրաստեք և լցրեք MPA սննդային միջավայրը ստերիլ Պետրի ափսեների մեջ:

Առաջադրանք թիվ 4. Ձեռք բերեք խոտի ձողիկների հարստացման մշակույթ(Bacillus subtilis):

Խոտը մանր կտրատում են և դնում 500 մլ տարողությամբ կոլբայի մեջ՝ լցնելով ծավալի մեկ քառորդը, ավելացնում են մի պտղունց կավիճ և եփում 15-20 րոպե, մինչև միջավայրը ստանա թունդ թեյի թուրմի գույն։ Խոտի թուրմը լցնում են 1,0-1,5 սմ շերտով ստերիլ 100-150 մլ կոնաձև կոլբայի մեջ, փակում բամբակյա խցաններով և դնում 22-25 °C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։

Երկու օր անց միջավայրի մակերեսին առաջանում է սպիտակավուն թաղանթ։Դուք. սուբտիլիս, որը ծերացման ժամանակ՝ 3-4-րդ օրը, դառնում է գորշ-կանաչավուն։ Այլ միկրոօրգանիզմները միաժամանակ աճում են հազվադեպ և փոքր քանակությամբ:

Առաջադրանք թիվ 5. Ձեռք բերեք կարտոֆիլի ձողիկի հարստացման մշակույթ(Vas. subtilis var. mesentericus):

Լվացված կարտոֆիլի պալարները, առանց կեղևազրկելու, կտրատված են: Նրանց մակերեսը քսում են կավիճով, որպեսզի չեզոքացնեն միջավայրը և տեղադրում են ստերիլ Պետրի ամանների մեջ թորած ջրով թրջված զտիչ թղթի կրկնակի շերտի վրա: Կարտոֆիլի միջավայրով բաժակները 10 րոպե պահվում են ավտոկլավում 0,5 ատմ-ում և 3-4 օր տեղադրվում 27-30°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։

Կարտոֆիլի շերտերի մակերեսին ձևավորվում է կարտոֆիլի ձողիկի կուլտուրայի խիտ կնճռոտ թաղանթ։ Ֆիլմի գույնը կարող է տարբեր լինել՝ սպիտակավուն մոխրագույն, վարդագույն, դեղնադարչնագույն, սև, ինչը կախված է գերակշռող զարգացում ստացած մշակույթի տեսակներից։

Վերահսկիչ հարցեր

Սննդային միջավայրերի դասակարգում.

Լաբորատոր ապակյա սպասքի և կուլտուրայի միջավայրի մանրէազերծման մեթոդներ.

Առանձին սննդային միջավայրերի (MPB, MPA, MPZH, SA, KA և այլն) պատրաստման մեթոդներ.

Միկրոօրգանիզմների աճեցման առանձնահատկությունները (մակերեսային և խորը, պարբերական և շարունակական): հարստացում և մաքուր մշակույթներ:

Միկրոօրգանիզմների բնիկ և ֆիքսված պատրաստուկների պատրաստման մեթոդներ.

Ուսումնասիրել մանրէաբանության գիտության զարգացման հիմնական փուլերը, ռուս և օտարերկրյա գիտնականների ներդրումը դրա զարգացման գործում: Լրացրե՛ք թիվ 1 աղյուսակը։

Աղյուսակ թիվ 1. Մանրէաբանության զարգացման պատմություն

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #2

ՄԻԿՐՈՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ԿԵՆԴԱՆԻ ԵՎ ՖԻԿՐԱՑՎԱԾ ՊՐԵՊԱՐԱՏՆԵՐԻ ՊԱՏՐԱՍՏՈՒՄ ԵՎ ԾԱՆՈԹՈՒԹՅՈՒՆ ԴՐԱՆՑ ՄՈՐՖՈԼՈԳԻԱՅԻՆ.

Թիրախ: Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրության մեջ միկրոպատրաստուկների պատրաստման մեթոդներն ու տեխնիկան և ծանոթանալ դրանց մորֆոլոգիայի հետ:

Առաջադրանքներ.

Ուսումնասիրել բակտերիալ բջիջների մորֆոլոգիայի առանձնահատկությունները:

Պատրաստել միկրոօրգանիզմների ինտրավիտալ և ֆիքսված միկրոպատրաստուկներ:

Նյութեր և սարքավորումներ.Ապակե սլայդներ, մանրէաբանական օղակ, սպիրտային լամպ, ֆիլտրի թուղթ, պատրաստուկների համար կամուրջով բյուրեղացնող, ջրով լվանալ շիշը, ներկանյութերի ջրային լուծույթները՝ ֆուքսին, մեթիլեն կապույտ, գենդիանուշակ (այսուհետ՝ միկրոպատրաստուկների պատրաստման սարքավորում); ընկղմման յուղ, մանրադիտակ; մսաջուր, խմորիչ, խոտի և կարտոֆիլի ձողիկների կուլտուրաներ։

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Կատարեք բակտերիալ բջիջների ողջ կյանքի ընթացքում ուսումնասիրություն հետևյալ մեթոդներով, կատարեք գծագրեր.

մանրացված կաթիլ մեթոդ.Հեղուկներից մեկի կաթիլը կիրառվում է մանրէաբանական օղակով ապակե սլայդի վրա: Կափարիչի ապակին դրվում է եզրին, կաթիլների եզրին և աստիճանաբար իջեցվում է դրա վրա:

կախովի կաթիլ մեթոդ.Ծածկույթի ապակու կենտրոնում մանրէաբանական օղակով քսվում է փորձարկման հեղուկի փոքր կաթիլը և այն շրջվում է հատուկ ապակե սլայդի խորքից:

Դեղորայք «դրոշմ».Ագարի միջավայրից, որի վրա միկրոօրգանիզմները աճում են շարունակական սիզամարգով կամ առանձին գաղութների տեսքով, կտրում են մի փոքրիկ խորանարդ և տեղափոխում ապակե սլայդի վրա, որպեսզի միկրոօրգանիզմներով մակերեսը դեպի վեր լինի: Այնուհետև մաքուր ծածկը կիրառվում է մարգագետինին կամ գաղութին, թեթևակի սեղմում են դրա վրա օղակով կամ պինցետով և անմիջապես հանվում՝ փորձելով չշարժվել: Ստացված պատրաստուկը տեղադրվում է մի կաթիլ ջրի կամ մեթիլեն կապույտի մեջ (1:40) ապակե սլայդի վրա:

Առաջադրանք թիվ 2. Պատրաստել ֆիքսված պատրաստուկԴուք. subtilis, Vas. subtilis var mesentericus, Սբ. lactis, S. cerevisiae, E. coli(նկ. թիվ 1, 2, 3, 4 դիմումներ),նկարներ անել.

Դիմում. Ապակե սլայդը չորանում է ալկոհոլային լամպի բոցի վրա։ Այրիչի բոցի վրա մանրէազերծված մանրէաբանական օղակը կիրառվում է ապակու սլայդի կենտրոնում՝ փորձարկման նյութի քսուքով: Եթե ​​միկրոօրգանիզմի կուլտուրան աճեցվում է խիտ սննդարար միջավայրի վրա, ապա ապակու վրա նախ մի կաթիլ ջուր են լցնում, մանրէաբանական օղակով դրա մեջ ներմուծվում է փոքր քանակությամբ նյութ և արվում է քսուք։

Չորացում և ամրացում։ Դեղը չորանում է օդում, այնուհետև ամրացվում: Միկրոօրգանիզմների սովորական քսուքները ջերմորեն ամրացվում են՝ ապակին 2-3 անգամ անցնելով այրիչի կրակի միջով՝ քսուքը վերև։Կեղտի ամրացումը հանգեցնում է միկրոօրգանիզմների մահվան, ապակու մակերեսին դրանց խիտ կպչունությանը և ներկանյութի նկատմամբ մանրէների ավելի հեշտ ընկալունակությանը:

Գունավորում. Մակերեւույթը լցնել ցանկացած ներկի լուծույթով 2-3 րոպե (մեթիլեն կապույտ, գենդիանուշակ, մանուշակագույն): Տարբերելպարզ և դիֆերենցիալմիկրոօրգանիզմների ներկում. Առաջին դեպքում ամբողջ բջիջը ներկվում է, որպեսզի դրա ձևն ու չափերը հստակ տեսանելի լինեն։ Դիֆերենցիալ ներկումը բացահայտում է միայն որոշակի բջջային կառուցվածքներ և պահեստային նյութեր:

ողողում. Այնուհետև քսուքից ներկը լվանում են լվացքի շշի ջրով, պատրաստուկի ստորին կողմը սրբում են ֆիլտրի թղթի շերտով, վերին կողմը խնամքով չորանում և մանրադիտակով զննում:

Միկրոօրգանիզմների ընդհանուր բնութագրերը. Պրոկարիոտների և էուկարիոտների տարբերակիչ առանձնահատկությունները.

Բակտերիալ բջիջների ձևն ու չափը. Բակտերիաների մորֆոլոգիական տեսակները.

Միկրոօրգանիզմների համակարգվածության հիմունքները. Բակտերիաների դիրքը օրգանիզմների համակարգում և դրանց փոփոխականությունը: Տեսակների նույնականացման մեջ օգտագործվող բակտերիաների բնութագրերը.

-ի համառոտ նկարագրությունըպատվիրել Schizomycetales.

Actinomycetales կարգի համառոտ նկարագրությունը. Նոկարդիա. Միկոբակտերիաներ.

Myxobacteriales կարգի համառոտ նկարագրությունը.

Սունկ. Զիգո-, ասկո- և դեյտերոմիցետների համառոտ նկարագրություն.

Լրացրե՛ք թիվ 2 աղյուսակը։

Աղյուսակ թիվ 2. Տարբերությունները էուկարիոտների և պրոկարիոտների միջև

Գծային քրոմոսոմներ

Հարցեր ինքնուրույն ուսումնասիրության համար

Բակտերիաների առանձին խմբերի համառոտ նկարագրությունը (ըստ Բերգեյի բակտերիաների որոշիչի).

Ջրիմուռների մորֆոլոգիական բնութագրերը և սիստեմատիկան:

Նախակենդանիների մորֆոլոգիական բնութագրերը և սիստեմատիկան:

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #3

Ներառումների, պարկուճների և էնդոսպորների գունավորում, գրամ ներկում

Թիրախ: Իմացեք, թե ինչպես ներկել սպորները, պարկուճները և ներդիրները բակտերիալ բջիջ; ուսումնասիրել դրա բջջաբանական հատկությունները՝ որպես օրինակ օգտագործելով Գրամ ներկը:

Առաջադրանքներ.

Հայտնաբերել լիպիդային հատիկներ խմորիչ բջիջներում:

Հայտնաբերել գլիկոգենի նման պոլիսախարիդներ խմորիչ բջիջներում:

Բակտերիալ բջիջի պարկուճները հայտնաբերել բացասական հակադրության մեթոդով (օրինակ.Ազոտոբակտեր):

Կատարել սպորների և ցիտոպլազմայի դիֆերենցիալ ներկում Օժեշկա մեթոդով:

Կատարեք բակտերիաների վրա գրամ բիծ:

Նյութեր և սարքավորումներ.Սլայդներ, մանրէաբանական օղակ, սպիրտային լամպ, ֆիլտրի թուղթ, պատրաստուկների համար կամուրջով բյուրեղացուցիչ, շիշը լվանալ ջրով, մանրադիտակ: Ներկանյութերի ջրային լուծույթներ՝ ֆուքսին, մեթիլեն կապույտ, գենտյան մանուշակ, Ցիլյա կարբոլիկ ֆուքսին, Սուդան III։ Ընկղման յուղ, ծծմբաթթու 1%, թանաք, աղաթթու 0.5%, Լուգոլի լուծույթ: մշակույթներըVas.subtilis, Vas.mycoides, S.cerevisiae, E.coli:

Հիմնական հասկացություններ.Մուրեյին, վոլուտին, նուկլեոիդ, գլիկոգեն, պարկուճներ, բջջային պատ, պոլիսաքարիդներ, պոլիֆոսֆատներ, մետախրոմատիկ հատիկներ, մոնոտրիխներ, պերիտրիկիս, լոֆոտրիխներ, բացիլային ձև, կլոստրիդային ձև, պլեկտրիդիային ձև, էքսին, ինտին, մետախրոմոզիա:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Հայտնաբերել պոլիֆոսֆատների (վոլուտինի) ընդգրկումները խմորիչ բջիջներում:Վոլուտինը սնկային և խմորիչ բջիջներում տեղայնացված է վակուոլներում, բակտերիաներում և ակտինոմիցետներում՝ ցիտոպլազմայում։ Պահուստային ֆոսֆոր և ազոտ պարունակող նյութ է՝ նուկլեինաթթուների ածանցյալ։ բնորոշ հատկություն- մետախրոմոզ, այսինքն՝ այլ գույն ձեռք բերելու ունակություն, քան այն գունավորող նյութերը։

Վոլուտինի գունավորում Օմելյանսկու մեթոդով.Միկրոօրգանիզմի կուլտուրից բարակ քսուք են պատրաստում ապակե սլայդի վրա, չորացնում օդում, ամրացնում կրակի վրա, ներկում կարբոլիկ ֆուչսինով 30–40 վրկ և լվանում ջրով։ Տարբերակել՝ 20-30 վայրկյան ընկղմելով կոլբայի մեջ 1% ծծմբաթթվի լուծույթով և անմիջապես լվանալ ջրով։ Ծծմբաթթուն գունաթափում է ցիտոպլազմը, իսկ վոլուտինի հատիկները մնում են մագենտա ներկված: Պատրաստուկը 20-30 վրկ հականերկվում է մեթիլեն կապույտով (1:40), լվանում ջրով, չորացնում օդում և մանրադիտակով: Պատրաստման վրա վոլուտինի հատիկները գունավորվում են կարմիր, բջիջների ցիտոպլազմը՝ կապույտ (նկ. No1, 2 հավելված)։

Առաջադրանք թիվ 2. Հայտնաբերել լիպիդային հատիկներ խմորիչ բջիջներում: Պահուստային լիպիդները խմորիչի և թելիկ սնկերի մեջ ներկայացված են չեզոք ճարպերով. բակտերիաներում այս ֆունկցիան կատարում է հիդրօքսիբուտիրաթթուն:

Ճարպային ներդիրների գունավորում.Սուդանի III լուծույթի մի կաթիլը ավելացվում է միկրոօրգանիզմների ջրային կախույթի մի կաթիլին ապակե սլայդի վրա, որը ծածկված է ծածկով և մանրադիտակով կատարվում է VI-40 օբյեկտի միջոցով: Սուդան III-ը լուծվում է բակտերիաների բջջի ճարպային ներդիրներում՝ դրանք ներկելով նարնջագույն-կարմիր գույնով։ Բջջի ցիտոպլազմը մնում է անգույն։

Առաջադրանք թիվ 3. Հայտնաբերել գլիկոգենի նման պոլիսախարիդներ խմորիչ բջիջներում: Բակտերիաների բջիջներում ածխաջրային բնույթի պահուստային նյութերը կուտակվում են հատիկների տեսքով։ Գրանուլոզը օսլայի նման նյութ է, որը, երբ փոխազդում է Լուգոլի ռեագենտի հետ, դառնում է կապույտ; գլիկոգենը պոլիսախարիդ է, որը նույն պայմաններում դառնում է կարմրավուն շագանակագույն: Գրանուլոզը հայտնաբերվում է միայն պրոկարիոտիկ բջիջներում:

Գլիկոգենի և գրանուլոզայի բիծ:Թույլ Լուգոլի լուծույթի մի կաթիլը ավելացվում է միկրոօրգանիզմների կասեցման կաթիլին ապակե սլայդի վրա, որը ծածկված է կափարիչով և մանրադիտակով կատարվում է VI-40 օբյեկտի միջոցով:

Առաջադրանք թիվ 4. Բակտերիալ բջիջների պարկուճները հայտնաբերել բացասական հակադրությամբ (inԱզոտոբակտեր):

Բացասական ինտրավիտալ պատրաստուկի վրա պարկուճների նույնականացում:Սև թանաքի մեծ կաթիլը կիրառվում է մանրէաբանական օղակով լավ յուղազերծված ապակու սլայդի վրա, և ուսումնասիրվող միկրոօրգանիզմի մշակույթի մի կաթիլ ներմուծվում է դրա մեջ, որը բաշխվում է ապակե սլայդի միջոցով և չորանում: Բուժեք ընկղմման համակարգով: Դիակի մուգ ֆոնի վրա բացահայտվում են պարկուճների թափանցիկ գոտիներ կտրուկ ընդգծված բջիջների շուրջ (նկ. No 8. Հավելված)։

Առաջադրանք թիվ 5. Կատարել սպորների և ցիտոպլազմայի դիֆերենցիալ ներկում (inԴուք. միկոիդներ):

Օժեշկա մեթոդ. Չորացրած պատրաստուկը լցնում են 0,5% աղաթթուով և 2 րոպե տաքացնում, մինչև գոլորշիներ առաջանան։ Քսուքը լվանում են ջրով, ծածկում զտիչ թղթով և լցնում Ziel's carbolic fuchsin-ով։ Տաքացրե՛ք 5 րոպե, մինչև գոլորշիները հայտնվեն։ Լվանալ ջրով և 0,5-1 րոպե տարբերակել 1% ծծմբաթթվի մեջ (ժամանակը որոշվում է էմպիրիկ եղանակով): Լվացվեց ջրով և ներկվեց 30 մեթիլեն կապույտով: Կրկին լվացեք, չորացրեք և մանրադիտակով: Սպորները ներկված են վարդագույն, ցիտոպլազմա՝ կապույտ (հավելվածի նկ. No2)։

Առաջադրանք թիվ 6. Կատարեք բակտերիաների վրա գրամ բիծ: Բակտերիաների բջիջների պատերի քիմիական կազմի տարբերությունը ազդում է ըստ Գրամի ներկելու նրանց ունակության վրա: Այս հիման վրա բակտերիաները բաժանվում են գրամ դրական և գրամ-բացասական (Աղյուսակ թիվ 3): Գրամ-դրական պատյանները պարունակում են ավելի շատ պոլիսախարիդներ, մուրեին և տեյխոաթթուներ; Գրամ-բացասական թաղանթները ունեն բազմաշերտ կառուցվածք՝ լիպիդների (լիպոպրոտեիններ և լիպոսաքարիդներ) բարձր պարունակությամբ։ Գրամ դրական միկրոօրգանիզմները ներկվելիս հիմնական ներկով առաջացնում են սպիրտում չլուծվող յոդի միացություն, գրամ-բացասական միկրոօրգանիզմների դեպքում այս միացությունը լուծելի է սպիրտում։

Գրամ բիծ.Երեք քսուք կիրառվում է ապակե սլայդի վրա և այնուհետև միաժամանակ մշակվում՝ բակտերիալ կուլտուրայից, որը հայտնի է որպես գրամ-դրական, բակտերիալ կուլտուրայից, որը հայտնի է որպես գրամ-բացասական, և դրանց միջև՝ հետազոտվող միկրոօրգանիզմի կուլտուրայից քսուք: . Օգտագործվում են երիտասարդ մեկօրյա կուլտուրաներ։

Քսուքները չորացնում են օդում, ամրացնում այրիչի կրակի վրա և ներկում 1% մանուշակի ջրային լուծույթով 1 րոպե: Ներկը լվանում են Լուգոլի լուծույթով և նույն լուծույթով քսում են 1 րոպե։ Պատրաստուկը լվանում են ջրով և տարբերակում 95% էթանոլով կոլբայի մեջ (0,5-1,0 րոպե): Քսուքը տարբերակելուց հետո պատրաստուկն անմիջապես մանրակրկիտ լվանում են ջրով և ներկում լրացուցիչ ներկով՝ ֆուքսինի 0,1% ջրային լուծույթով 2-3 րոպե: Պատրաստուկը վերջապես լվանում են ջրով, չորացնում օդում և մանրադիտակով մանրադիտակով յուղի ընկղմումով: Պատրաստման վրա գրամ դրական բակտերիաները ներկվում են յասամանագույն-մանուշակագույն, գրամ-բացասական՝ վարդագույն-ազնվամորու գույնով (Հավելվածի նկ. No2):

Աղյուսակ թիվ 3. Բակտերիաների հարաբերակցությունը գրամ բիծին

Staphyloccocus aureus

Էշերիխիա կոլի

Streptococcus

Proteus vulgaris

Bacillus subtilis

Pseudomonas aeruginosa

Sacharomyces

Shigella sp.

Վերահսկեք հարցերն ու առաջադրանքները

Բակտերիալ բջջային պատի կառուցվածքը. Պարկուճի ձևավորում.

Բակտերիաների հարաբերակցությունը գրամ բիծին: Գրամ-դրական և գրամ-բացասական միկրոօրգանիզմների տարբերակիչ առանձնահատկությունները.

Բջջային թաղանթ և ներբջջային թաղանթային կառուցվածքներ.

Միջուկային ապարատ, կազմ, կազմակերպում և վերարտադրություն:

Ռիբոսոմներ, գազային վակուոլներ և այլ բակտերիալ օրգանելներ; դրանց նշանակությունը։

Բակտերիալ բջիջների ներդիրներ (պոլիսաքարիդներ, պոլիֆոսֆատներ, լիպիդներ, ծծմբի ներդիրներ):

Բակտերիաների վերարտադրության ուղիները. Սպորացում բակտերիաներում.

Դրոշակ. բակտերիաների շարժում. Տաքսիներ.

Հարցեր ինքնուրույն ուսումնասիրության համար

Միկրոօրգանիզմների ժառանգական գործոնները.

Փոփոխություն առաջացնող մեխանիզմներ գենետիկ տեղեկատվությունմիկրոօրգանիզմներ.

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #4

ՕԴԻ ԵՎ ՋՐԱՅԻՆ ՄԻԿՐՈՖԼՈՐԱՅԻ ՔԱՆԱԿԱԿԱՆ ՀԱՇՎԱՌՈՒՄ

ՄԻԿՐԵԲԱԿԱՆ ԹՎԵՐԻ ՈՐՈՇՈՒՄ

Թիրախ: Օդի և ջրի միկրոօրգանիզմների քանակական հաշվառում իրականացնելու համար:

Առաջադրանքներ

Ուսումնասիրել օդի և ջրի միկրոֆլորայի քանակական հաշվառման մեթոդները:

Կատարել օդի մանրէաբանական անալիզ և ջրի սանիտարա-մանրէաբանական ուսումնասիրություն:

Նյութեր և սարքավորումներ.Պետրիի ամաններ ստերիլ MPA-ով, ստերիլ 1 մլ պիպետներ, ջրային բաղնիք, էլեկտրական վառարան, ջերմաչափ, ծորակի ջուր, լճակի ջուր, սպիրտային լամպ, լուցկի:

Հիմնական հասկացություններ.ջրի ընդհանուր մանրէաբանական քանակը,օդի ընդհանուր մանրէաբանական թիվը, եթե-ի ինդեքսը, եթե-տիտրը, սանիտարական-ինդիկատիվ միկրոօրգանիզմները, ավտոխթոն միկրոֆլորան, ալոխթոն միկրոֆլորան, սակավության գոտիները:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Օդի TMC-ն (ընդհանուր մանրէաբանական թիվը) որոշելու փորձը դրեք:

Վարակման համար Պետրիի ափսեները բացվում են թեստային սենյակում կամ դրսում 5 րոպե: Պետրիի ափսեի կափարիչը հանվում է և դրվում կողք կողքի՝ առանց շրջվելու: Պետրի ափսեի կափարիչի վրա նշեք փորձի տարբերակը, ցանքի ամսաթիվը։ Վարակված Պետրի ափսեները տեղադրվում են 25-28°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։

2-3 օր հետո հաշվում են միկրոօրգանիզմների գաղութների թիվը, որոնք առաջացել են Պետրիի ճաշատեսակի ագարի ափսեի վրա։Այս դեպքում հաշվի են առնվում հետևյալը. կոպիտ հաշվարկներով (Օմելյանսկի) 100 սմ տարածքի վրա. 2 5 րոպեի ընթացքում նստում են այնքան միկրոօրգանիզմներ և սպորներ, որքան 10 լիտր օդում: Մենք ենթադրում ենք, որ յուրաքանչյուր գաղութ առաջացել է մեկ բջջից կամ սպորից: ԵԱյս մեթոդը տալիս է միայն մոտավոր տվյալներ, սակայն թույլ է տալիս բավականին ճշգրիտ հայտնաբերել միկրոօրգանիզմների հարաբերական թիվը տարբեր սենյակների օդում։Լրացրեք թիվ 4 աղյուսակը, եզրակացություններ արեք.

Օրինակ՝ Պետրի ափսեի մեջ հայտնաբերվել է 5 գաղութ, ճաշատեսակի շառավիղը 2 սմ է, մակերեսը՝ S=πr։ 2 =3.14*4=12.5. Այնուհետեւ 10 լիտրը պարունակում է

Աղյուսակ թիվ 4. Ներքին օդի ընդհանուր մանրէների քանակը (TMC):

MPA թիթեղների վրա օդից մեկուսացված միկրոօրգանիզմների գաղութները կարող են օգտագործվել տեսակների նույնականացման համար: Ամենից հաճախ օդից մեկուսացված են միկրոկոկերի, սարկինների, որոշ բացիլների և բակտերիաների գաղութներ։

Առաջադրանք թիվ 2. Տեղադրեք փորձը ջրի TMF-ն որոշելու համար:

Հետազոտության համար ծորակի ջուրը վերցվում է ստերիլ կոլբայի մեջ: Կոլբայից ստերիլ պիպետտով վերցվում է 1 մլ ջուր և ավելացվում է ուղղած միջավայրով (MPA) Պետրի ափսեի մեջ (դրա ջերմաստիճանը չպետք է լինի 45°C-ից բարձր): Բաժակը փակվում է և, նրբորեն թեքվելով, սննդային միջավայրը խառնվում է, ափսեը թույլ է տալիս կարծրանալ և տեղադրվում է թերմոստատի մեջ: 3-5 օր հետո հաշվում են Պետրիի ափսեներում առաջացած գաղութները և 1 մլ ջրի մեջ որոշվում բակտերիաների քանակը։

Գաղութները հաշվելուց հետո որոշվում է ջրի մանրէաբանական թիվը՝ միկրոօրգանիզմների քանակը փորձարկման ջրի 1 մլ-ում՝ հաշվի առնելով նոսրացումը, եթե այդպիսիք կան:

Տվյալները կազմված են թիվ 5 աղյուսակի տեսքով, արված են եզրակացություններ.

Աղյուսակ թիվ 5. Խմելու ջրի ընդհանուր մանրէների քանակությունը (TMC):

ծորակից ջուր

Վերահսկիչ հարցեր

Օդի միկրոֆլորայի առանձնահատկությունները. Միկրոօրգանիզմների տարածում օդում.

Ներքին օդի սանիտարական վիճակի ստանդարտներ.

Օդի սանիտարական և մանրէաբանական ուսումնասիրություն:

Խմելու ջրի միկրոֆլորան.

Բնական ջրերի միկրոֆլորան. Միկրոօրգանիզմների բաշխումը ջրի մեջ.

Խմելու ջրի սանիտարական ցուցանիշներ. Ջրի ընդհանուր մանրէների քանակը: Եթե-ինդեքս, եթե-տիտր ջրի.

Ջրային մարմինների աղտոտում և ինքնամաքրում. Միկրոօրգանիզմների դերը ջրային մարմինների ինքնամաքրման գործընթացներում.

Խմելու և կեղտաջրերի կենսաբանական մաքրում.

Ջրի սանիտարա-մանրէաբանական ուսումնասիրություն. TMC-ի որոշում, if-index, if-titer:

Օդի, ջրի, հողի սանիտարական ցուցիչ միկրոօրգանիզմներ:

Սանիտարական ցուցիչ միկրոօրգանիզմների պահանջները.

Սննդամթերքի միկրոֆլորան (թթու-կաթ, ձուկ, միս, երշիկեղեն, պահածոներ):

Սննդի հումքի և սննդամթերքի անվտանգության գնահատման մեջ օգտագործվող միկրոօրգանիզմների խմբերի բնութագրերը.

Տարբեր սննդամթերքի սանիտարական և մանրէաբանական ստանդարտներ.

Սննդամթերքի սանիտարա-մանրէաբանական հետազոտության մեթոդներ.

Հողը որպես միկրոօրգանիզմների կենսամիջավայր:

Հողի միկրոօրգանիզմների տարածման էկոլոգիական գործոնները.

Հողի միկրոօրգանիզմների փոխհարաբերությունները.

Հողի միկրոֆլորայի մասնակցությունը հանքայնացման գործընթացներին օրգանական նյութերև հումուսի ձևավորում:

Հողի սանիտարական և մանրէաբանական ուսումնասիրություն.

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #5

ՄԻԿՐՈՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ՄԱՔՈՒՐ ՄՇԱԿՈՒՅԹ ՁԵՌՔԲԵՐԵԼ

ՔԱՆԱԿԱԿԱՆ ՄԻԿՐՕՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ՆԵՖԵԼՈՄԵՏՐԻԿ ՄԵԹՈԴ

Թիրախ: Իրականացնել միկրոօրգանիզմների մաքուր կուլտուրաների մեկուսացում, յուրացնել միկրոօրգանիզմների քանակի հաշվառման նեֆելոմետրիկ մեթոդը։

Առաջադրանքներ

Իրականացնել մաքուր մշակույթի մեկուսացումը «թուլացնող» կաթվածի մեթոդով։

Քանակականացնել միկրոօրգանիզմները նեֆելոմետրիկ մեթոդով

Նյութեր և սարքավորումներ.Պետրիի ամաններ ստերիլ MPA-ով, FEK-ով, Գորյաևի տեսախցիկով, մանրադիտակներով, մանրէաբանական օղակներով, սպիրտային լամպով, լուցկիներով։

Հիմնական հասկացություններ. Մաքուր մշակույթ, աճ, վերարտադրություն, երկուական տրոհում, բողբոջում, բջջային ցիկլ (մոնոմորֆ, երկմորֆ, պոլիմորֆ), գեներացման ժամանակ, հատուկ աճի տեմպ, կենսազանգվածի բերքատվություն, տնտեսական գործոն, կայուն աճի փուլ, հետաձգման փուլ, էքսպոնենցիալ վերարտադրության փուլ, անշարժ փուլ, մեռնող փուլ, լճացած մշակույթ, հոսքային մշակույթ, համաժամանակյա մշակույթ:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Միկրոօրգանիզմների մաքուր մշակույթ ստանալը

Աերոբների մաքուր կուլտուրաների մեկուսացումն իրականացվում է հարստացման մշակույթը մաղելով պինդ սննդային միջավայրի մակերեսի վրա: Ցանքն իրականացվում է սպառիչ ինսուլտի մեթոդով։ Գաղութների աճից հետո մեկուսացված գաղութների մաքրությունը ստուգվում է տեսողական և մանրադիտակի միջոցով: 3-6 օր հետո ընտրվում և նկարագրվում է միկրոօրգանիզմների մեկուսացված գաղութ (օգտագործելով հավելվածի գծագրերը):Գաղութը նկարագրված է հետևյալ կերպ.

Գաղութի չափսը՝ կետավոր (D - 1 մմ-ից պակաս), փոքր (D - 1-2 մմ), միջին (D - 2-4 մմ) և մեծ (D - 4-6 մմ կամ ավելի):

Գաղութի ձևը կլոր է, ամեբոիդ, ռիզոիդ։

Օպտիկական հատկություններ - թափանցիկ, փայլատ, լյումինեսցենտ, կիսաթափանցիկ (կիսաթափանցիկ), անթափանց, փայլուն:

Գույն - նշեք գաղութի գույնը և պիգմենտի արտազատումը միջավայրի մեջ:

Մակերեւույթը հարթ է, կոպիտ, ծալված, խորդուբորդ։

Պրոֆիլ - հարթ, ուռուցիկ, խառնարանման, աճող ագարի և այլն:

Գաղութի եզրը հարթ է, ալիքաձև, բլթակավոր, ռիզոիդ և այլն։

Գաղութի կառուցվածքը միատարր է, նուրբ կամ խոշորահատիկ։

Հետևողականություն - յուղոտ, մածուցիկ, մածուցիկ, թաղանթապատ:

Առաջադրանք թիվ 2. Կատարել միկրոօրգանիզմների քանակական գնահատում նեֆելոմետրիկ մեթոդով.

ա) Նեֆելոմետրիկ մեթոդ.բջիջների խտությունը S.cerevisiae հեղուկ միջավայրում որոշվում է նեֆելոմետրիկ եղանակով (FEC)՝ օգտագործելով 0,5 սմ օպտիկական ուղու երկարությամբ կյուվետ և կանաչ լույսի զտիչ (A = X 540 նմ): Հուսալի արդյունքներ ստանալու համար բջիջների խտությունը պետք է լինի 0,1-0,6 միջակայքում: 0.6-ից բարձր բջիջների կոնցենտրացիաների դեպքում տեղի է ունենում լույսի երկրորդային ցրում, ինչը հանգեցնում է թերագնահատված արդյունքների: Հետևաբար, բարձր խտության կախոցները պետք է նոսրացվեն ջրով 2, 4, 6, 8 և 10 անգամ նախքան լույսի փոխանցումը չափելը: Յուրաքանչյուր կախույթի (ջուրը ծառայում է որպես հսկիչ) օպտիկական խտության չափումների արդյունքները գրանցվում են թիվ 6 աղյուսակում։

բ) Բջիջների հաշվում Գորյաև-Թոմ պալատում.Ֆոտոէլեկտրոկոլորիմետրի (FEC) ընթերցումները միջավայրում միկրոօրգանիզմների բջիջների թվին անցնելու համար դրանց թիվը հաշվվում է Գորյաև-Տոմա հաշվիչ պալատի և խմորիչի կախոցների նոսրացումների միջոցով, որոնք օգտագործվել են նեֆելոմետրիկ մեթոդով դրանց խտությունը որոշելու համար: Բջիջները հաշվվում են խոշոր ցանցային քառակուսիներով՝ օգտագործելով 8* նպատակ: Հաշվարկված բջիջների ընդհանուր թիվը պետք է լինի առնվազն 600: Համապատասխան կախույթի 1 մլ-ում բջիջների քանակը հաշվարկվում է M = 1000*a*n/h*S բանաձևով, որտեղ M-ը 1 մլ-ի բջիջների թիվն է: կասեցման մասին; a-ն մեծ ցանցի քառակուսի բջիջների միջին թիվն է. h-ը խցիկի խորությունն է (1/10 մմ); S-ը մեծ ցանցի քառակուսու մակերեսն է (1/25 մմ 2 ); n-ը կասեցման նոսրացման աստիճանն է. 1000 մմ 3 - 1 մլ. Ստացված արդյունքները, միլիոն բջիջները 1 մլ-ում գրանցված են աղյուսակում: Թիվ 6.

Աղյուսակ թիվ 6. Գորյաևի տեսախցիկի միջոցով հաստատված կախոցներում խմորիչ բջիջների քանակը և համապատասխան FEC ընթերցումները

FEK ցուցումներ

Աղյուսակի տվյալների հիման վրա կառուցեք տրամաչափման կոր: Թիվ 6, աբսցիսայի առանցքի վրա խմորիչ բջիջների թիվը, իսկ օրդինատների առանցքի վրա համապատասխան կախոցի օպտիկական խտությունը: Կառուցվում է տրամաչափման կոր՝ որոշ տեսակի միկրոօրգանիզմների բջիջների արագ որոշման համար՝ ըստ FEC-ի ընթերցումների:

Վերահսկեք հարցերն ու առաջադրանքները

Կուտակային մշակույթները և ընտրովիության սկզբունքը. Մաքուր մշակույթներ, պատրաստման եղանակներ և նշանակություն.

Միկրոօրգանիզմների վերարտադրություն.

Բակտերիաների բջջային ցիկլեր. Առանձին միկրոօրգանիզմների և պոպուլյացիաների աճ: Հավասարակշռված և անհավասարակշիռ աճ:

Բուսաբուծության աճի պարամետրերը` առաջացման ժամանակը, աճի տեսակարար տեմպը, կենսազանգվածի բերքատվությունը, տնտեսական գործոնը:

Աճի կորեր, առանձին փուլերի առանձնահատկությունները: Միկրոօրգանիզմների աճը շարունակական աճեցման ընթացքում: Սինխրոն մշակույթներ.

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #6

ՊԱՐԵՆԱՅԻՆ ԱՊՐԱՆՔՆԵՐԻ ՍԱՆԻՏԱՐԱԲԱԿՏԵՐԱԲԱՆԱԿԱՆ ՈՒՍՈՒՄՆԱՍԻՐՈՒԹՅՈՒՆ

Թիրախ: Կատարել սննդի վիճակի սանիտարական-մանրէաբանական գնահատում:

Առաջադրանքներ

1. Որոշեք որոշակի մթերքների մանրէների ընդհանուր քանակը:

2. Որոշեք BGKP-ի (Escherichia coli խմբի բակտերիաների) առկայությունը:

Նյութեր և սարքավորումներ.Պետրի ամաններ՝ MPA-ով, Պետրի ամաններ Էնդո միջավայրով, 1 մլ պիպետներ, սրճաղացներ, scalpels, փորձանոթներ 9 մլ ստերիլ ջրով, փորձանոթներ՝ Kessler միջավայրով, ստերիլ տափաշիշներ 100 մլ ջրով, կշեռքներ։

Հիմնական հասկացություններ.Սննդամթերքի սպեցիֆիկ միկրոֆլորա, սննդամթերքի ոչ սպեցիֆիկ միկրոֆլորա, BGKP, սանիտարական ինդիկատիվ միկրոօրգանիզմներ:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Որոշեք BGKP-ի առկայությունը և սննդամթերքի ընդհանուր աղտոտվածությունը՝ հաջորդաբար կատարելով հետևյալ քայլերը.

1. Հետազոտության համար սննդամթերքի պատրաստում.

Ստերիլ ճենապակյա շաղախի մեջ մանրացնել 10 գ նմուշը (տարբեր տեղերից ստերիլ վերցված), աստիճանաբար ավելացնելով 90 մլ նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթ և մի քանի րոպե թողնել սենյակային ջերմաստիճանում։ Այնուհետև պատվաստման և նոսրացման համար նախատեսված կախոցը (1 մլ) ծեծում են լայն քթով ստերիլ խողովակով: Ենթադրվում է, որ պատրաստված կախույթի 1 մլ պարունակում է 0,1 գ սկզբնական արտադրանք (նոսրացում 10-1 ) Հեղուկ խտության արտադրանքը ցանում և բուծվում է մշակաբույսերի համար առանց նախնական պատրաստման:

2. Ցանքի համար սննդային նոսրացումների պատրաստում.

Հեղուկ խտության արտադրանքի համար նոսրացումները պատրաստվում են հետևյալ կերպ. 1 մլ արտադրանքը վերցվում է ստերիլ պիպետտով և ավելացվում է փորձանոթի մեջ, որը պարունակում է 9 մլ նատրիումի քլորիդի ստերիլ իզոտոնիկ լուծույթ, խառնում։ Ստացված նոսրացումը (10-2 ) նույն կերպ ենթարկվում է հետագա նոսրացման՝ պահանջվող քանակով (10-ի բազմապատիկ):

Գծանկար թիվ 1. Նոսրացումների պատրաստում և պինդ վրա հողային կախույթի ցանում մշակութային լրատվամիջոցներ

3. Ընդհանուր աղտոտվածության որոշում.

Պատվաստման համար ընտրված նոսրացումները ավելացվում են 1 մլ ստերիլ Պետրի ամանների մեջ՝ հալված 45-50 ջերմաստիճանում: 0 MPA, որից հետո դրանք խառնվում են։ Միջավայրը թույլ է տալիս պնդանալ, մշակաբույսերը աճեցնում են ցերեկային ժամերին 37°C ջերմաստիճանում, որից հետո հաշվում են աճեցված գաղութների քանակը (CFU): Որոշեք բակտերիաների ընդհանուր թիվը 1 մլ կամ 1 գ արտադրանքի մեջ:

4. BGKP-ի առկայությունը որոշելը.

Ցանքի համար օգտագործվում է արտադրանքի քանակությունը, որի մեջ սահմանված նորմերին համապատասխան ապահովվում է ԿԳԲ-ի բացակայությունը։ Ուսումնասիրված արտադրանքի նմուշների ընտրված նոսրացումներից վերցվում է 1 մլ և պատվաստվում փորձանոթների մեջ Kessler միջավայրով: Պատվաստված խողովակները 24 ժամ ինկուբացվում են 37°C ջերմաստիճանում, աճի նշանների բացակայության դեպքում (գազի առաջացում կամ միջավայրի գույնի փոփոխություն) եզրակացություն է արվում փորձարկման արտադրանքի ստանդարտին համապատասխանության մասին: Եթե ​​առկա են աճի նշաններ, դրանք ցանում են Էնդո միջավայրի վրա։ Մշակաբույսերը ինկուբացվում են 18-20 ժամ 37°C ջերմաստիճանում։ Բուսաբույսերը դիտելիս նշվում են գաղութներ, որոնք կասկածելի են կամ բնորոշ են CGB-ին (ձևավորում են կարմիր, վարդագույն, գունատ վարդագույն գաղութներ՝ մետաղական փայլով կամ առանց դրա): Դրանք օգտագործվում են կենդանի և ամրացված բջիջների պատրաստուկներ պատրաստելու համար, գրամ ներկված և մանրադիտակով: Գրամ-բացասական, կլորացված ծայրերով ոչ սպոր առաջացնող ձողերի հայտնաբերումը ցույց է տալիս CGB-ի հնարավոր առկայությունը:

Աղյուսակում մուտքագրված են ընդհանուր աղտոտվածության և Escherichia coli-ի առկայության վերաբերյալ տվյալները: Եզրակացություններ արեք տարբեր սննդամթերքի միկրոֆլորայի մասին՝ օգտագործելով սանիտարական և մանրէաբանական ստանդարտները (SanPiN 2.3.2.560-96) (Աղյուսակ թիվ 7):

Աղյուսակ թիվ 7. Որոշ սանիտարական և մանրէաբանական ստանդարտներ (SanPiN 2.3.2.560-96)

Պանիր ռուսերեն

0,001

Պաղպաղակ

1*10 5

0,01

Վերահսկիչ հարցեր, տես դաս թիվ 4:

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #7

ՀՈՂԻ ՄԻԿՐՈՑԵՆՈԶՆԵՐ

Թիրախ: Ուսումնասիրել հողի միկրոօրգանիզմների տեսակային կազմը և բաշխումը:

Առաջադրանքներ

1. Ուսումնասիրել հողի միկրոֆլորայի և գերիշխող տեսակների բնույթը.

2. Կատարել հողի միկրոֆլորայի քանակական և որակական հաշվառում:

Նյութեր և սարքավորումներ.Սլայդներ, ստերիլ Petri սպասք MPA-ով,կշեռք, կշիռ, սկալպել, հավանգ, ռետինե ձեռնոց, կոլբ ստերիլ թորած ջրով 90 մլ, ստերիլ կոլբայ 250 մլ, փորձանոթներ 9 մլ ստերիլ ջրով, պիպետներ 10 մլ և 1 մլ, միկրոպիպետներ 0,1 մլ, ապակե սպաթուլաներ:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Հետազոտել հողի և ռիզոսֆերայի միկրոբիոցենոզների բնույթը ապակու աղտոտման մեթոդով (ըստ Խոլոդնիի):

Հողի հարթ մակերեսի վրա դանակով կտրվածք է կատարվում, որի խորությունը կախված է ուսումնասիրվող հորիզոնից։ Լվացված և յուղազերծված բաժակները (միաժամանակ վերցվում են մի քանի բաժակ) պինդ սեղմում են կտրվածքի ուղղահայաց պատին և ծածկում հողով։ Ակնոցները հողում պահվում են մեկ շաբաթից մինչև մի քանի ամիս։

Լուսավորման ժամանակի ավարտից հետո ակնոցի հետևի մասից հողը հանվում է, ակնոցի փորձնական մակերեսը չորացնում են օդում և ամրացնում երեք անգամ՝ հետևի կողմն անցնելով այրիչի բոցի վրայով։ Ապակին ամրացնելուց հետո փորձնական մակերեսը ներքեւ ընկղմվում է ջրի մեջ՝ առանց հատակին հասցնելու։ Լվանալուց հետո պատրաստուկը 30 րոպեից 24 ժամ տեւողությամբ ընկղմվում է կարբոլիկ էրիթրոզինի լուծույթի մեջ, ներկված պատրաստուկները զննում են մանրադիտակի տակ՝ ընկղմման համակարգով։ Մանրադիտակի ժամանակ նշվում է միկրոֆլորայի բնույթը, ապակիների աղտոտման խտությունը և գերիշխող ձևերը:

Առաջադրանք թիվ 2. Իրականացնել հողի TMC-ի որոշումը:

Հողի կախոցի պատրաստում նոսրացման մեթոդով.Դիտարկելով ստերիլությունը՝ կշռում են 10 գ հող և տեղափոխում ստերիլ շաղախի մեջ։ Հողի նմուշը հավանգի մեջ խոնավացնում ենք մածուկի վիճակում՝ ավելացնելով 90 մլ ստերիլ ջուր պարունակող առաջին կոլբայի 2-3 մլ ջուր և 5 րոպե մատով քսում ենք ռետինե ձեռնոցին։ Աղալուց հետո շաղախից հողը ջրով տեղափոխում են երկրորդ չոր կոլբայի մեջ, ստացվում է առաջին նոսրացումը՝ 1/10։ Կոլբայի մեջ հողային կախոցը թափահարում են 5 րոպե, թողնում 30 վրկ, այնուհետև 1 մլ հողային կախույթը կոլբայից տեղափոխում են թիվ 1 փորձանոթ՝ 9 մլ ստերիլ թորած ջրով ստերիլ խողովակով, ստացվում է երկրորդ նոսրացումը՝ 1/100։ Նմանապես պատրաստվում է հողային կախոցի հետագա նոսրացումների շարք՝ -1/1000, 1/10000, 1/100000 և ավելի՝ կախված միկրոօրգանիզմների ակնկալվող քանակից (նկ. թիվ 1, դաս թիվ 6)։

Բակտերիաների մեկուսացման և քանակականացման համար հողի կախոցը ցանում է սննդարար միջավայրերից մեկի վրա (MPA, KAA, հողային ագար, Ashby միջավայր; KAA կամ Chapek միջավայրը օգտագործվում է ակտինոմիցետների հաշվառման համար): Պետրիի կերակրատեսակների վրա մանրէների գաղութները հաշվում են 3-5 օր հետո, սնկերին և խմորիչինը՝ 5-7, ակտինոմիցետներինը՝ 7-15-ից հետո, 1 գ հողում միկրոօրգանիզմների պարունակությունը որոշվում է բանաձևով. a \u003d b * c, որտեղ ա - 1 գ հողում միկրոօրգանիզմների քանակը,բ գաղութների միջին թիվն է,Վ - բուծում. Համեմատեք հողի, ջրի և օդի միկրոֆլորայի տեսակների կազմը և բազմազանությունը և եզրակացություն արեք.

Վերահսկեք հարցերն ու առաջադրանքները, տես դաս թիվ 4:

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #8

ԱԶՈՏԻ ՄԻԱՑՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԻ ՓՈՓՈԽՈՒՄԸ ՄԻԿՐՈՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ԿՈՂՄԻՑ

Թիրախ: Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմների կողմից փոխակերպման գործընթացների առանձնահատկությունները օրգանական միացություններազոտ.

Առաջադրանքներ

Ուսումնասիրել սպիտակուցների ամոնիֆիկացման գործընթացներում ներգրավված միկրոօրգանիզմները:

Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմները, որոնք ներգրավված են միզանյութի ամոնիֆիկացման գործընթացներում:

Նյութեր և սարքավորումներ.Սպիտակուցի և միզանյութի ամոնիֆիկացման գործընթացի վերարտադրման միջավայր, մանրադիտակներ, միկրոպատրաստուկների պատրաստման սարքավորումներ։

Հիմնական հասկացություններ.Ամոնիֆիկացում, պրոթեզերներ, պեպտիդազներ, ուրեազներ, դեամինացիա, դեկարբոքսիլացում:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Սպիտակուցների ամոնիֆիկացում իրականացնող միկրոօրգանիզմները ուսումնասիրելու համար նկարեք նկար: Սպիտակուցային նյութերի ամոնիֆիկացումն ուսումնասիրելու համար մսի արգանակը 3% պեպտոնի ավելացմամբ կարող է ծառայել որպես սննդարար միջավայր։30 մլ միջավայրը լցնում են 100 մլ տարողությամբ կոլբայի մեջ և ավելացնում 1/3 թեյի գդալ հող։ Տապակները փակվում են բամբակյա խցաններով։ Երկու կտոր թուղթ կասեցվում է միջինից վեր՝ կարմիր լակմուս կամ ունիվերսալ ցուցիչ թուղթ՝ թրջված ջրով, զարգացող ամոնիակ և ֆիլտր թուղթ հայտնաբերելու համար, խոնավացած կապարի ացետատի ալկալային լուծույթով, ջրածնի սուլֆիդը և մերկապտանը հայտնաբերելու համար: Ամրացրեք դրանք խցանափայտի և կոլբայի պարանոցի պատերի միջև: Թղթերը չպետք է դիպչեն կրիչին: Ինկուբացիայի 3-5-րդ օրերին 28-30°C ջերմաստիճանում, կոլբայի պարունակությունը վերլուծվում է: Որոշվում են սպիտակուցների ամոնիֆիկացման գործընթացի հարուցիչները և դրանց նյութափոխանակության արտադրանքները:

Մանրադիտակ.Սպիտակուցային նյութերի փտած տարրալուծման պաթոգենները հայտնաբերելու համար մանրացված կաթիլով պատրաստվում են կենդանի բակտերիաների պատրաստուկ, ինչպես նաև ֆիքսված և ներկված պատրաստուկ: Ավելի հաճախ, քան մյուսները, բջջային բջիջները հայտնաբերվում են պատրաստուկի վրա: Proteus vulgaris (դիմումի նկ. 4)գերակշռում է սպիտակուցի քայքայման առաջին փուլերում: Սրանք սպոր չառաջացնող, անհավասար երկարության ձողիկներ են։ Բացի այդ, պատրաստուկի վրա կան բազմաթիվ սպորներ առաջացնող բջիջներ։ Bacillus mycoides և Clostridium sp. (նկ. թիվ 1, 4 հավելված). Վերջինիս մեջ սպորները գտնվում են վերջնամասում և դրանց տրամագիծը գերազանցում է բջջի լայնությունը։Դուք. միկոիդներ առաջացնում է սպիտակուցների ամոնիֆիկացում աերոբիկ պայմաններում, և C. putrificus - անաէրոբ վիճակում, բայց կարող է զարգանալ նաև աերոբիկ պայմաններում, եթե շրջակա միջավայրը պարունակում է թթվածին ներծծող աերոբ միկրոօրգանիզմներ:

ՆՀ-ն արտանետվել է մթնոլորտ 3, կախովի շերտը ներկում է կարմիր լակմուսի թուղթկապույտի մեջ։ Կապարի թուղթը սևանում է ջրածնի սուլֆիդի ազդեցության տակ, եթե այն ծածկված է արծաթափայլ ծածկով, ինչը նշանակում է, որ Հ-ի հետ միասին. 2 Ազատվում են նաև S մերկապտաններ (օրինակ՝ մեթիլ մերկապտան CH 3SH):

Առաջադրանք թիվ 2. Միզանյութի ամոնիֆիկացման գործընթացներում ներգրավված միկրոօրգանիզմները ուսումնասիրելու համար կատարեք գծանկար: Միզանյութի ամոնիֆիկացման գործընթացը վերահսկելու համար կարող եք օգտագործել հետևյալ բաղադրության սննդային միջավայրը (գ/լ թորած ջուր)՝ կալիումի կամ նատրիումի տարտրատ (թարթաթթու, կարող եք աղի խնձորաթթու) - 5,0; միզանյութ - 5.0; TO 2 NRO 4 - 0,5; MgSO 4 7H 2 O - 0.2:

Միջոցը լցնում են 100 մլ կոլբայի մեջ, յուրաքանչյուրը 30 մլ, պատվաստում են հողով և դնում 25–30°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։ Ամոնիակ հայտնաբերելու համար կարմիր լակմուսի թղթի շերտը կախված է բամբակյա խցանի տակ։ 3-5 օր հետո մշակույթը վերլուծվում է։ Հաստատեք ամոնիակի արտազատումը կարմիր լակմուսի թղթի կապույտի վրա:

Մանրադիտակ.Միզանյութի ամոնիֆիկացման պատճառական գործակալներն ուսումնասիրելու համար պատրաստում են միջավայրի մակերեսի վրա հազիվ նկատելի թաղանթից և ներկված ֆուքսինով: Բջիջները առավել հաճախ նկատվում են մանրադիտակի տակ: Urobacillus pasteurii (դուք. probatus), ավելի քիչ հաճախ՝ Planosarcina ureae (դիմումի նկ. 5).

Վերահսկեք հարցերն ու առաջադրանքները

ազոտի հանքայնացում. Սպիտակուցների ամոնիֆիկացման մեջ ներգրավված բակտերիաներ.

Նուկլեինաթթուների քայքայումը.

Ուրայի, միզաթթուների և հիպուրիկ թթուների տարրալուծում:

Նիտրացման գործընթացների բնութագրում. Միկրոօրգանիզմներ, որոնք հողում նիտրատներ են արտադրում.

Բնության մեջ նիտրատների և նիտրիտների վերականգնում.

Դենիտրիֆիկացում (դիսիմիլացիոն նիտրատի նվազեցում):

Նիտրատի ձուլման նվազեցում.

Ազոտի ֆիքսացիա ազատ ապրող միկրոօրգանիզմների կողմից:

Ասոցիատիվ ազոտի ֆիքսացիա:

Սիմբիոտիկ ազոտի ֆիքսացիա. Նոդուլային բակտերիաների բնութագրերը.

Հանգույց բակտերիաների փոխազդեցությունը հյուրընկալ բույսի հետ: Բակտերոիդների առաջացումը.

Ոչ հատիկաընդեղենային բույսերի սիմբիոտիկ ազոտային ֆիքսացիա.

Ազոտի ամրացման գործընթացների քիմիա.

14. Լրացրե՛ք թիվ 8 աղյուսակը.

Աղյուսակ թիվ 8. Ազոտի ցիկլի գործընթացների և ազոտի միացությունների փոխակերպման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմների բնութագրերը

Միզանյութի ամոնիֆիկացում

Նիտրացման I փուլ

Սիմբիոտիկ ազոտի ֆիքսացիա

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #9

ԱԶՈՏԻ ՄԻԱՑՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԻ ՓՈՐՁԱՓՈԽՈՒՄԸ ՄԻԿՐՈԳԱՆԻԶՄՆԵՐՈՎ

Թիրախ: Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմների կողմից ազոտի հանքային միացությունների փոխակերպման գործընթացների առանձնահատկությունները:

Առաջադրանքներ

1. Ուսումնասիրել նիտրացման գործընթացների ընթացքի առանձնահատկությունները (I, II փուլ) և դրանցում ներգրավված միկրոօրգանիզմները.

2. Ուսումնասիրել դենիտրացման գործընթացների առանձնահատկությունները և դրանցում ներգրավված միկրոօրգանիզմները.

3. Ուսումնասիրել ազոտի ֆիքսման գործընթացների առանձնահատկությունները եւ դրանցում ներգրավված միկրոօրգանիզմները.

Նյութեր և սարքավորումներ.Հեղուկ Ashby միջավայրով կոլբաներ՝ ազոտի ֆիքսատորների մշակման համար, Վինոգրադսկի միջավայր՝ նիտրիֆիկատորների մշակման համար, Giltai միջավայր՝ դեիտրիֆիկատորների մշակման համար, միկրոպատրաստվածքներ ներկելու սարքավորում, մանրադիտակներ։

Հիմնական հասկացություններ.Նիտրիֆիկացում (I և II փուլեր), ազոտի անշարժացում, նիտրատի յուրացում, նիտրատների դիսիմիլացիա (դենիտրիֆիկացիա), ազոտի ֆիքսացիա ազատ կենդանի միկրոօրգանիզմների կողմից, ասոցիատիվ ազոտի ֆիքսացիա, ազոտի սիմբիոտիկ ֆիքսացիա, լեգեմոգլոբին, ազոտայինազ, նիտրատ ռեդուկտազ:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Ուսումնասիրել նիտրացման գործընթացներում ներգրավված միկրոօրգանիզմները, նկարել: Նիտրացնող բակտերիաների կուտակման համար օգտագործվում է Ս. Ն. Վինոգրադսկու սննդային միջավայրը (գ/լ թորած ջուր).

Միջոցները մանրէազերծում են և լցնում 1,0-1,5 սմ շերտով կոլբայի մեջ և վարակում ջերմոցային հողի մի կտորով։ Տապակները փակվում են բամբակյա խցաններով և տեղադրվում 25–28 °C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ 14–21-րդ օրը։

Մանրադիտակ.Նիտրացնող բակտերիաները ուսումնասիրելու համար հեղուկից միկրոպատրաստուկներ են պատրաստում կոլբայի մեջ։ Մանրադիտակի տեսադաշտում տեսանելի են օվալաձև կամ կոկոիդ բջիջների կլաստերներ Nitrosomonas (առաջին փուլ) և կարճ ձողային բջիջներՆիտրոբակտեր (երկրորդ փուլ). Սեռի ներկայացուցիչներՆիտրոզոմոնաս (դիմումի նկ. 6)ունեն օվալաձև ձև, որոշ դեպքերում մոտենում են գնդակին, ունեն շարժունակություն և հագեցած են մեկ երկար դրոշակով: Տարբեր տեսակներՆիտրոզոմոնաս շատ տարածված են հողում և միմյանցից տարբերվում են բջիջների չափսով կամ ձևով, ինչպես նաև շրջակա միջավայրի ակտիվ ռեակցիայի հետ կապված։ Առավել ուսումնասիրված Nitrosomonas Europea. Բջիջները կոկոիդ կամ օվալ են, 0,5-1,5 մկմ չափերով, շարժուն, երկար բևեռային դրոշակով:Նիտրոբակտեր - փոքր կլորացված, ձվաձև կամ տանձաձև ձողիկներ, անշարժ, առանձին կամ փոքր խմբերով միացված, շրջապատված լորձաթաղանթով.(դիմումի թիվ 7 նկ.). Այս սեռի բակտերիաների շարքում ընդունված է տարբերակել երկու տեսակ. Nitrobacter winogradskii և Nitrobacter agilis:

Կատարվում է նաև ամոնիումային ձևի օքսիդացում նիտրիտային ձևիՆիտրոսոցիստիս և Նիտրոսոսպիրա , նիտրիտից նիտրատՆիտրոսպինա.

Առաջադրանք թիվ 2. Ուսումնասիրելու համար այն միկրոօրգանիզմները, որոնք իրականացնում են դենիտրացման գործընթացները, նկարեք նկար: Ապանիտրացնող բակտերիաների կուտակման համար օգտագործվում է հետևյալ միջավայրը (գ/լ-ով)՝ Ռոշելի աղ - 20; KNO 3 - 2,0; K 2 NRO 4 - 0,5; MgSO 4 7H 2 O - 0.2; FeSO 4 7H 2 Օ,, հետքեր: Միջոցը բարձր շերտով լցվում է մեծ փորձանոթների մեջ մինչև ծայրը և մանրէազերծվում: Օդային պղպջակները հեռացնելու համար մանրակրկիտ խառնել հողի հետ և ծածկել ռետինե խողովակով, որի մեջ մտցված է 2 կողմից բացված ապակե խողովակ՝ միջին մասում ընդլայնված։ Խցանափայտը հեղուկի մի մասը տեղափոխում է ապակե խողովակի մեջ: Խցանափայտի տակ օդային պղպջակներ չպետք է լինեն: Անաէրոբ պայմաններ ստեղծելու համար վազելինի յուղը փոքր շերտով լցվում է միջինից բարձր խողովակի մեջ, որը տեղադրվում է 30-35 ° C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ 5-6 օր:

Մանրադիտակ.Ենթաշերտի միջից մաքուր պիպետտով կաթիլ են վերցնում և պատրաստում ամրացված և ներկված պատրաստուկ, որն այնուհետև հետազոտվում է մանրադիտակի տակ՝ ընկղմման համակարգով։ Նախապատրաստման մեջ գերակշռում են ոչ սպոր ձևավորող գնդաձև բջիջները կամ կարճ ձողերը Paracoccus denitrificans (Բակտերիա denitrificans ) (հավելվածի թիվ 7 նկ.). Ռոշելի աղով միջավայրում հաճախ զարգանում է P. stutzeri (Achromobacter stutzeri - 2,0 - 4,0 միկրոն չափերով ձողաձև բջիջներ, շարժական (հավելվածի նկ. 7). Այս դեպքում մշակույթը ձևավորում է կանաչադեղնավուն լյումինեսցենտ պիգմենտ: Նաև դեիտրիֆիկատորները ներառում են. Pseudomonas aeruginosa - փոքր ձողեր (1,0 - 1,5 մկմ չափի), միայնակ կամ զույգ, շարժական, կրում են 1 - 2 բևեռային դրոշակ: Հաճախ նկատվում է միջավայրի կանաչապատում, հատկապես կիտրոնաթթու ածխածնի օգտագործման ժամանակ, ինչը ցույց է տալիս զարգացումը Pseudomonas fluorescens - փոքր ձողեր (1,0 - 2,0 մկմ չափի), շարժական, ունեն 3 - 4 բևեռային դրոշակ:

Առաջադրանք թիվ 3. Ուսումնասիրել մթնոլորտային ազոտի ֆիքսման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմները, նկարել: Ashby միջավայրը օգտագործվում է ազատ ապրող ազոտի ամրացնող սարքերի կուտակման համար: Սնուցող միջավայրի բաղադրությունը (գ/լ թորած ջուր).մանիտոլ, գլյուկոզա կամ սախարոզա - 20.0; TO 2 NRO 4 - 0.2; MgSO 4 - 0.2; NaCl - 0,2; K 2 SO 4 - 0.1; CaCO3 - 5.0:

Սնուցող միջավայրը, առանց ստերիլիզացման, լցնում են 100 - 150 մլ ծավալով կոլբայի մեջ, 1 - 1,5 սմ շերտով և վարակվում ջերմոցային հողով (1/3 թեյի գդալ): Տապակները փակվում են բամբակյա խցաններով և տեղադրվում 28–30 °C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։

5-7 օր հետո միջավայրի մակերեսին ձևավորվում է Azotobacter-ի դարչնագույն-շագանակագույն թաղանթ։ Կոլբայի հեղուկը փրփրում է և արտանետում բութաթթվի հոտ, ինչը վկայում է շրջակա միջավայրում բակտերիաների զարգացման մասին։ Cl. pasterianum.

Մանրադիտակ.Մակերեւութային թաղանթից պատրաստվում է ֆիքսված միկրոպատրաստուկ։ Azotobacter-ի երկու ամենատարածված տեսակներն են. Azotobacter chroococcum - երիտասարդ մշակույթում ունի ձողաձև բջիջներ, շարժական, 3-7 մկմ չափի(դիմումի նկ. 8). Հին մշակույթում բջիջները կոկոիդ են, զուգակցված և սարկինանման փաթեթներ, որոնք սովորաբար շրջապատված են լորձային պարկուճով: Բջիջներում կան վոլուտինի բազմաթիվ փայլուն հատիկներ։ Խիտ սննդանյութերի վրա գտնվող գաղութները ցեխոտ են, տարածված կամ ուռուցիկ, անգույն կամ մուգ շագանակագույնից մինչև սև; Azotobacter vinelandii - երիտասարդ մշակույթի մեջ բջիջները ձողաձև են, 2-3 մկմ չափի: Հին մշակույթում բջիջների ձևը գնդաձև է: Հեղուկի կաթիլից պատրաստում են դեղամիջոց Clostridium pasterianum - շարժական ձողաձև բջիջներ, 3-7 միկրոն չափերով, առանձին կամ զույգերով և կարճ շղթաներով դասավորված(դիմումի նկ. 1.10). Սպորները օվալաձև են, ձևավորվում են արտաքուստ, սպորակիր բջիջներով, որոնք ստանում են կիտրոնի ձև։ Բջիջներում շատ գրանուլոզա է կուտակվում։ Գաղութները սպիտակավուն, հարթ, փայլուն։

Վերահսկիչ հարցեր, տես դաս թիվ 8:

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #10

Թիրախ:

Առաջադրանքներ.

Ուսումնասիրել ալկոհոլային խմորման մեխանիզմը և դրա հարուցիչների մորֆոլոգիան:

Ուսումնասիրել կաթնաթթվային խմորման ընթացքի և տեսակների մեխանիզմը, դրա հարուցիչների մորֆոլոգիան:

Ուսումնասիրել ալկոհոլը քացախաթթվի վերածելու առանձնահատկությունները և քացախաթթվային բակտերիաների մորֆոլոգիան:

Ուսումնասիրել թութային խմորման մեխանիզմը և դրա հարուցիչների մորֆոլոգիան:

Նյութեր և սարքավորումներ. Աղաջուր, կեֆիր, հացթուխի խմորիչ, գարեջուր, թթվային բակտերիաների կուլտուրա, պատրաստուկների ներկման սարքավորում, մանրադիտակներ:

Հիմնական հասկացություններ.Ալկոհոլային խմորում, պաստերի էֆեկտ, հոմոֆերմենտատիվ կաթնաթթվային խմորում, հետերոֆերմենտատիվ կաթնաթթվային խմորում։

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1. Ալկոհոլային խմորման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմները ուսումնասիրելու համար նկարեք նկար: 50 մլ 20% սախարոզայի լուծույթ և մոտ 1 գ խմորիչ՝ նոսրացված 10 մլ սախարոզայի լուծույթում (20%), լցնում են 250 մլ տարողությամբ կոլբայի մեջ։ Փակեք և մի քանի օր պահպանեք ջերմաստիճանը 35-40°C-ի սահմաններում։

Մանրադիտակ.Գործնականում օգտագործվող մշակովի խմորիչների մեծ մասը պատկանում է սեռին Saccharomyces (Saccharomyces cerevisiae, բրինձ. թիվ 1, 2 դիմում) և Schizosaccharomyces. Այս խմորիչները տարբերվում են վայրիներից նրանով, որ նրանք ի վիճակի են դիմակայել շաքարի (մինչև 70%) և ալկոհոլի (մինչև 14%) բարձր կոնցենտրացիաներին, զարգանում են pH 4-6-ում և ձևավորում են ֆերմենտացման ավելի քիչ ենթամթերք։

Առաջադրանք թիվ 2. Կաթնաթթվային խմորման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրության համար նկարեք նկար:Կաթնաթթվային խմորման բակտերիաներին (հոմոֆերմենտացիոն խմորում) ծանոթանալու համար կարելի է օգտագործել պատրաստի կաթնաթթվային մթերքներ (կաթնաշոռ կաթ, ացիդոֆիլուս, կեֆիր) և աղաջուր (հետերոֆերմենտացիոն խմորում)։ Այս ապրանքները պտտվում են ապակե սլայդի վրա և պատրաստվում է բարակ քսուք: 3-5 րոպե ներկեք մեթիլեն կապույտի ջրային լուծույթով։

Մանրադիտակ.Կաթնաթթվային արտադրանքներում առավել հաճախ հայտնաբերվում են հոմոֆերմենտացնող խմորման հետևյալ պաթոգենները. Streptococcus lactis (Հավելվածի թիվ 9), ունենալով 0,5-1,0 մկմ տրամագծով օվալաձև կոկի ձև, կուլտուրայում գտնվում են զույգերով (դիպլոկոկներ) կամ կարճ շղթաներով (streptococci), ավելի հազվադեպ՝ միայնակ բջիջներում; Lactobacillus bulgaricus (Հավելվածի թիվ 9) - մեծ ձող (4-5 մկմ երկարությամբ), անշարժ, գրամ-դրական, տեղակայված առանձին բջիջների և կարճ շղթաների տեսքով, զարգացման օպտիմալ ջերմաստիճանը 40-45 ° C է; Lactobacillus acidophilus - Մորֆոլոգիայում մոտ է բուլղարերենին, բայց ունի զարգացման տարբեր ջերմաստիճանային օպտիմալ՝ 37°C։

Հետերոֆերմենտացիոն խմորման պատճառական գործակալների թվում են սովորաբարLactobacillus brevis, Lactobacillus brassicae, Leuconostoc mesenteroidesև այլք (աղաջրի միկրոֆլորա): Աղի կամ կեֆիրի մակերեսին սպիտակ կամ յուղալի թավշյա կնճռոտ թաղանթ ցույց է տալիս առկայությունը Geotrichum candidum ( Oidium lactis) (հավելվածի նկ. No 9) - կաթնային բորբոսը, որը միշտ ուղեկցում է կաթնաթթվային խմորմանը։

Առաջադրանք թիվ 3.Ալկոհոլը քացախաթթվի վերածելու մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրության համար նկարեք նկար:Գարեջրի բարակ շերտը (0,5-1,0 սմ3) լցնում են կոնաձև կոլբայի մեջ։ Տապակները փակվում են բամբակյա խցաններով և տեղադրվում 30°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։ 5-7 օր հետո նկարագրվում է գոյացած թաղանթների բնույթը, մանրադիտակով հետազոտվում են ներկված քսուքները։

Մանրադիտակ.Սեռում միավորված են քացախաթթվային բակտերիաներըAcetobacter, մուտքագրել տեսքAcetobacter aceti(Հավելվածի նկ. 9) ներկայացված է թույլ շարժական ձողաձև էլիպսաձև բջիջներով՝ 0,6-0,8 լայնությամբ, 1,0-3,0 մկմ երկարությամբ, միայնակ, զույգերով կամ շղթաներով: Հաճախ ձևավորում է ինվոլյուցիոն ձևեր՝ ուռած, ճյուղավորված կամ թելանման գոյացությունների տեսքով։ Քացախաթթվի բակտերիաները հեշտությամբ մեկուսացվում են գարեջուրից:

Առաջադրանք թիվ 4.Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմները, որոնք ներգրավված են յուղային խմորման մեջ: Չմաքրված կարտոֆիլը կտրատել շերտերով, դրանցով լցնել փորձանոթը ծավալի 1/3-ով, ավելացնել մի պտղունց կավիճ և լցնել ջրով մինչև ծայրը։ Փորձանոթները տեղադրվում են ջրային բաղնիքում 80°C ջերմաստիճանում 10-15 րոպե: Այնուհետև փորձանոթները խցանվում են և տեղափոխվում 25 ջերմաստիճան ունեցող թերմոստատ0 Գ. 2-3 օր հետո հեղուկում հայտնաբերվում են թութային խմորման բակտերիաներ։

Մանրադիտակ.Ֆիքսված պատրաստուկների վրա հայտնաբերվում ենCl. pasterianum, Cl. butiricum(Հավելվածի նկ. 1, 10) - կլորացված ծայրերով շարժական ձողիկներ՝ միայնակ և զուգված։ Հին մշակույթներում սպորը հայտնաբերվում է բջջի մի ծայրում:

Վերահսկիչ հարցեր

Ալկոհոլային խմորում.

Խմորիչ. Ձևը, կառուցվածքը, վերարտադրությունը և դասակարգումը:

Էթիլային սպիրտի օքսիդացում դեպի քացախաթթու:

Կաթնաթթվային խմորման քիմիա և հարուցիչներ (հոմոֆերմենտացիոն տիպ).

Կաթնաթթվային խմորման քիմիա և հարուցիչներ (հետերոֆերմենտատիվ տիպ).

Բուտիրիկև ացետոբուտիլային խմորում.

Պեկտինային նյութերի բուտիրային խմորում.

Մանրաթելերի անաէրոբ քայքայումը:

Մանրաթելերի օքսիդացում միկրոօրգանիզմների կողմից.

Լրացրեք թիվ 9 «Ֆերմենտացման գործընթացների բնութագրերը» աղյուսակը.

Աղյուսակ թիվ 9.Ածխածնի փոխակերպման գործընթացների բնութագրում (ազոտ չպարունակող միացությունների խմորման և օքսիդացման գործընթացներ)

Հարցեր ինքնուրույն ուսումնասիրության համար

Սնուցման և բջջի մեջ սննդանյութերի ընդունման մեթոդներ.

Միկրոօրգանիզմների սննդային կարիքները.

Միկրոօրգանիզմների սնուցման տեսակները.

Միկրոօրգանիզմների նյութափոխանակություն. Ֆերմենտացիա, շնչառություն, ֆոտոսինթեզ:

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #11

ԱԾԽԱԾՆԻ ՄԻԱՑՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԻ ՓՈՐՁԱՓՈԽՈՒՄԸ ՄԻԿՐՈՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ԿՈՂՄԻՑ

Թիրախ:Ուսումնասիրեք առանձնահատկությունները տարբեր տեսակներխմորում և դրանց պաթոգենների մորֆոլոգիան:

Առաջադրանքներ.

Ուսումնասիրել պեկտինի խմորման մեխանիզմը և դրա հարուցիչների մորֆոլոգիան:

Ուսումնասիրել աերոբ պայմաններում ցելյուլոզայի վերափոխման առանձնահատկությունները և դրա հարուցիչների ձևաբանությունը:

Ուսումնասիրել անաէրոբ պայմաններում ցելյուլոզայի խմորման առանձնահատկությունները և դրա հարուցիչների մորֆոլոգիան:

Նյութեր և սարքավորումներ. Միկրոօրգանիզմների կուտակային կուլտուրաներ, որոնք իրականացնում են պեկտինային նյութերի խմորում, մանրաթելերի տարրալուծում, մանրադիտակներ, ներկման պատրաստուկների սարքավորումներ։

Հիմնական հասկացություններ.Բուտիրային խմորում, պեկտին, պեկտինազ, ցելյուլոզ, ցելյուլազ:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1.Ուսումնասիրել պեկտինային նյութերի խմորման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմները, նկարել: Պեկտին քայքայող բակտերիաները մեկուսացնելու համար օգտագործվում է կտավատի կամ եղինջի սնուցող միջավայր։ Ցողուններից պատրաստում են 5-7 սմ երկարությամբ խուրձեր, դնում փորձանոթների մեջ, լցնում ծորակի ջրով և եփում 10-15 րոպե։ Եռալով հեռացնում են արդյունահանող նյութերը, որոնք կարող են ծառայել որպես ածխածնի աղբյուր բութաթթվի բակտերիաների ուղեկցման համար: Ջուրը ցամաքեցնում են, թիթեղները լցնում են ջրի նոր չափաբաժինով, փորձանոթները պինդ փակում են բամբակյա խցաններով և 20 րոպե ստերիլիզացնում ավտոկլավում 1 ատմ։ Երբ խողովակները սառչում են, միջավայրը վարակվում է թարմ կտավատի ծղոտի կտորով: Վարակված փորձանոթները տեղադրվում են 35°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ: 3-5 օր հետո սկսվում է պեկտինի խմորման գործընթացը, հեղուկը պղտորվում է ու փրփրում։

Մանրադիտակ.Պեկտինի ֆերմենտացման բակտերիաների մորֆոլոգիան ուսումնասիրելու համար պատրաստում են ցմահ պատրաստուկներ։ Snopik-ը հանվում է փորձանոթից, հեղուկի մի կաթիլը սեղմվում է ապակե սլայդի վրա, ամրացվում և պատրաստվում են կյանքի համար նախատեսված պատրաստուկներ (Լուգոլի լուծույթում). Բջիջները տեսանելի են պատրաստման վրաClostridium pectinovorumԵվClostridium felsineum, վեգետատիվ և սպորացնող, մուգ կապույտ գույնով գրանուլոզայի համար ներկված յոդով (հավելվածի թիվ 9):

Առաջադրանք թիվ 2.Մանրաթելերի տարրալուծման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմները ուսումնասիրելու համար (անաէրոբ պայմաններ) նկարեք նկար:Անաէրոբ ձևերի կուտակման մշակույթ ստանալու համարցելյուլոզը ոչնչացնող բակտերիաներօգտագործել Իմշենեցկի միջավայրը: INմոտ 1-2 գ ֆիլտրի թուղթ կամ բամբակյա բուրդ ավելացվում է կլոր հարթ հատակով կոլբայի վրա և մինչև վերև լցնում հետևյալ բաղադրությամբ (գ/լ-ով) միջավայրով. KNH4 HPO4 - 1.0; KN2 RO4 - 0,5; TO2 NRA4 - 0,5; CaCl2 – 0,03; պեպտոն - 5; MgSO4 - 0,4; CaCO3 - 2.0; NaCl - 0,5; MnSO4 և FeSO4 ոտնահետքեր;միջին pH 7.0-7.4. Շրջակա միջավայրը վարակված չէ մեծ գումարհողը, կոլբը փակել խցանե խցանով գազերի բացթողման համար անցքով և դնել 30-35°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։ Ընտրովի պայմաններն այս դեպքում որոշվում են ցելյուլոզայի առկայությամբ՝ ածխածնի աղբյուր, որը կարող է սպառվել միայն ցելյուլոզա քայքայող բակտերիաների կողմից, որոնք ունեն ցելյուլազային ֆերմենտ, ինչպես նաև անաէրոբ պայմաններով: Պեպտոնը, որը ներմուծվում է միջավայրի մեջ փոքր քանակությամբ, ուժեղորեն խթանում է խմորման գործընթացը: 7-10 օր հետո սկսվում է ցելյուլոզային խմորումը, որը տեւում է 2-3 շաբաթ։ Զտիչ թուղթը խմորման ընթացքում դառնում է մի փոքր ցեխոտ, դեղնում և աստիճանաբար փլուզվում։

Մանրադիտակ.Մանրադիտակ մի կտոր թուղթ: Անաէրոբ պայմաններում ցելյուլոզայի տարրալուծման գործընթացն իրականացվում է սեռի բակտերիաների կողմիցԿլոստրիդիում. Cl. omelianskii(Հավելվածի նկ. 9) ունի մինչև 8 մկմ երկար ձողաձև բջիջների տեսք, հին կուլտուրաներում երկարությունը մոտ 10-15 միկրոն է՝ առանձին կամ թելերով միացված։ Սպորները գնդաձև են, ձևավորվում են բջիջի վերջում, բջիջը ստանում է թմբուկի տեսք։ Այն մեկուսացված է հողից և ջրից։ Աճի օպտիմալ ջերմաստիճանը 30-35°C է։

Առաջադրանք թիվ 3.Մանրաթելերի տարրալուծման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրության համար (աերոբիկ պայմաններ) նկարեք նկար:Աերոբ մանրաթելերը քայքայող բակտերիաների մեկուսացման համար օգտագործվում է Հաթչինսոնի սննդարար միջավայրը։ Միջին բաղադրությունը (գ/լ)՝ Կ2 NRA4 - 1.0; NaCl - 0,1; CaCl2 - 0,1; FeCl3 – 0,01; MgSO4 - 0,3; NaNO3 - 2,5; միջին pH 7.2-7.3: Ստերիլ սնուցող միջավայրը լցնում են 1,5-2,0 սմ շերտով կոնաձև կոլբայի մեջ, միջավայրը վարակվում է հողի մի կտորով, իսկ ծալքավոր ֆիլտրը իջեցվում է միջավայրի մակերեսին՝ կոնը վերև: Տապակները փակվում են բամբակյա խցաններով և 10-14 օր տեղադրվում 25-30°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։ Սննդային միջավայրի և օդի սահմանին ստեղծվում են մանրաթել քայքայող բակտերիաների սնուցման և աերոբիկ շնչառության օպտիմալ պայմաններ։ Այս գոտում ֆիլտրի թղթի ոչնչացման ամենաինտենսիվ գործընթացը: 8-10 օր հետո ֆիլտրի վրա հայտնվում են մանրաթել ոչնչացնող բակտերիաների գաղութների դեղնանարնջագույն բծերը։ Թուղթը քայքայվում է, և ֆիլտրը աստիճանաբար նստում է հատակին:

Մանրադիտակ.Մանրէաբանական օղակով կոլբայի մեջ մանրաթելերի քայքայված զանգվածներից պատրաստվում է հեղուկի մի կաթիլ քսուք: Ամենից հաճախ պատրաստման վրա հայտնաբերվում են պատվերների ներկայացուցիչներ:Թռչող բակտերիաներԵվՑիտոֆագալներսահող բակտերիաների խմբեր (հավելվածի նկ. No 10):ՍեռՑիտոֆագաներկայացված է երկար ձողաձև բջիջներով՝ սրածայր ծայրերով, որոշ չափով թեքված (2-10 մկմ): Գաղութները դեղին, նարնջագույն, դարչնագույն-դարչնագույն, հարթ, ցեխոտ են։

ՍեռСellvibrloներկայացված է փոքր, մի փոքր կորացած շարժական ձողերով (2-4 մկմ): Գաղութները օխրադեղնավուն լորձաթաղանթ են։ RollCellfalciculaունի սրածայր ծայրերով (2,0 * 0,7 մկմ) կարճ հաստ կոր ձողիկների ձև։

Սեռսորանգիաերիտասարդ մշակույթում այն ​​կարծես հաստ, թեթևակի կորացած ձողաձև բջիջներ է՝ կլորացված ծայրերով (2-5 մկմ): Մշակույթի ծերացման հետ առաջանում են պտղատու մարմիններ՝ կազմված միկրոկիստներից։ Ձողաձեւ բջիջները կրճատվում են, ծածկվում հաստ թաղանթով, ձեռք բերում անկանոն ուրվագծեր։ Գաղութներ վառ նարնջագույն, մանուշակագույն:

ՍեռՊոլյանգիումներկայացված է գրեթե ուղիղ ձողաձև բջիջներով՝ կլորացված ծայրերով (3,5-8 մկմ): Ծերացման հետ առաջանում են օվալային միկրոկիստաներ, որոնք կապված են և տանձաձև պտղատու մարմիններ։ Պտղատու մարմինները դեղին են, նարնջագույն, նստում են անմիջապես հիմքի վրա:

Բացի բակտերիաներից, բորբոսնած սնկերը մասնակցում են մանրաթելերի աերոբ ոչնչացմանը:Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Cladosporium, Trichodermaև որոշ ակտինոմիցետներ:

Վերահսկիչ հարցեր, տես դաս թիվ 10:

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #12

ՄԻԿՐՈՕՐԳԱՆԻԶՄՆԵՐԻ ԷԿՈԼՈԳԻԱ

Թիրախ:Ուսումնասիրել շրջակա միջավայրի գործոնների ազդեցությունը միկրոօրգանիզմների աճի և զարգացման վրա:

Հիմնական հասկացություններ.Պարտադիր փսիխրոֆիլներ, հոգեմետ միկրոօրգանիզմներ (ֆակուլտատիվ փսիխրոֆիլներ), թերմոֆիլներ, օսմոհանդուրժող միկրոօրգանիզմներ, գալոֆիլներ, լիոֆիլիզացիա, պարտադիր աերոբներ և անաէրոբներ, միկրոաերոֆիլներ, աերոտոլերանտ անաէրոբներ, հակասեպտիկներ:

Վերահսկիչ հարցեր

Ջերմաստիճանի ազդեցությունը միկրոօրգանիզմների աճի և զարգացման վրա. Ջերմաստիճանի նկատմամբ մանրէների էկոլոգիական խմբերը.

Խոնավության ազդեցությունը միկրոօրգանիզմների աճի և զարգացման վրա.

Լույսի և տարբեր ճառագայթների ազդեցությունը միկրոօրգանիզմների աճի և զարգացման վրա. Մագնիսական դաշտի ազդեցությունը.

Թթվածնի կոնցենտրացիայի ազդեցությունը միկրոօրգանիզմների աճի և զարգացման վրա.

Շրջակա միջավայրի ռեակցիայի ազդեցությունըմիկրոօրգանիզմների աճի և զարգացման վրա. Բակտերիաների համար թունավոր միացություններ և իոններ:

Միկրոօրգանիզմների հարմարվողական ռեակցիաները.

ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #13

ԲԱԿՏԵՐԻԱՅԻ ԶԳԱՅՆՈՒԹՅԱՆ ՈՐՈՇՈՒՄ ՀԱԿԱԲԻՈՏԻԿՆԵՐԻ ՀԱՄԱՐ

Թիրախ:Որոշել միկրոօրգանիզմների զգայունությունը հակաբիոտիկների նկատմամբ:

Առաջադրանքներ.

1. Որոշեք միկրոօրգանիզմների զգայունությունը հակաբիոտիկների նկատմամբ ագարի մեջ դիֆուզիայի միջոցով՝ օգտագործելով թղթե սկավառակներ

Նյութեր և սարքավորումներ.Petri ափսեներ MPA-ով, հակաբիոտիկ լուծույթներով թրջված ստերիլ սկավառակներ, սապրոֆիտ բակտերիաների մաքուր կուլտուրաներ և բորբոս սնկերը, պիպետներ, սպիրտի լամպեր, սպաթուլաներ։

Հիմնական հասկացություններ.Հակաբիոտիկներ, բակտերիոստատիկ և մանրէասպան ազդեցություններ, R-գործոններ, դիմադրողականություն:

Առաջընթաց

Առաջադրանք թիվ 1.Որոշեք միկրոօրգանիզմների զգայունությունը հակաբիոտիկների նկատմամբ՝ ագարի մեջ դիֆուզիոն օգտագործելով՝ օգտագործելով թղթե սկավառակներ:

Հակաբիոտիկների նկատմամբ միկրոօրգանիզմների զգայունությունը որոշելու սկավառակի դիֆուզիոն մեթոդը հիմնված է հակաբիոտիկով թղթե սկավառակի շուրջ աճի արգելակման գոտու տրամագծի գրանցման վրա: Փորձնական մանրէներով պատվաստված Պետրի կերակուրների սննդարար ագարի մակերեսին կիրառվում են հակաբիոտիկներով ներծծված թղթե սկավառակներ ևբաժակները ինկուբացվում են 37°C ջերմաստիճանում: Շուրջ մանրէների աճի արգելակման գոտու առկայությունըսկավառակները ցույց են տալիս պաթոգենի զգայունությունը դեղամիջոցի նկատմամբ, աճի արգելակման գոտու բացակայությունը ցույց է տալիս դիմադրողականությունը:

Սահմանման առաջընթաց.Միկրոօրգանիզմների կուլտուրան կիրառվում է MPA-ով ստերիլ Petri սպասքի վրա: Որպես պատվաստման նյութ օգտագործվում է արգանակի ամենօրյա մշակույթը. 0,2 մլ բակտերիալ կախոցը կիրառվում է MPA-ի մակերեսին և հավասարաչափ բաշխվում՝ թափահարելով բաժակը, որին հաջորդում է ավելորդ հեղուկը պիպետտով ծծելով:

Բաժակները չորանում են 30-40 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում։ Այնուհետև պինցետով ցանքածածկ միջավայրի մակերեսին տեղադրվում են տարբեր հակաբիոտիկներով ներծծված սկավառակներ։ Սկավառակները սերտորեն կիրառվում են մակերեսին միջավայրի հետ սերտ շփման համար: Սկավառակները տեղադրվում են միմյանցից հավասար հեռավորության վրա և բաժակի եզրից մոտ 2 սմ հեռավորության վրա: Բաժակները դրվում են թերմոստատի մեջ գլխիվայր ներքև կամ գավաթի կափարիչի տակ դրվում են ֆիլտրի թղթի շրջանակ՝ խտացրած ջրով մարգագետինների էրոզիայից խուսափելու համար և ինկուբացնում են 37°C-ում 18 ժամ:

Արդյունքների գնահատում.Քանոնի միջոցով որոշեք սկավառակների շուրջ մանրէների աճի արգելակման գոտիների տրամագիծը, ներառյալ հենց սկավառակի տրամագիծը: Հաշվի չեն առնվում միայնակ գաղութները կամ միկրոօրգանիզմների աճի բարակ թաղանթը աճի արգելակման գոտում: Սկավառակների շուրջ մանրէների աճի արգելակման գոտիների բացակայությունը վկայում է այս հակաբիոտիկի նկատմամբ միկրոբի զգայունության բացակայության մասին: Մինչև 10 մմ տրամագծով մանրէների աճի արգելակման գոտում շտամը համարվում է մի փոքր զգայուն: 10 մմ-ից ավելի մանրէների աճի արգելակման գոտին ցույց է տալիս շտամի զգայունությունը: Որքան մեծ է աճի արգելակման գոտին, այնքան բարձր է միկրոօրգանիզմների զգայունությունը հակաբիոտիկի նկատմամբ: Արդյունքները գրանցեք թիվ 10 աղյուսակում։

Աղյուսակ թիվ 10.Միկրոօրգանիզմների զգայունությունը հակաբիոտիկների նկատմամբ.

Ստրեպտոմիցինի հակաբիոտիկ հատկությունները. Պենիցիլինի հակաբիոտիկ հատկությունները. ԳՈՐԾՈՒՆԵՈՒԹՅՈՒՆ #14 ԲԺՇԿԱԿԱՆ ՄԱՆՐԵՍԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ ՀԻՄՔՆԵՐԸ Թիրախ:Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմները՝ կենդանիների և մարդկանց պաթոգենները: գրականություն Լեբեդևա Մ.Ն. Մանրէաբանություն. - Մ .: «Բժշկություն», 1969 թ. Մանրէաբանության, վիրուսաբանության և իմունոլոգիայի հիմունքներ / Էդ. Խմբագրվել է Վորոբյով Ա.Ա., Կրիվոշեին Յու.Ս. - Մ.: Masterstvo, 2001: Քննարկման հարցեր Ստաֆիլոկոկի օրինակով պաթոգեն կոկիների բնութագրումը. Մաշկի բորբոքային-թարախային հիվանդություններ. Սեպտիկեմիա. Ստրեպտոկոկի օրինակով պաթոգեն կոկիների բնութագրումը. Տեղայնացված պիոբորբոքային վարակներ, տոնզիլիտ, կարմիր տենդ: Պնևմոկոկի օրինակով պաթոգեն կոկիների բնութագրում. Թոքաբորբ. Մենինգոկոկի օրինակով պաթոգեն կոկիների բնութագրում. Մենինգիտ. Պաթոգեն կոկիների բնութագրումը գոնոկոկի օրինակով. Գոնորիա, բլենորիա: Գրամ-բացասական ոչ սպոր առաջացնող բակտերիաների բնութագրումը ժանտախտի բացիլի օրինակով. Ժանտախտ. Գրամ-բացասական ոչ սպոր առաջացնող բակտերիաների բնութագրումը տուլարեմիայի բացիլի օրինակով. Տուլարեմիա. Գրամ-բացասական ոչ սպոր ձևավորող բակտերիաների բնութագրում Բրյուսելայի օրինակով: Բրուցելոզ. Աղիքային բակտերիաների ընտանիքը Escherichia coli-ի օրինակով. Տիֆի և պարատիֆային բակտերիաների խմբի բնութագրերը. Տիֆ և պարատիֆ: Սննդային թունավորման պատճառական գործակալները. Սալմոնելոզ. Դիզենտերիայի պատճառական գործակալների բնութագրերը. Դիզենտերիայի տեսակները. Խոլերայի վիբրիոյի բնութագրերը. Կապսուլյար բակտերիաների կառուցվածքը Klebsiella-ի օրինակով. Սիբիրախտի բացիլների բնութագրումը. Սիբիրախտի ձևերը. Հեմոֆիլ բակտերիաների բնութագրերը կապույտ հազի օրինակով. Պաթոգեն անաէրոբները գազային գանգրենայի պատճառական գործակալների օրինակով. Պաթոգեն անաէրոբները տետանուսի բացիլի օրինակով. Պաթոգեն անաէրոբները բոտուլիզմի պատճառական գործակալների օրինակով. Դիֆթերիայի բացիլի բնութագրերը. Թթվակայուն բակտերիաների բնութագրումը տուբերկուլյոզի և բորոտի բացիլի օրինակով. Պաթոգեն սնկերի բնութագրումը ակտինոմիցետների օրինակով. Դերմատոմիկոզ. Պաթոգեն սպիրոխետների բնութագրումը գունատ տրեպոնեմայի օրինակով. Սիֆիլիս. Պաթոգեն սպիրոխետների բնութագրերը ռեցիդիվ տենդի սպիրոխետի օրինակով.Այս ուղեցույցը համառոտ տրամադրում է տեսական հիմքսանիտարական մանրէաբանություն, ինչպես նաև որոշ փորձեր՝ կապված օդի, ջրի և հողի միկրոֆլորայի տարբեր ցուցանիշների որոշման հետ։ Տարբեր Բաղկացած է երկու բաժիններից՝ Ընդհանուր կիրառական բժշկական մանրէաբանություն և կլինիկական մանրէաբանություն: Առաջին բաժնում նախանշված են մանրէաբանական հետազոտության հիմնական մեթոդները, վարակիչ հիվանդությունների սպեցիֆիկ թերապիայի և կանխարգելման մեթոդները, երկրորդում՝ դրանց լաբորատոր... 1,32 ՄԲ ավելացվել է 06/11/2011 Ուսուցողական. KemTIPP. - Կեմերովո, 114 p. Մանրէաբանության առարկան և խնդիրները. Միկրոօրգանիզմների հիմնական հատկությունները Մանրէաբանության զարգացման պատմական ուրվագիծ. Ժամանակակից մանրէաբանության զարգացման և ձեռքբերումների հեռանկարները ազգային տնտեսություն, Սննդի Արդյունաբերություն. Սիստեմատիկության սկզբունքները. Կառուցվածքային կազմակերպությունմիկրոօրգանիզմ...

Անուն:Բերանի խոռոչի մանրէաբանություն, վիրուսաբանություն և իմունոլոգիա
Ցարև Վ.Ն.
Հրատարակման տարի. 2013
Չափ: 81,64 ՄԲ
Ձևաչափ: djvu
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն:Վ.Ն. Ցարևայի խմբագրությամբ «Բերանի խոռոչի մանրէաբանություն, վիրուսաբանություն և իմունոլոգիա» գործնական ուղեցույցը դիտարկում է մարդու բերանի խոռոչի մանրէաբանության և միկրոֆլորայի ընդհանուր խնդիրները: Ներկայացնել ... Ներբեռնեք գիրքը անվճար

Անուն:Բժշկական մանրէաբանություն, վիրուսաբանություն և իմունաբանություն։ 2-րդ հրատարակություն
Վորոբյով Ա.Ա.
Հրատարակման տարի. 2012
Չափ: 32,73 ՄԲ
Ձևաչափ: pdf
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն: Գործնական ուղեցույց«Բժշկական մանրէաբանություն, վիրուսաբանություն և իմունաբանություն» Ա.Ա.Վորոբյովի և այլոց խմբագրությամբ դիտարկվում են ընդհանուր մանրէաբանության, ինչպես նաև իմունոլոգիայի և վիրուսաբանության հիմնական բաժինները: Ես... Ներբեռնեք գիրքը անվճար

Անուն:Մանրէաբանության, վիրուսաբանության և իմունոլոգիայի հիմունքներ
Prozorkina N.V., Rubashkina L.A.
Հրատարակման տարի. 2012
Չափ: 5,72 ՄԲ
Ձևաչափ: pdf
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն:Պրոզորկինա Ն.Վ.-ի և այլոց կողմից խմբագրված «Միկրոբիոլոգիայի, վիրուսաբանության և իմունոլոգիայի հիմունքներ» դասագիրքը դիտարկում է ընդհանուր մանրէաբանության, վիրուսաբանության և իմունոլոգիայի հիմնական նյութը: Պատմությունը դրված է ... Ներբեռնեք գիրքը անվճար

Անուն:Մանրէաբանության գործնական վարժությունների ուղեցույց
Եգորով Ն.Ս.
Հրատարակման տարի. 1995
Չափ: 2,04 ՄԲ
Ձևաչափ: djvu
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն:Եգորով Ն.Ս.-ի խմբագրած «Միկրոբիոլոգիայի գործնական վարժությունների ուղեցույց» գրքում լուսաբանված են վիրուսաբանության և մանրէաբանության բնագավառի ժամանակակից լաբորատոր ախտորոշման մեթոդները, նույնական... Ներբեռնեք գիրքը անվճար.

Անուն:Մանրէաբանություն վիրուսաբանության հիմունքներով
Koleshko O.I., Zavezenova T.V.
Հրատարակման տարի. 1999
Չափ: 8,71 ՄԲ
Ձևաչափ: djvu
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն:Կոլեշկո Օ.Ի.-ի կողմից խմբագրված «Մանրէաբանությունը վիրուսաբանության հիմունքներով» ուսումնական ուղեցույցում:

Անուն:Բժշկական մանրէաբանություն և իմունաբանություն
Վորոբյով Ա.Ա.
Հրատարակման տարի. 1999
Չափ: 14,3 ՄԲ
Ձևաչափ: djvu
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն:Ա.Ա.Վորոբյովի խմբագրած «Բժշկական մանրէաբանություն և իմունաբանություն» դասագիրքը դիտարկում է ընդհանուր մանրէաբանության և իմունոլոգիայի հիմնական բաժինները: Պատմական շրջադարձեր միկրո... Ներբեռնեք գիրքը անվճար

Անուն:Բժշկական մանրէաբանություն, վիրուսաբանություն և իմունաբանություն
Վորոբյով Ա.Ա.
Հրատարակման տարի. 2004
Չափ: 12,81 ՄԲ
Ձևաչափ: djvu
Լեզու:ռուսերեն
Նկարագրություն:Ա.Ա.Վորոբյովի խմբագրած «Բժշկական մանրէաբանություն, վիրուսաբանություն և իմունոլոգիա» դասագիրքը դիտարկում է ընդհանուր մանրէաբանության, ինչպես նաև վիրուսաբանության և իմունոլոգիայի հիմնական բաժինները: Պատմությունը ներկայացված է ... Ներբեռնեք գիրքը անվճար

Անուն:Բակտերիալ վարակների մանրէաբանական ախտորոշում
Ժդանիվսկի Մ.Վ., Շչուկին Ի.Մ., Սլյուսարև Օ.Ա., Նիկոլենկո Յու.Ի.
Հրատարակման տարի. 2007
Չափ: 6,72 ՄԲ
Ձևաչափ: djvu
Լեզու:ուկրաինական
Նկարագրություն:Ժդանիվսկի Մ.Վ.-ի և այլոց խմբագրությամբ «Բակտերիալ վարակների մանրէաբանական ախտորոշում» դասագիրքը քննարկում է բակտերիալ վարակների խմբի մանրէաբանական ախտորոշումը: Տեխնիկան նկարագրված է...

Ուղեցույցներ

գործնական աշխատանքների իրականացման համար

մասնագիտության համար.

19.01.17 Եփել. Հրուշակագործ

Մշակողը:

Վերետեննիկովա Օ.Մ. ուսուցիչ

Վալույկի, 2016 թ

Բացատրական նշում

Իրական ուղեցույցներկատարել գործնական աշխատանք կարգապահության վրա»սննդամթերքի արտադրության մեջ մանրէաբանության, սանիտարական և հիգիենայի հիմունքները » մշակվել են Դաշնային պետության հիման վրա կրթական չափորոշիչ(այսուհետ՝ ԳԷՖ) մասնագիտությամբ.

19.01.17 Խոհարար. Հրուշակագործ

Առաջին կուրսի ուսանողների համար նախատեսված են գործնական աշխատանքների իրականացման ուղեցույցներԳործնական և լաբորատոր աշխատանքների իրականացումը ուղղված է հետևյալի լուծմանըառաջադրանքներ:

բարձրացնել իրազեկությունը և գիտելիքների ձեռքբերման ուժը.

զարգացնել վերլուծելու, ուսումնասիրվող առարկաները համեմատելու, հետազոտություն անցկացնելու, աղյուսակներ, դիագրամներ, կլաստերներ կազմելու, եզրակացություններ անելու կարողություն.

զարգացնել ուսանողների տրամաբանական մտածողությունը, ճանաչողական կարողությունները, անկախությունը;

սովորել, թե ինչպես օգտագործել ձեռք բերված գիտելիքներն ու հմտությունները կյանքում:

Ուսումնասիրելիս, նյութը ամրացնելիս օգտագործվում են հետևյալ տեսակները ինքնուրույն աշխատանք:

Աշխատեք դասագրքի տեքստի հետ.

Ներկայացման աշխատանք.

Աշխատեք ուսումնասիրված օբյեկտի հետ:

Սեղանի հետ աշխատելը.

Աշխատեք կլաստերի, սխեմայի կազմման վրա.

Աշխատում է պատրաստված միկրոպատրաստուկներով. Միկրոպրեպարատների պատրաստում.

Ուղեցույցների կառուցվածքը.

1. թեմա
2. աշխատանքի նպատակը
3. սարքավորումներ աշխատանքի համար
4. աշխատանքի առաջընթաց
5. աշխատանքը ավարտելու համար անհրաժեշտ սովորողների գիտելիքների վերահսկում և թարմացում
6. աշխատանքային պայմանները

Յուրաքանչյուր գործնական և լաբորատոր աշխատանք պետք է կազմվի նոթատետրում՝ գործնական աշխատանքի համար՝ համաձայն առաջարկությունների. (Հավելված 1)

Կատարված աշխատանքի արդյունքների վերահսկումն իրականացվում է գրավոր հաշվետվության և աշխատանքի ընթացքում ուսանողի մշտադիտարկման արդյունքների հիման վրա՝ համաձայն ս.թ.կատարողականի գնահատման չափանիշներ գործնական աշխատանք.

Գործնական աշխատանքների ցանկ

Գործնական աշխատանք թիվ 1

Մանրադիտակի սարքը և դրա հետ աշխատելու կանոնները.

Գործնական աշխատանք թիվ 2 Խմորիչի և բորբոսի մորֆոլոգիայի մանրադիտակային հետազոտություն

Գործնական աշխատանք թիվ 3 Բակտերիաների, խմորիչի, սնկերի բջիջների կառուցվածքի սխեմաներ.

Գործնական աշխատանք թիվ 4-5

Գործնական աշխատանք թիվ 6Ախտահանիչ լուծույթների պատրաստման և դրանց պահպանման սխեմաներ

Գործնական առաջադրանք՝ ուղղված ստուգմանըուսանողների կարողությունը տեսական գիտելիքները առարկայի գործնականում կիրառելու համար

Գործնական աշխատանք №1 ՄԻԿՐՈՍԿՈՊԱՅԻՆ ՍԱՐՔ ԵՎ ԴՐԱ ՀԵՏ ԱՇԽԱՏԵԼՈՒ ԿԱՆՈՆՆԵՐԸ.

Աշխատանքի նպատակը. Ուսումնասիրել թեթև կենսաբանական մանրադիտակի սարքը և տիրապետել դրա հետ աշխատելու կանոններին.

Սարքավորումներ, նյութեր. Մանրադիտակ; պատրաստի միկրոպատրաստուկներ

Մանրադիտակ (հունարենից.միկրոս- փոքր ևսկոպիո- Ես նայում եմ) օպտիկական սարք է, որը բաղկացած է երեք հիմնական մասերից՝ մեխանիկական, օպտիկական և լուսային։

Թեթև կենսաբանական մանրադիտակի դիագրամը ներկայացված է նկ. 1.

Մեխանիկական կամ եռոտանի բաղկացած է ոտքից, հիմքից, խողովակի ամրակցից, առարկայի բեմից, միաձույլ կցորդից (խողովակ), պտտվող սարքից, կոպիտ կենտրոնացման բռնակից (մակրոմետրիկ պտուտակ), նուրբ կենտրոնացման բռնակից (միկրոմետրիկ պտուտակ):

Խողովակը մանրադիտակի աստղադիտակն է։ Խողովակի վերին անցքի մեջ ազատորեն տեղադրվում է ակնոց, խողովակի ստորին ծայրում իր առանցքի շուրջ պտտվող պտտվող սարք (ռևոլվեր), որի մեջ պտտվում են ոսպնյակները։ Ռևոլվերը պտտելով՝ մանրադիտակով աշխատելիս կարող եք արագ փոխել ոսպնյակները՝ խողովակի տակ դնելով ցանկացած ոսպնյակ։ Ոսպնյակը պետք է կենտրոնացած լինի, այսինքն. տեղադրված է մանրադիտակի օպտիկական առանցքի վրա: Դա անելու համար ատրճանակը պտտվում է իր առանցքի շուրջ, մինչև հայտնվի սեղմում:

Օբյեկտների աղյուսակը օգտագործվում է ուսումնասիրվող դեղամիջոցը դրա վրա տեղադրելու համար: Սեղանի վրա դեղը ամրացվում է սեղմակներով (տերմինալներով): Օբյեկտի բեմի կենտրոնում լույսի ճառագայթների անցման և պատրաստուկի լուսավորության անցք է։ Մանրադիտակի որոշ նախագծերում բեմը կարելի է տեղափոխել բեմի ծայրամասում գտնվող պտուտակներով: Սա հնարավորություն է տալիս հետազոտել դեղը տարբեր տեսադաշտերում։

1 – ակնոց

2 – մոնոկուլյար գլուխ

(խողովակ)

3 - ատրճանակ

4 - տեսապակի

5 - առարկայական աղյուսակ

6 - կոնդենսատոր

7 - Կոլեկցիոների ոսպնյակի պատյան

8 - վարդակ լամպով

9 - կրունկ

10 – կոնդենսատորի բրա տեղափոխման բռնակ

11 - նուրբ կենտրոնացման գլխիկ (միկրոմետրի պտուտակ)

12 - կոպիտ ֆոկուսի գլխիկ (մակրոմետրի պտուտակ)

13 - խողովակի պահող

14 - պտուտակ վարդակն ամրացնելու համար

Բրինձ. 1Թեթև կենսաբանական մանրադիտակի սարքի սխեման

Խողովակը վեր ու վար տեղափոխելու համար օգտագործվում են կոպիտ և նուրբ ֆոկուսային կոճակներ (մակրո և միկրո պտուտակներ), ինչը թույլ է տալիս այն տեղադրել պատրաստումից անհրաժեշտ հեռավորության վրա: Պտուտակները ժամացույցի սլաքի ուղղությամբ պտտելը իջեցնում է խողովակը, իսկ հակառակ ուղղությամբ պտտելով՝ այն բարձրացնում: Մակրոմետրիկ պտուտակը պտտելիս ոսպնյակը մոտավորապես դրված է կենտրոնացման վրա, այսինքն. պատրաստուկից այն հեռավորության վրա, որտեղ այն տեսանելի է դառնում: Մակրոպտուտակի պտույտը թույլ է տալիս խողովակը տեղափոխել 20 մմ: Ճշգրիտ կենտրոնացման համար օգտագործվում է միկրոմետրային պտուտակ: Նրա ամբողջական պտույտը խողովակը տեղափոխում է 0,1 մմ-ով: Միկրոպտուտակը պետք է շատ զգույշ վարվի. թույլատրվում է միկրոպտուտակը պտտել 180-ից ոչ ավելի: 0 C այս կամ այն ​​կերպ.

Օպտիկական մաս մանրադիտակի ամենաարժեքավոր մասն է: Այն բաղկացած է ոսպնյակներից և ակնաբույժից։

Ակնափոր (լատ.օկուլուս- աչք) բաղկացած է երկու հարթ-ուռուցիկ ոսպնյակներից, որոնք փակված են ընդհանուր մետաղական շրջանակում: Վերին ոսպնյակը աչքի ոսպնյակ է (խոշորացնող), ներքևը՝ զուգակցող։ Ոսպնյակների միջև հեռավորությունը նրանց կիզակետային երկարությունների գումարի կեսն է: Բարձր խոշորացմամբ ակնոցներն ունեն ավելի կարճ ֆոկուս, հետևաբար ակնոցի երկարությունը նույնպես ավելի կարճ է: Ոսպնյակների միջև կա դիֆրագմ, որը սահմանափակում է տեսադաշտը և հետաձգում լույսի եզրային ճառագայթները: Կենցաղային մանրադիտակները հագեցված են երեք փոխարինելի ակնոցներով, որոնց խոշորացումը նշված է ակնապի մարմնի վրա (x7; x10; x15):

Նպատակները պտուտակված են պտտվող սարքի վարդակների մեջ և բաղկացած են ոսպնյակների համակարգից, որը փակված է մետաղական շրջանակի մեջ: Օբյեկտիվի առջևի (առջևի) ոսպնյակը ամենափոքրն է և միակը, որը տալիս է խոշորացում: Ոսպնյակի մեջ մնացած ոսպնյակները միայն ուղղում են ստացված պատկերի թերությունները (գնդաձեւ և քրոմատիկ շեղման երևույթները) և կոչվում են ուղղիչ։

Պտտվող սարքի վարդակների մեջ պտտվում են չորս ոսպնյակներ, որոնց մեծացումը նշված է ոսպնյակի տակառի վրա (x8; x20; x40; x90 կամ 100): Յուրաքանչյուր ոսպնյակ բնութագրվում է իր կիզակետային երկարությամբ (ապակու սլայդի և առջևի ոսպնյակի միջև հեռավորությունը). կիզակետային երկարությունը 0,15 մմ:

լուսավորման մաս Մանրադիտակը բաղկացած է երկու ոսպնյակի կոնդենսատորից, ծիածանաթաղանթի դիֆրագմայից և ցածր լարման շիկացած լամպով փամփուշտից, որը սնուցվում է 120 ... 220 Վ լարման ցանցից իջեցվող տրանսֆորմատորի միջոցով:

Կոնդենսատորը ծառայում է պատրաստուկի ավելի լավ լուսավորությանը։ Նա լույսի ճառագայթները հավաքում է փնջի մեջ և բեմի բացվածքով ուղղում դեպի պատրաստություն։ Կոնդենսատորի թեւը կարող է շարժվել վերև վար՝ օգտագործելով բռնակը, որպեսզի տեղափոխի կոնդենսատորի թեւը, որը փոխում է ճառագայթների կոնվերգենցիայի անկյունը և, հետևաբար, օբյեկտի լուսավորության աստիճանը: Որքան բարձր է կոնդենսատորի դիրքը, այնքան ավելի լավ է լուսավորված պատրաստումը:

Ծիածանաթաղանթի դիֆրագմը գտնվում է կոնդենսատորի տակ և ծառայում է կոնդենսատոր մտնող լույսի հոսքի կարգավորմանը։ Այն բաղկացած է մետաղական կիսալուսնաձեւ թիթեղներից։ Դուք կարող եք ընդլայնել կամ նեղացնել դիֆրագմայի բացվածքը՝ օգտագործելով հատուկ լծակ: Ժամացույցի սլաքի ուղղությամբ պտտվելիս ծիածանաթաղանթի դիֆրագմայի բացվածքը մեծանում է և, հետևաբար, մեծանում է առարկայի լուսավորության աստիճանը։

Ընկղման ոսպնյակների հետ աշխատելիս պատրաստուկի լուսավորության աստիճանը պետք է լինի առավելագույնը, այնպես որ ծիածանաթաղանթի դիֆրագմայի կափարիչը բացվի, և կոնդենսատորը բարձրացվի իր ամենաբարձր դիրքի:

Չոր ոսպնյակների հետ աշխատելիս, որպես կանոն, հաշվի են առնվում չներկված առարկաները։ Կոնտրաստը ձեռք բերելու համար կոնդենսատորը իջեցվում է ներքև, իսկ ծիածանաթաղանթի դիֆրագմայի բացվածքը կրճատվում է:

Մանրադիտակով աշխատելու կանոններ

Սեղանի վրա մանրադիտակը տեղադրված է խողովակի բռնակով դեպի իրեն՝ սեղանի եզրից 3 ... 5 սմ հեռավորության վրա;

Միացրեք մանրադիտակը և կարգավորեք ճիշտ լուսավորությունը

Փորձարկման պատրաստումը տեղադրվում է օբյեկտի սեղանի վրա և ամրացվում սեղմակներով;

Ցանկալի ոսպնյակը տեղադրվում է խողովակի տակ և կիզակետային երկարությունը սահմանվում է մակրո և միկրո պտուտակներով: Այսպիսով, ընկղմվող ոսպնյակների հետ աշխատելիս պատրաստման վրա նախ քսվում է ընկղման յուղի մի կաթիլ, և խողովակի ամրակը զգուշորեն իջեցնում են մակրոպտուտակով, մինչև այն շփվի ապակու հետ: Այնուհետև, ուշադիր նայելով ակնոցի մեջ, խողովակի ամրակը շատ դանդաղ բարձրացվում է, պտտելով այն ժամացույցի սլաքի ուղղությամբ, մինչև պատկերը երևա: Ոսպնյակի նուրբ կենտրոնացումը կատարվում է միկրոմետր պտուտակով: Չոր օբյեկտների հետ աշխատելիս նմուշը նախ զննում են x8 օբյեկտով: Բարձրացնելով խողովակի ամրակը մակրոպտուտակով և ուշադիր նայելով ակնոցի մեջ, սահմանեք կիզակետային երկարությունը (մոտ 9 մմ) և միկրոմետրային պտուտակով հասեք պատկերի հստակության: Այնուհետև, օբյեկտի սեղանը կամ ապակե սլայդը տեղափոխելով, պատրաստուկի տարածքը տեղադրվում է դաշտի կենտրոնում, որտեղ լավագույնս երևում է ուսումնասիրվող առարկան: Այնուհետև պտտվող սարքն իր առանցքի շուրջը պտտելով՝ խողովակի տակ տեղադրվում է x20 կամ x40 ոսպնյակ։ Այս դեպքում x90 ոսպնյակը չպետք է ընկնի խողովակի տակ: Պտտվող սարքում ոսպնյակները դասավորված են այնպես, որ եթե հայտնաբերվի x8 ոսպնյակով պատկեր, ապա ավելի մեծ խոշորացման ոսպնյակներով նմուշը հետազոտելիս անհրաժեշտ է մի փոքր կարգավորել պատկերի հստակությունը՝ օգտագործելով մակրո և միկրոմետրային պտուտակներ;

Մանրադիտակի ժամանակ անհրաժեշտ է երկու աչքերը բաց պահել և դրանք օգտագործել հերթափոխով.

Աշխատանքն ավարտելուց հետո հանեք պատրաստուկը առարկայի սեղանից, իջեցրեք կոնդենսատորը, x8 օբյեկտը տեղադրեք խողովակի տակ, սպիրտով թաթախված փափուկ կտորով կամ շղարշով հանեք ընկղման յուղը x90 օբյեկտի առջևի ոսպնյակից, դրեք շղարշ անձեռոցիկ։ օբյեկտի տակ, իջեցրեք խողովակի ամրակը:

Ո՞րն է կենսաբանական մանրադիտակի սարքը:

Ի՞նչ մասերից և մեխանիզմներից է բաղկացած մանրադիտակի մեխանիկական մասը:

Ո՞րն է մանրադիտակի օպտիկական համակարգը:

Ի՞նչ է ներառված մանրադիտակի լուսավորության համակարգում:

Ինչպե՞ս պետք է տեղադրվի լուսավորության համակարգը ընկղմվող ոսպնյակի հետ աշխատելիս:

Թվարկե՛ք մանրադիտակով աշխատելու հիմնական կանոնները:

Առաջադրանքը կատարելու պայմանները
1. Առաջադրանքի տեղը (ժամանակը):
Կենսաբանության դաս

Գործնական աշխատանք №2 Խմորիչների և կաղապարների մորֆոլոգիայի մանրադիտակային հետազոտություն:

Աշխատանքի նպատակը : Ծանոթացեք սննդի արտադրության մեջ հայտնաբերված սնկերի և խմորիչների մորֆոլոգիական առանձնահատկություններին: Տիրապետել սնկերի և թթխմորների մանրադիտակային հետազոտության տեխնիկան «մանրացված կաթիլ» պատրաստուկներում։

Սարքավորումներ, նյութեր. Մանրադիտակ; մասնատող ասեղներ, ապակե սլայդներ և ծածկոցներ; ֆիլտր թուղթ; հոգու լամպ; սնկերի սեռերի մշակույթներըՄուկոր, Ասպերգիլուս, Պենիցիլիում, Ալտերնարիա; մաքուր խմորիչ մշակույթSaccharomycescerevisiae.

1. ՀԱՄԱՌՈՏ ՏԵՍԱԿԱՆ ԴՐՈՒՅԹՆԵՐ

1. 1. Մանրադիտակային սնկերի մորֆոլոգիան և մշակութային առանձնահատկությունները

Սնկերի վեգետատիվ մարմինը կոչվում էմիցելիում . Միցելիումը բաղկացած է բազմաթիվ միահյուսվող թելերից, որոնք կոչվում են խողովակներ:հիֆեր . Հիֆերի տրամագիծը տատանվում է 5-ից 50 մկմ: Կախված միցելիումի կառուցվածքից, սնկերը բաժանվում են բարձրագույն և ստորին: Բարձրագույն սնկերի մոտ հիֆերը բաժանված են միջնորմներով (միջնապատերով), որոնց կենտրոնում մեծ ծակոտի կա։ Նրանք աճում են և միևնույն ժամանակ տեղի են ունենում միջուկային բաժանումներ, բայց բջիջների բաժանումներ չեն լինում։ Այսպիսով, բորբոսի վեգետատիվ մարմինը մեկ մեծ բազմամիջուկ բջիջ է: Բոլոր մանրադիտակային սնկերը կարող են վեգետատիվ կերպով բազմանալ միկելիումի մի կտորով:

Անսեռ բազմացման ժամանակ ֆիկոմիցետներն առաջանում ենսպորանգիոֆորներ , իսկ ասկոմիցետներումկոնիդիոֆորներ .

Մանրադիտակային սնկերի մշակութային նշաններ

Մանրադիտակային սնկերի գաղութները մի քանի անգամ ավելի մեծ են, քան միաբջիջ օրգանիզմների գաղութները (բակտերիաներ, սնկեր) և հաճախ աճում են Պետրիի կերակրատեսակների սնուցող միջավայրի ողջ մակերեսով: Սնկերի գաղութների հետեւողականությունը տարբեր է. Ավելի հաճախ ձևավորվում են ֆետրամանման և կաշվե գաղութներ, ավելի քիչ՝ փխրուն։ Գաղութների մակերեսը կարող է լինել փափկամազ, ինչպես բամբակյա բուրդ, թավշյա, ալրային, սարդոստայնանման, թելիկ, կաշվե կամ հարթ: Խիտ և հեղուկ միջավայրի վրա աճելու ժամանակ հիֆերի մի մասը վերածվում է սննդարար միջավայրի՝ ձևավորելով.սուբստրատ միկելիում, իսկ հիֆերի մյուս մասը ձևավորվում էօդ միցելիումը՝ անզեն աչքով տեսանելի փափուկ ծածկույթի տեսքով։ Միցելիումը կարող է լինել նաև անգույն (սպիտակ, մոխրագույն) կամ գունավոր (սև, շագանակագույն, կանաչ, դեղին և այլն): Պիգմենտավորված է միայն պտղաբեր միցելիումը։

Մանրադիտակային սնկերի բնութագրերը տարբեր դասեր

Տարբեր դասերի սնկերի մորֆոլոգիական առանձնահատկությունները ներկայացված են նկ. 5.

ՍեռՄուկոր . Նրանք կարող են բազմանալ անսեռ և սեռական ճանապարհով՝ սպորանգիոֆորների ձևավորմամբ (նկ. 5): Դրսում սպորանգիումը ծածկված է կալցիումի օքսալատի բյուրեղների բարակ հասկերով։ Հասունության ժամանակ սպորանգիումը պատռվում է, սպորանգիայի սպորներն ազատվում են և տեղափոխվում օդային հոսանքներով։ Սպորանգիոֆորի վրա սպորանգիումը սպորներից ազատվելուց հետո մնում է սյունակ, իսկ դրա ստորին մասում՝ օձիք։ Մուկոր սնկերի միկելիումի գույնը սկզբում սպիտակ է, այնուհետև՝ մոխրագույն ձիթապտղի, տեսքը զգացվում է։.

Ա

բ

Վ

Գ

Բրինձ. 5Տարբեր դասերի սնկերի մորֆոլոգիական առանձնահատկությունները.

Ա - Մուկոր; բ - պենիցիլիում; Վ - Ասպերգիլուս; Գ - Ալտերնարիա

Մուկորի սնկերը աճում են թաց հացահատիկի, ածիկի, արմատային մշակաբույսերի մակերեսին, սննդամթերքի վրա, խոնավ սենյակների պատերին՝ մոխրագույն փափկամազ ծածկույթի տեսքով։Մուկորնիգրիկաններշաքարի ճակնդեղի սեղմիչ փտման հարուցիչն է։ Շատ լորձաթաղանթային սնկեր օգտագործվում են արդյունաբերության մեջ տարբեր օրգանական թթուների և ալկոհոլի (տեսակի սնկերի) արտադրության համարՄուկորjavanicus, Մուկորռասեմոսուս), ֆերմենտային պատրաստուկներ, կարոտինոիդներ, ստերոիդներ։

Սեռի ներկայացուցիչներԱսպերգիլուս Եվ Պենիցիլիում պատկանում են ասկոմիցետների դասին, որը միավորում է ամենաբարձր մանրադիտակային կատարյալ սնկերը: Սպորների օգտագործմամբ անսեռ բազմացման դեպքում այս սնկերը ձևավորում են կոնիդիոֆորներ (նկ. 5): Ասպերգիլուսը և պենիցիլիումը սնկեր են: Սա նշանակում է, որ սեռական բազմացման ժամանակ հատուկ պտղատու մարմինների վրա առաջանում են ասցիներ (տոպրակներ), որոնցում կա 8 ասկոսպոր։

ՍեռինՊենիցիլիում կազմում է բորբոս սնկերի մոտ կեսը: Նրանք լայնորեն տարածված են հողում, վատ օդափոխվող տարածքների օդում և առաջացնում են տարբեր ապրանքների և նյութերի վատթարացում։ Այս սունկն ունի ճյուղավորվող միջնապատային միցելիում (հիֆերի տրամագիծը՝ 2 ... 3 մկմ) և միջնապատ կոնիդիոֆորներ (խոզանակներ հիշեցնող), որոնք վերջում ճյուղավորվում են պրոցեսների՝ ստերիգմաների տեսքով։ Կոնիդիաները, որոնք բաղկացած են սպորների շղթաներից, հեռանում են դրանցից։ Կախված կոնիդիայի տեսակից՝ դրանք կարող են լինել տարբեր գույների (սպիտակ, կանաչ և այլն)։ Արդյունաբերության մեջ շատ պենիցիլիներ օգտագործվում են տարբեր արժեքավոր ապրանքներ ստանալու համար: Այս ցեղի մեկուսացված շտամներից 25%-ն ունի հակաբիոտիկ ակտիվություն, և այնպիսի տեսակներ, ինչպիսիք են.Պենիցիլիումnotatum, Պենիցիլիումքրիզոգենումօգտագործվում են որպես պենիցիլինի արտադրող: Պենիցիլիումի որոշ տեսակներ օգտագործվում են որպես ֆերմենտներ և լիպիդներ արտադրող: Ռոքֆոր և կամեմբեր փափուկ պանիրների արտադրության մեջ օգտագործվում են ազնիվ կաղապարներՊենիցիլիումռոկֆորտիԵվՊենիցիլիումկամամբերտի.

Սեռի սունկԱսպերգիլուս կան ավելի քան 200 տեսակ։ Այս սնկերն ունեն լավ զարգացած ճյուղավորվող միկելիում բազմաթիվ միջնապատերով: Կոնիդիոֆորները բաժանված չեն, դրանց վերին ծայրերը տանձաձև են կամ գնդաձև լայնացած՝ փոքր գլխի տեսքով։ Գլխին փորձև ստերիգմատաներ են՝ կոնիդիայի շղթաներով, որոնք հիշեցնում են ջրաղացից դուրս թափվող ջրի առվակներ։ Այստեղից էլ առաջացել է «արտահոսքի կաղապար» անվանումը (aspergereլատիներեն՝ ջրել, ցողել): Aspergillus conidia-ն հասունացման ժամանակ ձեռք է բերում տարբեր գույներ, ինչը, այլ հատկանիշների հետ մեկտեղ, որոշում է նրանց տեսակային պատկանելությունը։

Ինչպես նաև պենիցիլիները, սեռի ներկայացուցիչներԱսպերգիլուսլայնորեն տարածված բնության մեջ և կարևոր դերօրգանական նյութերի հանքայնացման մեջ։ Նրանք բազմաթիվ մթերքների մեջ բորբոս են առաջացնում: Այս սնկերը շատ արժեքավոր նյութեր արտադրող են և լայնորեն կիրառվում են արդյունաբերության մեջ։ Այսպիսով,ԱսպերգիլուսՆիգեր, օգտագործվում է արդյունաբերության մեջ կիտրոնաթթվի արտադրության համար;Ասպերգիլուսterreus- իտակոնիկ թթուԱսպերգիլուսflavusԵվԱսպերգիլուստերիկոլաձևավորել պրոտեոլիտիկ ֆերմենտների ամենաակտիվ համալիրը.ԱսպերգիլուսoryzaeԵվԱսպերգիլուսավամորիամիլոլիտիկ ֆերմենտների լավագույն արտադրողներն են։

Սեռի սունկԱլտերնարիա պատկանում են անկատար սնկերի դասին՝ դեյտերոմիցետներ։ Սրանք բարձրագույն սնկերն են: Նրանք ունեն միջնապատային միցելիում և կարճ ոչ միջնապատ կոնիդիոֆորներ, որոնց վրա գտնվում են տանձաձև կամ կիտրոնաձև բազմաբջիջ կոնիդներ (նկ. 5)։ Բորբոսը սև հոտի հարուցիչն է՝ արմատային մշակաբույսերի և պտուղների հիվանդություն, ինչպես նաև սննդամթերքի փչացման պատճառ:

Խմորիչի մորֆոլոգիան և դրանց բնութագրերը

Խմորիչ ավելի բարձր միաբջիջ սնկերն են։ Խմորիչներից շատերը պատկանում են սնկերի երկու դասի՝ ասկոմիցետների և դեյտերոմիցետների:

Թթվածնի հետ կապված խմորիչները բաժանվում են ֆակուլտատիվ անաէրոբների (աերոբ պայմաններում շնչում և ակտիվորեն կուտակում են կենսազանգվածը, իսկ անաէրոբ պայմաններում առաջացնում են ալկոհոլային խմորում) և աերոբների։

Մորֆոլոգիապես խմորիչները բազմազան են։ Նրանք միմյանցից տարբերվում են բջիջների չափերով և ձևով: Խմորիչ բջիջների չափերը, կախված տեսակից, տարբերվում են հետևյալ սահմաններում. 2,5-ից 10 մկմ լայնությամբ և 4-ից 20 մկմ երկարությամբ: Խմորիչի ձևերի մորֆոլոգիական բազմազանությունը ներկայացված է Նկ. 6.

Ա

բ

Վ

Գ

դ

ե

և

հ

Բրինձ. 6Խմորիչ բջիջների ձևերը `ա - ձվաձեւ ձվաձեւ;

բ - գլանաձեւ; գ - գագաթային; կիտրոնի ձևով; g - ավլված;

e - եռանկյուն; e - կիսալուսին; g - կոնաձև; h, i - myceloid

Խմորիչի բջիջների ձևն ու չափը կախված է տեսակից, տարիքից, սննդային միջավայրից և աճեցման եղանակից:

Կախված տեսակից՝ խմորիչը կարող է վեգետատիվ բազմանալ՝ բողբոջելով (այսպես է վերարտադրվում օվալաձև խմորիչը), երկուական տրոհում (բնորոշ գլանաձև կամ ձողաձև խմորիչի համար) կամ բողբոջային բաժանման միջոցով։ Բացի վեգետատիվ վերարտադրությունից, խմորիչ ասկոմիցետները կարող են սեռական ճանապարհով վերարտադրվել ասկոսպորների ձևավորմամբ:

Ասկոմիցետների դասին պատկանող խմորիչներից, մեծ նշանակությունունեն սեռի խմորիչ-սախարոմիցետներSaccharomyces , որը լայնորեն կիրառվում է սննդի արդյունաբերության մեջ։ Այս խմորիչների հիմնական կենսաքիմիական առանձնահատկությունն այն է, որ նրանք խմորում են շաքարները՝ առաջացնելով էթիլային սպիրտ և ածխաթթու գազ։ Արդյունաբերության մեջ օգտագործվող խմորիչը կոչվում էմշակութային խմորիչ. Այսպիսով, հացաթխման արդյունաբերության մեջ և ալկոհոլի արտադրության մեջ, սեռի խմորիչ ձիավարությունSaccharomycescerevisiae. Խմորիչի տեսակներSaccharomycesանչափահասկիրառություն է գտել տարեկանի հացի և կվասի արտադրության մեջ։ Խմորիչները օգտագործվում են գարեջրագործության մեջSaccharomycescarlsbergensis. Սախարոմիցետային խմորիչները օվալաձեւ են, բազմանում են վեգետատիվ՝ բողբոջելով, իսկ անբարենպաստ պայմաններում սեռական ճանապարհով բազմանում են ասկոսպորներով։

Որոշ սպորոգեն խմորիչներ ենվայրի խմորիչ . Այս խմորիչները, ինչպես կուլտուրականները, ունակ են ալկոհոլային խմորման, բայց բացի ալկոհոլից նրանք ձևավորում են բազմաթիվ ենթամթերքներ (օրինակ՝ ալդեհիդներ, բարձրագույն սպիրտներ, եթերներ և այլն) և, հետևաբար, վատթարացնում են արտադրանքի օրգանոլեպտիկ բնութագրերը։ Այս խմորիչները վնասատուներ են տարբեր ըմպելիքների (գարեջուր, գինի, զովացուցիչ ըմպելիքներ) արտադրության մեջ, ինչպես նաև բազմաթիվ սննդամթերքներում փչացնող նյութեր:

Խմորիչ - դեյտերոմիցետները կարող են միայն վեգետատիվ կերպով բազմանալ: Այս խմորիչներից մի քանիսը (օրինակ՝ սեռի խմորիչներըCandida) օգտագործվում են արդյունաբերության մեջ կերային սպիտակուցներ, օրգանական թթուներ, վիտամիններ և մանրէների սինթեզի այլ արտադրանքներ ստանալու համար։ Խմորիչի տեսակներՏորուլոպսիսկեֆիրմտնում են սիմբիոտիկ թթխմորի՝ կեֆիրի սնկերի մեջ: Մյուս անկատար (ասպորոգեն) խմորիչները վայրի խմորիչներ են և շատ մթերքներում փչանում են: Արտադրության խմորիչ վնասատուները ներառում են խմորիչի սեռերըՊիչիա, Հանսենուլա, CandidaՌոդոտորուլա,Տորուլա, Տորուլոպսիս, Միկոդերմա, ՏրիխոսպորոնԱսպորոգեն խմորիչներից կանկեղծ խմորիչ , որոնք ձևավորում են պսևդոմիցելիում և աճում հեղուկ սուբստրատների վրա թաղանթների տեսքով։

1. ԱՇԽԱՏԱՆՔԱՅԻՆ ԿԱՐԳԸ

Ջրի մեծ կաթիլը խողովակով կամ պիպետտով կիրառվում է ապակե սլայդի վրա;

Փորձանոթից կամ Պետրիի ափսեից վերցվում է միկելիումի փոքր քանակություն՝ պահպանելով ասեպսիայի կանոնները.

Միկելիումը զգուշորեն տեղադրվում է ապակե սլայդի վրա քսած կաթիլում և երկու ասեղների օգնությամբ այն ուղղում ջրի մեջ;

Նախապատրաստումը ծածկված է ծածկոցով և թույլ սեղմված ներքև: Ավելորդ ջուրը հանվում է ֆիլտրի թղթով։

«Փշրված կաթիլ» պատրաստուկը նախ մանրադիտակով մանրադիտակ են անում x8 ոսպնյակով, այնուհետև x40 մութ տեսադաշտում (կոնդենսատորն իջեցված է, ծիածանաթաղանթի կափարիչը ծածկված է):

Սնկային պատրաստուկների ընտրության և մանրադիտակի ուսումնասիրման ժամանակ հաշվի են առնվում հետևյալ առաջարկությունները.

ա) բորբոս Մուկոր . Ընտրվում է սև-մոխրագույն փափուկ օդային միկելիում: Մանրադիտակի տակ ուշադրություն է դարձվում սպորով լցված սպորանգիաներով և սյունակներով գիֆերին, որոնք ձևավորվում են սպորանգիումի ազատման ժամանակ;

բ) ցեղի սունկ Ասպերգիլուս . Ընտրվում է մի փոքր փափկամազ միկելիում գունավոր կոնիդիաներով՝ մի փոքր խորանալով ասեղով սննդարար միջավայրի մեջ։ Ուշադրություն դարձրեք չծածկված կոնիդիոֆորներին;

գ) ցեղի սունկ Պենիցիլիում . Ընտրելիս փորձում են երիտասարդ միկելիում վերցնել (գունավոր և սպիտակ միցելիումի սահմանին)՝ ասեղով խորանալով միջավայրի մեջ։ Ուշադրություն դարձրեք խոզանակներով բաժանվող հիֆերին:

դ) սեռի սունկ Ալտերնարիա . Նրանք վերցնում են միկելիումը սև հատվածներում՝ ասեղներով խորանալով դրա մեջ։ Ուշադրություն դարձրեք միջնապատային միցելիումին, վատ զարգացած կոնիդիոֆորներին և խոշոր կոնիդիաներին, որոնք նման են «կիտրոնի նռան» նմանվող կլորացված կամ սրածայր բազմաբջիջ գոյացությունների։

Խմորիչի ուսումնասիրության մեջ խմորիչի կախոցը կիրառվում է ապակե սլայդի վրա, ծածկված ծածկոցով, ավելորդ ջուրը հանվում է ֆիլտր թղթով: Նմուշը մանրադիտակով մշակված է x8 և x40 ոսպնյակով:

Հետազոտության արդյունքների գրանցում և վերլուծություն

Համառոտ ներկայացրեք տեսական նյութը: Նկարվում են սնկերի և խմորիչների ուսումնասիրված կուլտուրաների մանրադիտակային պատկերները՝ հաշվի առնելով յուրաքանչյուր միկրոօրգանիզմի մորֆոլոգիական առանձնահատկությունները։ Յուրաքանչյուր գործչի տակ ստորագրված է լատինական անվանումը և պատրաստման ավելացումը։ Նկարագրե՛ք ուսումնասիրված սնկերի մշակութային հատկությունները:

Պատասխանել Վերահսկիչ հարցեր

Ինչպե՞ս են պատրաստվում մանրադիտակային սնկերի և խմորիչի պատրաստուկները:

Նկարագրեք մանրադիտակային սնկերի մորֆոլոգիական և մշակութային հատկությունները:

Ի՞նչ սնկեր են օգտագործվում արդյունաբերության մեջ օրգանական թթուներ, ֆերմենտներ, հակաբիոտիկներ և այլ արժեքավոր ապրանքներ ստանալու համար:

Նկարագրեք խմորիչի մորֆոլոգիական հատկությունները:

Ինչ է մշակութային խմորիչը: Սննդի արդյունաբերության ո՞ր ոլորտներում են դրանք օգտագործվում:

Առաջադրանքը կատարելու պայմանները

Կենսաբանության դաս

2. Առաջադրանքի կատարման առավելագույն ժամանակը` 90 րոպե

Գործնական աշխատանք թիվ 3. Բակտերիաների, խմորիչի, սնկերի բջիջների կառուցվածքի սխեմաներ.

Աշխատանքի նպատակը. Ուսումնասիրեք բջջի կառուցվածքըբակտերիաներ, խմորիչ, սնկեր

Նյութական աջակցություն. պրակտիկ աշխատանքի հրահանգչական քարտեր, դասագիրք, մատիտներ

Վարժություն 1

Ուսումնասիրեք դասագրքի նյութը: Ուսումնասիրության արդյունքների համաձայն.

Նոթատետրում նկարեք բակտերիաների, խմորիչի և սնկերի բջջի կառուցվածքը և նշեք Հատկություններ

Գրավոր պատասխանեք հետևյալ հարցերին.

1. Ի՞նչ ձև ունեն բակտերիալ բջիջները:

2. Որո՞նք են բակտերիաների չափերը:

3. Ինչպե՞ս է տեղի ունենում բակտերիաների բազմացումը, բազմացման արագությունը:

4. Ինչպե՞ս և ի՞նչ պայմաններում է առաջանում սպորի ձևավորումը բակտերիաների մոտ:

5. Արդյո՞ք բակտերիաները կարող են ինքնուրույն շարժվել:

Ձեր աշխատանքի արդյունքների հիման վրա եզրակացություն արեք.

Առաջադրանքը կատարելու պայմանները

1. Առաջադրանքի տեղը (ժամանակը):

Կենսաբանության դաս

2. Առաջադրանքի կատարման առավելագույն ժամանակը` 90 րոպե

Գործնական աշխատանք թիվ 4 թեմայի շուրջ Աշխատանք կարգավորող և տեխնիկական փաստաթղթերի հետ՝ SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ

Աշխատանքի նպատակը. Ուսումնասիրել ձեռնարկությունների սարքավորման և սպասարկման սանիտարական պահանջները Քեյթրինգ

Նյութական աջակցություն. գործնական աշխատանքի հրահանգչական քարտեր, SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ

Վարժություն 1

Ուսումնասիրեք դասագրքի նյութը: SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ. Ուսումնասիրության արդյունքների համաձայն.

1. Ավելացրե՛ք արտահայտությունները. պետք է լինի այն վայրը, որտեղ կառուցված է սննդի կազմակերպությունը

Արտադրական օբյեկտները ներառում են.

Պահեստները նախագծված են շենքի ____________________ մասում:

Խմելու ջուրորակը պետք է համապատասխանի

Օդափոխումը օգտագործվում է օդը մաքրելու համար

Տիպ.

Բոլոր արտադրական տարածքները պետք է լուսավորված լինեն

Լույս.

Ամսական տնային տնտեսությունը կոչվում է

2. Սահմանի՛ր հետևյալ տերմինները.

Ախտահանումը...

Դերատիզացիան է -

Դեզինսեկցիան է...

3. Օգտագործելով ուսումնական նյութը՝ լրացրեք աղյուսակը.

բանջարեղենի խանութ

մսագործ խանութ

Ձկան խանութ

Թեժ խանութ

սառը խանութ

Հրուշակեղենի խանութ

Ձեռնարկ

Առաջադրանքը կատարելու պայմանները

1. Առաջադրանքի տեղը (ժամանակը):

Կենսաբանության դաս

2. Առաջադրանքի կատարման առավելագույն ժամանակը` 90 րոպե

Գործնական աշխատանք թիվ 5 Կարգավորող և տեխնիկական փաստաթղթերի հետ աշխատելը. SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ

Աշխատանքի նպատակը Ուսումնասիրել սարքավորումների, գույքագրման, սպասքի, տարաների սանիտարական պահանջները: Սննդամթերքի տեղափոխում և պահպանում.

նյութական աջակցություն ուսուցողական քարտեր գործնական աշխատանքի համար, SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ

Վարժություն 1

Կուսումնասիրի դասագրքի նյութը՝ SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ. Ուսումնասիրության արդյունքների համաձայն.

1. Գրավոր պատասխանեք հետևյալ հարցերին.

Ինչ վերաբերում է խոհանոցային պարագաներին:

Ինչու՞ պիտակավորել ուտեստները:

Ի՞նչ կասեք սպասքի մասին։

Ինչ նյութեր են թույլատրվում սարքավորումների և գույքագրման արտադրության համար

հանրային սննդի օբյեկտների համար.

Ո՞րն է հիմնական տարբերությունը սպասքի և դանակների լվացման միջև:

2. Թվարկե՛ք կանոններն ու պահանջները.

2.1. Կիսաֆաբրիկատների տեղափոխման սանիտարական կանոններ.

2.2. Սննդի պահպանման սանիտարական կանոններ.

3. Ավելացրեք արտահայտություններ.

Նախքան բաշխումը, պատրաստի ուտեստների որակը պետք է

Մատուցելիս առաջին ուտեստներն ու տաք ըմպելիքները պետք է լինեն ջերմաստիճանի

_______ °С, հիմնական ուտեստների և կողմնակի ճաշատեսակների ջերմաստիճանը ______ °С, բաժանված ուտեստներ

ջերմաստիճանը ______ °С, սառը ուտեստներ և խմիչքներ ______ °С:

Բժշկական և կանխարգելիչ և մանկական հաստատություններում ձմեռ-գարուն ժամանակահատվածում բանջարեղենային կերակրատեսակների պակասի պատճառով _______________________________-ով պահանջվում է որոշ ուտեստներ հարստացնել դրանով։

________________ պատասխանատվություն է կրում պատրաստի արտադրանքի որակի և սննդի հաստատություններում դրա թողարկման կանոնների պահպանման համար:

Առաջադրանքը կատարելու պայմանները

1. Առաջադրանքի տեղը (ժամանակը):

Կենսաբանության դաս

2. Առաջադրանքի կատարման առավելագույն ժամանակը` 90 րոպե

Գործնական աշխատանք թիվ 6 Ախտահանիչ լուծույթների պատրաստման և պահպանման սխեմաներ

Թիրախ: ուսումնասիրել ախտահանիչների անվանումը, ախտահանիչ լուծույթների պատրաստման եղանակները՝ կախված նպատակից. Պատրաստել տրված կոնցենտրացիայի լուծույթ։

նյութական աջակցություն ուսուցողական քարտեր գործնական աշխատանքի համար, SanPiN 2.3.6. 1079-01, դասագիրք

Վարժություն 1

Կուսումնասիրի ուսումնական գրականության նյութը՝ SanPiN 2.3.6. 1079-01 թթ. Ուսումնասիրության արդյունքների համաձայն.

1. Պատասխանեք հարցերին.

Ինչ լուծումներ են ախտահանիչները:

Ո՞րն է ախտահանիչ միջոցների նպատակը:

Ինչ դեղեր են օգտագործվում որպես ախտահանիչ:

Ինչպե՞ս ճանաչել, որ սպասքը մշակվել է ախտահանող միջոցներով:

2. Ուսումնասիրել ախտահանիչների պատրաստման սխեմաները և նպատակը: Լրացրե՛ք աղյուսակը.

3. Պատրաստել քլորամինի B 0,2% լուծույթի 1 լիտր:

4. Աշխատանքի արդյունքների հիման վրա եզրակացություն անել.

Առաջադրանքը կատարելու պայմանները

1. Առաջադրանքի տեղը (ժամանակը):

Կենսաբանության դաս

2. Առաջադրանքի կատարման առավելագույն ժամանակը` 90 րոպե

Գործնական աշխատանքի իրականացման գնահատման չափանիշներ.
Տրվում է «5» միավոր, եթե :
1. Correct-ը ինքնուրույն որոշում է այդ աշխատանքների նպատակը. կատարում է աշխատանքն ամբողջությամբ՝ կատարման անհրաժեշտ հաջորդականությամբ.
2. ինքնուրույն, ռացիոնալ ընտրում և պատրաստում է աշխատանքի կատարման համար անհրաժեշտ սարքավորումները. իրականացնում է այդ աշխատանքները առավել ճշգրիտ արդյունքներ ապահովող պայմաններում։
3. Գրագետ, տրամաբանորեն նկարագրում է աշխատանքի ընթացքը, ճիշտ է ձևակերպում եզրակացությունները. ճշգրիտ և ճշգրիտ կատարում է բոլոր գրառումները, աղյուսակները, գծագրերը, գծագրերը, գրաֆիկները, հաշվարկները:
4. Ցույց է տալիս կազմակերպչական և աշխատանքային հմտություններ՝ պահպանում է մաքուր աշխատավայրը, սեղանին կարգուկանոնը, տնտեսապես օգտագործում է նյութերը. աշխատանքը կատարելիս համապատասխանում է անվտանգության կանոններին.
Տրվում է «4» միավոր, եթե :
1. Արդյունքները «5-ով» գնահատելիս կատարում է լաբորատոր աշխատանք՝ պահանջներին լիովին համապատասխան, սակայն թույլ է տալիս երկուից երեք թերություն կամ մեկ աննշան սխալ և մեկ թերություն՝ հաշվարկներում, չափումներում։
2. Աշխատանքը կազմելիս թույլ է տալիս անճշտություններ գործողության ընթացքի նկարագրության մեջ. ընդհանրացնելիս թերի եզրակացություններ է անում.
Տրվում է «3» միավոր, եթե :
1.1 Ճիշտ է կատարում աշխատանքը առնվազն 50% -ով, այնուամենայնիվ, ավարտված մասի ծավալն այնպիսին է, որ թույլ է տալիս ստանալ ճիշտ արդյունքներ և եզրակացություններ անել հիմնական, հիմնարարի վերաբերյալ: կարևոր առաջադրանքներաշխատանքը։
2. Ընտրում է սարքավորումներ, նյութ, սկսում է աշխատանքը ուսուցչի օգնությամբ; կամ չափումների, հաշվարկների, դիտարկումների ընթացքում սխալներ է թույլ տալիս, ոչ ճշգրիտ ձևակերպում եզրակացություններ, ընդհանրացումներ։
3. Իրականացնում է աշխատանք իռացիոնալ պայմաններում, ինչը հանգեցնում է մեծ սխալներով արդյունքների. կամ հաշվետվության մեջ թույլ է տալիս ընդհանուր առմամբ ոչ ավելի, քան երկու սխալ (թվերի գրանցման, չափման արդյունքների, հաշվարկների, գրաֆիկների, աղյուսակների, դիագրամների կազմման և այլն), որոնք հիմնարար նշանակություն չունեն այս աշխատանքի համար, բայց ազդել են արդյունքի վրա: կատարումը։
4. Աշխատանքի ընթացքում թույլ է տալիս կոպիտ սխալ՝ բացատրության, դիզայնի, անվտանգության կանոնների պահպանման հարցում, որոնք աշակերտը ուղղում է ուսուցչի խնդրանքով։
«2» միավոր է տրվում, եթե :
1. Ինքնուրույն չի որոշում աշխատանքի նպատակը, չի կարող պատրաստել համապատասխան սարքավորումներ առանց ուսուցչի օգնության. աշխատանքը կատարում է թերի, իսկ ավարտված մասի ծավալը թույլ չի տալիս ճիշտ եզրակացություններ անել.
2. Աշխատանքի ընթացքում թույլ է տալիս երկու կամ ավելի կոպիտ սխալներ, որոնք հնարավոր չէ ուղղել ուսուցչի պահանջով. կամ սխալ է անում չափումներ, հաշվարկներ, դիտարկումներ։

ԴԻՄՈՒՄ.

Հավելված 1

ՈՒՍԱՆՈՂԻ ՀԻՇԵՑՈՒՄ

Աշխատանքը կատարելիս ուսանողը պետք է.

Նախապես մանրամասն ծանոթանալ տեսական նյութին և լավ հասկանալ մանրէաբանական օրինաչափությունները և գործընթացները, որոնք պետք է ուսումնասիրվեն գործնականում:

Փորձարկում կատարելիս պահպանել բոլոր նախազգուշական միջոցները, գործողությունների հաջորդականությունը՝ կատարելով անհրաժեշտ դիտարկումները։

Փորձի արդյունքները գրեք նոթատետրում՝ ըստ աշխատանքում առաջարկված սխեմայի.

Աշխատանքն ավարտելուց հետո կարգի բերեք աշխատավայրև հանձնել լաբորանտին կամ ուսուցչին:

Մոսկվայի քաղաքի կրթության վարչություն

Թիվ 28 տեխնոլոգիական քոլեջ

Ժուկովա Լ.Ա.

ՄԵԹՈԴԱԿԱՆ ՑՈՒՑՈՒՄՆԵՐ

Դեպի լաբորատոր աշխատանք №№1-4

ՀԿ ուսանողների համար

Մոսկվա

2012

«Մանրէաբանության, սանիտարական և հիգիենայի հիմունքներ»

ՄԵԹՈԴԱԿԱՆ ՑՈՒՑՈՒՄՆԵՐ

№№1-4 լաբորատոր աշխատանքներին

ՀԿ ուսանողների համար

34.17 Երշիկեղենի արտադրության գործընթացների օպերատոր.

_______________________________________________________________

Ուղեցույցը նախատեսված է քոլեջի ուսանողների համար։ Կարող է օգտագործվել ինքնուրույն ուսումնասիրությունսովորել սեանսներ և արտադպրոցական ինքնուրույն աշխատանք:

Կազմող՝ Ժուկովա Լ.Ա. - հատուկ առարկաների ուսուցիչ

Գրախոս. Սուխանովա Ն.Վ. - հատուկ առարկաների ուսուցիչ

Խմբագիր՝ Մալկովա Լ.Ա. - փոխտնօրեն ուսումնամեթոդական աշխատանքների գծով

Ձեռագիրը վերանայվել և քննարկվել է Տեխնոլոգիական կարգապահության կենտրոնական կոմիտեի նիստում, արձանագրության թիվ __ __ _______ 2012 թ.

Բացատրական Ծանոթություն

Ուղեցույցները մշակվել են Մոսկվայի թիվ 28 տեխնոլոգիական քոլեջի պետական ​​ինքնավար ուսումնական հաստատության կողմից ընդունված մանրէաբանության դասընթացի ընթացիկ ծրագրին համապատասխան՝ 260301 «Մսի և մսամթերքի տեխնոլոգիա» մասնագիտությամբ սովորող ուսանողների համար։

Զարգացման ներկա մակարդակով բնական գիտություններՊահանջվում է մանրէաբանական գործընթացների խորը գիտելիքներ, որոնք ընկած են բազմաթիվ կենսատեխնոլոգիական արտադրությունների հիմքում և ծառայում են որպես մարդածին ազդեցությունից շրջակա միջավայրի պաշտպանության երաշխիք:

Բացի մանրէաբանության տեսական գիտելիքներ ձեռք բերելուց, ապագա մասնագետներին անհրաժեշտ են լաբորատոր և գործնական պարապմունքներ, որոնք, ըստ էության, փոքր հետազոտական ​​նախագծեր են։

Լաբորատոր աշխատանքի իրականացումն ապահովում է ուսանողների տեսական գիտելիքների համախմբումը, մանրէաբանական հսկողության հմտությունների զարգացումը և ինքնուրույն եզրակացություններ և ընդհանրացումներ անելու կարողությունը:

Լաբորատոր աշխատանքների կատարման այս ուղեցույցները առաջարկում են.

համատեղել լաբորատոր աշխատանքը նույն թեմայով կամ ունենալով նույն իմաստային բովանդակությունը, որպեսզի հարմար լինի դրանք ժամանակին կազմակերպել, ինչպես պահանջվում է մանրէաբանական վերլուծությունների առանձնահատկություններով.

բաշխել դասերը, որպեսզի վերջին դասի ծանրաբեռնվածությունը հնարավորություն տա քննարկել վերլուծության արդյունքները, կատարել թեստ կատարված աշխատանքի վերաբերյալ.

կենտրոնացնել ամենակարևոր ուսումնական նյութը՝ ուսանողներին հնարավորություն տալով յուրացնել մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատելու գործնական հմտությունները՝ առանց ավելորդ ծանրաբեռնվածության.

տալ վերլուծության անցկացման մեթոդաբանություն՝ նշելով մեթոդի էությունը, իրականացման տեխնիկան, արդյունքների մշակման կանոնները.

օգտագործել մանրէաբանական վերլուծության այն մեթոդները, որոնք տրամադրվում են ԳՕՍՏ-ի կողմից:

Աշխատանքի թեման և նպատակը.

Լաբորատոր աշխատանքների համար նյութական աջակցություն.

Լաբորատոր աշխատանքների կատարման առաջարկություններ, առաջադրանք, աշխատանքի բացատրություն, վերլուծության մեթոդներ, հաշվետվության կազմման ձևեր, լաբորատոր հարցերի հսկիչ հարցեր և լրացուցիչ գրականություն:

Որոշ մեթոդների բարդության և միկրոօրգանիզմների աճի տևողության պատճառով որոշ դեպքերում լաբորատոր նյութի մի մասը նախօրոք պատրաստվում է ուսուցչի կողմից, սակայն տրված է դրա պատրաստման եղանակը։

Լաբորատոր դասընթացներում ձեռք բերված հմտություններն անհրաժեշտ են արտադրության մանրէաբանական հսկողություն իրականացնելու համար, որի նպատակն է ժամանակին բացահայտել արտադրության և սարքավորումների սանիտարական վիճակի խախտումները, հայտնաբերել մանրէաբանական աղտոտման վայրերն ու ուղիները, ձեռնարկել անհրաժեշտ միջոցներ՝ վերացնելու այդ վտանգավոր օջախները։ և հասնել բարձր արդյունքի, որակի:

ԱՇԽԱՏԱՆՔԻ ԿԱՆՈՆՆԵՐԸ ՄԱՆՐԵՍԱԿԱՆ ԼԱԲՈՐԱՏՈՐԻԱՅՈՒՄ

Մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատելը պահանջում է հատուկ կանոնների խստիվ պահպանում, որը որոշվում է երկու հիմնական դրույթներով.

Նախ, մանրէաբանական պրակտիկայում հիմնականում օգտագործվում են միկրոօրգանիզմների մաքուր կուլտուրաներ, այսինքն՝ նույն տեսակի միկրոօրգանիզմների պոպուլյացիաներ, հաճախ մեկ բջջի սերունդ:

Քանի որ օդում, մեզ շրջապատող առարկաների մակերեսին, հագուստի, ձեռքերի, մազերի վրա միշտ մեծ քանակությամբ տարբեր միկրոֆլորա կա՝ ուսումնասիրությունների ստերիլությունն ապահովելու և մշակույթների աղտոտումից խուսափելու համար, աշխատանքները պետք է կատարվեն համապատասխան. ասեպտիկ կանոններով.

Երկրորդ, չբացահայտված միկրոօրգանիզմների հետ ուսումնասիրություններում, երբ դրանք հայտնաբերվում են շրջակա միջավայրի օբյեկտներից և տեխնածին հոսքերից, կարող են մեկուսացվել պաթոգեն և պայմանականորեն պաթոգեն միկրոօրգանիզմները:

Բացի այդ, ինչպես սապրոֆիտ, այնպես էլ պաթոգեն միկրոօրգանիզմների բջիջները կարող են ալերգեն լինել որոշ անհատների համար: Այսպիսով, հետազոտության հուսալի արդյունքներ ստանալու, անձնական և այլոց անվտանգությունն ապահովելու համար պետք է պահպանվեն որոշակի կանոններ:

Միկրոօրգանիզմների վերացանման ժամանակ ստերիլություն է ձեռք բերվում այն ​​պատճառով, որ բոլոր աշխատանքները կատարվում ենբոցի մոտ այրիչներ. Մանրէաբանական օղակները, որոնք օգտագործվում են պինդ միջավայրից միկրոօրգանիզմների տեղափոխման համար, բոցավառվում են այրիչի կրակի մեջ, իսկ ապակյա իրերը և սննդանյութերը նախապես մանրէազերծվում են համապատասխանաբար չորացման պահարաններում և ավտոկլավներում:

Սեղանի մակերեսը ախտահանվում է ինչպես աշխատանքից առաջ, այնպես էլ հետո՝ սրբելով քլորամինի, լիզոլի 3%-անոց լուծույթով կամ իզոպրոպիլային կամ էթիլային սպիրտի 70%-անոց լուծույթով։ Այս սպիրտների լուծույթները կարող են օգտագործվել նաև ձեռքերի ախտահանման համար։

Տարածքի պատրաստումը ներառում է թաց մաքրում և մանրակրկիտ օդափոխություն, որին հաջորդում է մանրէասպան լամպերի ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումը: Կախված օդի աղտոտվածության աստիճանից, դրա ստերիլիզացման համար անհրաժեշտ է ճառագայթում 30 րոպեից մինչև մի քանի ժամ։ Ուլտրամանուշակագույն ճառագայթները վտանգավոր են աչքերի համար, հետևաբար, երբ մանրէասպան լամպը միացված է, անհնար է սենյակում գտնվել։

Մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատելիս ուսանողները պետք է պահպանեն հետևյալ կանոնները.

1. Յուրաքանչյուր ուսանող պետք է աշխատի մշտական ​​վայրում:
2. Աշխատավայրը պետք է զերծ լինի օտար առարկաներից (ներառյալ պայուսակները և պայուսակները): Այրիչի հետ աշխատելիս սեղանին չպետք է լինեն նաև նոթատետրեր, որոնք հետագայում անհրաժեշտ կլինեն մանրադիտակի և էսքիզային պատրաստման համար։
3. Ամբողջ աշխատանքը կատարվում է մաքուր զգեստով։ Երկար մազերը պետք է կապվեն, որպեսզի դրանք չբռնվեն տաքացնող բարձիկի կրակի մեջ:
4. Միկրոօրգանիզմների մշակման համար օգտագործվող անոթները (փորձանոթներ, կոլբայներ, Պետրի ամաններ, ներքնակներ) պետք է մակագրված լինեն կուլտուրայի ընդհանուր և հատուկ անվանումով, պատվաստման տարեթիվով, ուսանողի անուն-ազգանունով և խմբի համարով:
5. Կենդանի կուլտուրաների հետ աշխատելիս օգտագործվող բոլոր իրերը պետք է ախտահանվեն կամ այրելով այրիչի կրակի մեջ կամ ընկղմվեն ախտահանիչ լուծույթի մեջ (առարկա և ծածկոցներ, պիպետներ, սպաթուլաներ):
6. Բոլոր պատվաստված փորձանոթները, գավաթները կամ տափաշիշները տեղադրվում են թերմոստատի մեջ կամ հանձնվում լաբորանտին:
7. Թափոնները տեղադրվում են որոշակի տարաներում՝ դրանց հետագա ախտահանման համար։
8. Ծխելն ու ուտելը լաբորատոր պայմաններում խստիվ արգելված են։
9. Դասի ավարտին յուրաքանչյուր աշակերտ պետք է կարգի բերի աշխատավայրը:

Ստացված տվյալները պետք է գրանցվեն ամսագրում լաբորատոր աշխատանքի համար: Գրառումները պետք է պարունակեն աշխատանքի համարը և վերնագիրը, դրա մեկնարկի և ավարտի ամսաթիվը, հետազոտության օբյեկտների անվանումները, փորձերի անցկացման պայմանները, վերլուծության մեթոդները, ինչպես նաև դրանցից ստացված արդյունքներն ու եզրակացությունները: Մշակույթների մորֆոլոգիան ուսումնասիրելիս դրանց էսքիզները կատարվում են մանրադիտակի որոշակի մեծացումներով։ (Գունավոր մատիտները, առնվազն կարմիր և կապույտ, պետք է հասանելի լինեն դասարանում:) Թվային տվյալները ամփոփվում են աղյուսակներում, գծապատկերներում կամ գծապատկերներում:

ԼԱԲ #1

Մանրէաբանական լաբորատորիայի կազմակերպում և սարքավորում. Օպտիկական մանրադիտակի սարքը և դրա հետ աշխատելու կանոնները. Մանրէների մանրադիտակի տեխնոլոգիայի յուրացում.

Դասի նպատակը.

Սովորողներին ծանոթացնել մանրէաբանական լաբորատորիայի կազմակերպմանն ու սարքավորումներին. Ուսումնասիրել օպտիկական մանրադիտակի սարքը: Ծանոթացեք բակտերիաների հիմնական ձևերին:

Նյութական աջակցություն.

Ուսումնական մանրէաբանական լաբորատորիա՝ հագեցած թերմոստատներով, ստերիլիզատորներով, սառնարաններով, ջրային բաղնիքներով, թորիչով, մանրէասպան լամպերով, աշխատանքային սեղաններ բոլոր անհրաժեշտ պարագաներով, մանրադիտակներով։

Այս լաբորատորիան պարունակում է զգալի քանակությամբ ուսումնական նյութՈւստի ցանկալի է ուսանողներին ծանոթացնել լաբորատորիայի կազմակերպմանն ու սարքավորումներին ցուցադրական մեթոդով:

Մանրադիտակի սարքն ուսումնասիրելիս օգտագործեք դրա բոլոր մանրամասները ցուցադրող պաստառ:

Առաջադրանքներ.

1. Կարդացեք աշխատանքի նկարագրությունը.

1. Ուսումնական մանրէաբանական լաբորատորիայի սարքավորումներ.
2. Սարքավորումներ և արտադրության կազմակերպում

1. Մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատանքի կանոններ.
2. Օպտիկական մանրադիտակի սարքը և դրա խնամքը.

MBR-1 մանրադիտակով աշխատելու կանոններ.

1. Բակտերիաների հիմնական ձևերը.

1. Պատրաստի պատրաստուկների մանրադիտակ անցկացնել հիմնական ձևերով

բակտերիաներ.

Բացատրություն աշխատանքի համար

1.1 Ուսումնական մանրէաբանական լաբորատորիայի սարքավորումներ.

Ուսումնական մանրէաբանական լաբորատորիայի տարածքը պետք է բաղկացած լինի ուսումնական, տեխնիկական սենյակներից և ուսուցչական սենյակից:

Ուսումնական սենյակը պետք է ունենա հետևյալ գույքագրումը` լաբորատոր սեղաններ, միկրոսկոպիայի սեղաններ, ուսուցչի համար նախատեսված սեղան, թերմոստատներ, աթոռակներ, դարակ` տիտրացված լուծույթներով, կշեռք, գրատախտակ, սպասքի սեղան, լվացարան:

Վերապատրաստման դասընթացների համար կարելի է օգտագործել սովորական լաբորատոր սեղան:

Մանրադիտակի սեղանը պետք է տեղադրվի պատուհանի դիմաց. դրա բարձրությունը պետք է լինի մոտ 80 սմ, լայնությունը՝ մոտ 40 սմ: Ավելի մեծ կայունության համար մանրադիտակի սեղանը դասավորված է փակագծերի վրա:

Թերմոստատներ. Մանրէները պետք է աճեցվեն այնպիսի պայմաններում, որ շրջակա օդի ջերմաստիճանը ենթարկվի թերևս նվազագույն տատանումների։ Դրա համար օգտագործվում են թերմոստատներ, որոնք պահարաններ են, որոնցում պահպանվում է մշտական ​​ջերմաստիճան։

Առկա են օդի և ջրի թերմոստատներ։

Օդային թերմոստատները ջեռուցվում են տաք օդով, սովորաբար ջեռուցվում են էլեկտրական ցնցում.

Կրկնակի պատերի միջև գտնվող ջրի թերմոստատներում կա ջուր, որը ջեռուցվում է էլեկտրական հոսանքի, գազի կամ ջերմության այլ աղբյուրների միջոցով: Ջերմաստիճանի տատանումները այս թերմոստատներում ավելի քիչ են, քան օդայիններում:

Լաբորատորիայում պետք է լինի առնվազն երեք թերմոստատ՝ մեկի ջերմաստիճանը 30°C է, երկրորդը՝ 37°C, իսկ երրորդի ջերմաստիճանը 43°C է։ Մանրէները, որոնք լավ են աճում 20°C-ում, կարող են աճել սենյակային ջերմաստիճանում:

Թերմոստատներում մշտական ​​ջերմաստիճանը պահպանվում է հատուկ սարքերի՝ թերմոստատների միջոցով: Ճշգրիտ ջերմաստիճանի կարգավորիչով թերմոստատում ջերմաստիճանի տատանումները չպետք է գերազանցեն 2 ° C:

Ավտոկլավ կամ ստերիլիզատոր:Ավտոկլավը մետաղյա գլան է՝ կրկնակի պատերով և զանգվածային կափարիչով, որը փակված է պտուտակային սեղմիչներով։

Մխոցի վրա դրված է մետաղյա պատյան։ Ավտոկլավը հագեցած է գոլորշու ելքի խողովակով, մանոմետրով, անվտանգության փականով և ջրաչափի ապակիով: Այն մանրէազերծում է սննդարար միջավայրերը, տարբեր հեղուկներ և սպասք:

Մանրէազերծումից առաջ թորած կամ եռացրած ջուրը լցվում է ավտոկլավի մեջ ջրաչափի ապակու ձագարի միջով (երբ հում ջուրն օգտագործվում է, թեփուկներն արագ են գոյանում) մինչև ավտոկլավի պատյանում նշված գիծը։ Դրանից հետո ավտոկլավը բարձում են մանրէազերծման ենթակա նյութով (վերջինս պետք է վերևից թղթով ծածկվի), կափարիչը պինդ պտտվում է, բացվում է գոլորշու խողովակի փականը և սկսվում է տաքացումը։

Ջեռուցումն իրականացվում է էլեկտրաէներգիայի, գոլորշու (այս դեպքում ջուրը չի լցվում ավտոկլավի մեջ) կամ մի քանի գազի այրիչներով։ Երբ ավտոկլավը տաքանում է, սկզբում օդը սկսում է դուրս գալ, իսկ հետո գոլորշին, որը մտնում է ավտոկլավ բալոնի վերին մասի անցքերից: Երբ գոլորշին սկսում է անընդհատ հոսքով դուրս գալ, այն բաց է թողնվում ևս 2-3 րոպե, որպեսզի օդը դուրս գա ավտոկլավից, իսկ հետո փականը փակվում է: Արդյունքում գոլորշու ելքը դադարում է և աստիճանաբար ճնշումը ավտոկլավում սկսում է մեծանալ (ճնշաչափի ասեղի բարձրացում):

Պահանջվող ճնշումը հաստատելուց հետո ավտոկլավի տաքացման աստիճանը կրճատվում է, որպեսզի մանոմետրի սլաքը որոշակի ժամանակ մնա նույն մակարդակի վրա։ Ստերիլիզացման սկիզբը համարվում է այն պահից, երբ սլաքը հասնում է համապատասխան ճնշմանը:

Ճնշման չափիչի ընթերցումները համապատասխանում են որոշակի գոլորշու ջերմաստիճանին:

Մանոմետրի ընթերցում ati Steam ջերմաստիճանում ˚C-ով

0,5 112,0

1,0 121,4

1,5 128,8

2,0 135,1

Ստերիլիզացման վերջում ջեռուցումը դադարեցվում է և թույլատրվում է ճնշման չափիչի սլաքը զրոյի հասցնել: Դրանից հետո միայն բացվում է գոլորշու ելքի խողովակի ծորակը, գոլորշին բաց է թողնվում և օդը ներս է թողնում, ապա կափարիչը պտտվում է, այն բարձրացվում է և այս դիրքում ավտոկլավը սառեցնելուց հետո հանվում է մանրէազերծված նյութը։

Սպասք և գույքագրում:

Պետրիի ուտեստներ ծառայում են մշակաբույսերի ցանքի համար։ Օգտագործեք 10 սմ տրամագծով բաժակներ (բարձրությունը 1,5 սմ): Ապակին պետք է լինի բարակ, թափանցիկ, առանց օդային փուչիկների։

Պիպետներ. Մանրէաբանական աշխատանքների համար օգտագործվում են 1-5 և 10 մլ տարողությամբ պիպետներ։ Առավել հաճախ օգտագործվող պիպետները 1 մլ են, մոտ 28 սմ երկարությամբ (առանց երկարացման):

Փորձարկման խողովակներ. 10 մլ ջուր լցնելու համար օգտագործվում են 18 x 2,0 սմ չափի փորձանոթներ; Օգտագործվում են նաև 18 x 1,5 սմ չափսի փորձանոթներ, կուլտուրայի միջավայրի համար՝ 15 x 1,8 սմ չափսի փորձանոթներ:

Ասեղներ և օղակներ: Ասեղներ և օղակներ օգտագործվում են փորձարկման նյութը վերցնելու և պատվաստման համար:

Լաբորատոր ապակյա իրերի լվացման համարլվացարանի սեղան.

Մանրադիտակով աշխատելիս օգտագործեքառարկայական և ամբողջականապակի . Ակնոցները պետք է լինեն անգույն հարթ մակերեսով, առանց օդային փուչիկների։ Հատուկ ուսումնասիրությունների համար՝ապակե սլայդներ հորերով:

1.2 Սարքավորումներ և արտադրական աշխատանքների կազմակերպում

Մանրէաբանական (մանրէաբանական) լաբորատորիա.

Սննդային հումքի և դրանից ստացված արտադրանքի մանրէաբանական հետազոտությունն իրականացվում է հատուկ լաբորատորիայում, որն ունի III-IV ախտածինության խմբերի միկրոօրգանիզմների հետ աշխատելու թույլտվություն: Մանրէաբանական (մանրէաբանական) լաբորատորիան (կամ մանրէաբանական բաժինը, որպես մսի վերամշակման ձեռնարկության արտադրական լաբորատորիայի մաս) նախատեսված է հումքի, պատրաստի արտադրանքի, օժանդակ նյութերի, տեխնոլոգիական սարքավորումների սանիտարահիգիենիկ վիճակի, գույքագրման սանիտարական և մանրէաբանական հսկողության համար: , տարաներ, հագուստ և անձնակազմի ձեռքեր։

Լաբորատոր տարածքներ.Լաբորատորիայի և դրա ենթակառուցվածքի ընդհանուր գտնվելու վայրը պետք է համապատասխանի ԳՕՍՏ Ռ 51446-99 (ISO 7218-96) պահանջներին: Լաբորատորիան տրամադրում է հետևյալ առանձին սենյակները կամ մեկուսացված աշխատանքային տարածքները.

նմուշների ստացման, պահպանման, պատրաստման և մշակման համար.

Ասեպտիկ պայմաններում առաջնային ցանքի, վերացանման, նոսրացումների պատրաստման և այլ աշխատանքների համար.

սննդանյութերի պատրաստման, ստերիլիզացման, շշալցման և պահպանման, լաբորատոր ապակյա իրերի և սարքավորումների պատրաստման համար.

սարքավորումների, օգտագործված սննդանյութերի և միկրոֆլորայով աղտոտված նյութերի ախտահանման և մաքրման համար:

Թերմոստատները, սառնարանները, սառցարանները կարող են տեղակայվել առանձին սենյակներում։

Տարածքը պետք է տեղակայվի այնպես, որ ապահովվի դրանց պաշտպանությունը արտաքին գործոնների ազդեցությունից (բարձր ջերմաստիճան, խոնավություն, փոշոտություն, աղմուկ, թրթռում), կազմակերպի մաքուր և աղտոտված նյութերի հոսքը:

Միսը կարող է վարակվել պաթոգեն միկրոֆլորայով, որը լուրջ վտանգ է ներկայացնում մարդու առողջության համար, և լաբորատոր տարածքները պետք է մեկուսացված լինեն այլ բաժանմունքներից: Եթե ​​հնարավոր չէ առանձին սենյակ կազմակերպել, ապա թույլատրվում է ընդհանուր սենյակում սեղան տեղադրել նմուշների նախնական պատվաստման համար։ Աշխատանքային ասեպտիկ պայմաններ ապահովելու համար ցանկալի է ապակեպատ արկղը սարքավորել նախնական տուփով:

Լաբորատոր սենյակները պետք է լինեն լուսավոր (սեղանի մակերեսի լուսավորությունը 500 լյուքսից) և ընդարձակ՝ յուրաքանչյուր վերլուծաբանի համար առաջարկվող աշխատանքային տարածքը մոտ 20 մ2 է: Պատերը, առաստաղը և հատակը պետք է լինեն հարթ, հեշտ մաքրվող, դիմացկուն լվացող միջոցների և ախտահանիչների նկատմամբ: Մաքրման և ախտահանման հեշտության համար լաբորատոր սարքավորումների և կահույքի մակերեսը ծածկված է հարթ անթափանց նյութով, օրինակ՝ պլաստիկով, իսկ աշխատավայրը ծածկված է հայելային սեղանով:

Սննդամթերքի, մասնավորապես երշիկեղենի և ապխտած մսի մանրէաբանական անալիզի համար անհրաժեշտ է 1-2 տուփ նախաարկղերով։ Արկղերը մեկուսացված են, փոշուց պաշտպանված ապակեպատ սենյակներ; 1 մ-ում 0,5 միկրոնից մեծ մասնիկների առավելագույն թույլատրելի քանակը չպետք է գերազանցի 4000-ը:

Լաբորատորիայի տարածքները պարբերաբար մաքրվում և ախտահանվում են, որոնց որակը պարբերաբար վերահսկվում է մանրէաբանական մեթոդով։

Յուրաքանչյուր սենյակ պետք է ունենա սառը և տաք ջրամատակարարում, ձեռքերը լվանալու համար ախտահանող լուծույթով շիշ:

1.3 Մանրէաբանության մեջ աշխատելու կանոններ

լաբորատորիաներ

Միկրոօրգանիզմների հետ անմիջական շփումը և բոլոր գործողությունների ընթացքում ստերիլ պայմաններին համապատասխանելու անհրաժեշտությունը պահանջում են գիտելիքներ և խստորեն պահպանում հետևյալ կանոնները.

աշխատել խալաթներով;

աշխատավայրում պահպանել մաքրությունը և կարգը.

մատներով մի դիպչեք փորձանոթներում և կուլտուրայի ափսեներում առկա մանրէաբանական նստվածքներին և խտացրած ջրին.

Մի լվացեք մանրէաբանական նստվածքները սլայդներից և ծածկոցներից և այլ առարկաներից անձեռոցիկներով, զտիչ թղթով, ախտահանեք դրանք՝ դրանք դնելով ալկոհոլի կամ կարբոլաթթվի լուծույթի մեջ.

աշխատանքի ընթացքում և ցանքից հետո ոչնչացնել մանրէաբանական նստվածքների մնացորդները մանրէաբանական ասեղների և օղակների վրա՝ կալցինացնելով ալկոհոլային լամպի կամ գազի այրիչի կրակի մեջ.

չեզոքացնել օգտագործված աղտոտված նյութերը և միկրոբների օգտագործված կուլտուրաները՝ ստերիլիզացման միջոցով ավտոկլավում (այս աշխատանքը կատարվում է լաբորատորիայի անձնակազմի կողմից).

ոգեղեն լամպերը դեմքին մոտ մի պահեք, ոգեղեն լամպը վառեք միայն լուցկիով.

մաքրել և մշակել աշխատավայրը աշխատանքի ավարտին ախտահանիչ լուծույթով լաբորանտի հսկողության ներքո. տեղադրեք միկրոօրգանիզմների մշակույթներ, որոնք անհրաժեշտ են հետագա աշխատանք, սառնարանում կամ սեյֆում, որը փակ է և կնքված; թերմոստատի մեջ դնել միկրոֆլորայով պատվաստված փորձանոթները և Պետրիի ափսեները.

աշխատանքից հետո ձեռքերը մանրակրկիտ լվացեք, լաբորատորիայում մի կերեք:

1.4 Օպտիկական մանրադիտակի սարքը և դրա խնամքը.

Մանրադիտակը բարդ օպտիկական գործիք է, որը մեծացնում է առարկան 1000-1500 անգամ։ Ժամանակակից մանրադիտակը բաղկացած է երկու հիմնական մասից՝ մեխանիկական և օպտիկական:

Մեխանիկական մասը բաղկացած է եռոտանիից, որը տարբերում է ոտքը, հիմքը, խողովակի ամրակը և եռոտանի հիմքին ամրացված առարկայի սեղանը։ Խողովակի ամրակը բարձրացվում և իջեցվում է մակրոմետրիկ և միկրոմետրիկ պտուտակներով, որոնք նախատեսված են օբյեկտի կոպիտ և նուրբ կենտրոնացման համար:

Մանրադիտակի օպտիկական մասը բաղկացած է լուսային և դիտորդական սարքերից։

Լուսավորման ապարատը գտնվում է օբյեկտի սեղանի տակ և բաղկացած է հայելուց, կոնդենսատորից և ծիածանաթաղանթի դիֆրագմայից:

Հայելին արտացոլում է լույսի ճառագայթները և դրանք ուղղում դեպի կոնդենսատոր։

Կոնդենսատորը ոսպնյակների համակարգ է և ծառայում է խնդրո առարկա օբյեկտի լուսավորության պայծառության բարձրացմանը:

Դիտորդական ապարատը ներառում է ոսպնյակներ և ակնոցներ:

Նպատակները պտտվում են ատրճանակի վարդակների մեջ և բաղկացած են ոսպնյակների համակարգից, որը փակված է մետաղական շրջանակի մեջ: Օբյեկտիվի առջևի կամ առջևի ոսպնյակը ամենափոքրն է և միակը, որը տալիս է խոշորացում: Ոսպնյակի մնացած ոսպնյակները ուղղիչ են:

MBR-1 և MBI-1 կենսաբանական մանրադիտակները սովորաբար ունեն երեք կամ չորս ոսպնյակներ՝ թվային նշումներով x8, x20, x40, x90, որոնք ցույց են տալիս այդ օբյեկտների իրական մեծացումը:

Ակնափորը տեղադրվում է խողովակի վերին ծայրի մեջ: Ակնափայտը երկու հարթաուռուցիկ ոսպնյակների համակարգ է՝ ուղղված դեպի օբյեկտը: Աչքի դեմ ուղղված ոսպնյակը կոչվում է ակնաբուժական ոսպնյակ, իսկ պատրաստման դեմ ուղղված ոսպնյակը կոչվում է կոնվերգենտ ոսպնյակ: Կենցաղային մանրադիտակների ակնոցները նշված են իրենց սեփական խոշորացումը ցույց տվող թվերով՝ x5, x7, x10, x15:

Մանրադիտակի խոշորացումը հավասար է օբյեկտի մեծացման ակնապի մեծացման արտադրյալին:

Մանրադիտակի խնամքի ցուցումներ.

Մանրադիտակը պաշտպանված է փոշուց, խոնավությունից և արեւի ճառագայթները. Նրա հետ աշխատելուց հետո այն տեղադրում են պատյանում կամ ծածկում խիտ կտորից պատրաստված գլխարկով։

Օբյեկտիվները և ակնոցները սրբվում են թավշով կամ ֆլանելով:

Մի թողեք մանրադիտակի խողովակը բաց, այսինքն՝ առանց ակնոցի, քանի որ դա հանգեցնում է խողովակի մեջ փոշու կուտակման և օբյեկտների աղտոտմանը:

Մանրադիտակ բաղկացած է երկու հիմնական մասից. Մանրադիտակի հիմքը եռոտանի է։ Դրան կցվում է խողովակ, որի մեջ փակված է օպտիկական մաս և օբյեկտի սեղան: Եռոտանի բաղկացած է հիմքից (կամ պայտաձև ոտքից) և խողովակի պահարանից։ Խողովակի ամրակը միացված է հիմքին կրունկով, որը թույլ է տալիս թեքել մանրադիտակի վերին մասը՝ հեշտ օգտագործման համար: Խողովակի մեջ տեղադրվում են նպատակներ և ակնոցներ: Ոսպնյակները պտուտակված են խողովակի ստորին մասում, որը կոչվում է ատրճանակ: Ակնոցները ազատորեն տեղավորվում են խողովակի վերին մասում: Խոշորացումը կարելի է փոխել՝ օգտագործելով տարբեր ոսպնյակներ, որոնք պտուտակված են ատրճանակի պտտվող թմբուկի մեջ:

Խողովակի ամրակը բարձրացվում և իջեցվում է մակրոմետրիկ և միկրոմետրիկ պտուտակներով, որոնք նախատեսված են օբյեկտի կոպիտ և նուրբ կենտրոնացման համար: Որպեսզի պատրաստուկը հստակ տեսանելի լինի, խողովակը պետք է տեղափոխվի իր օպտիկական առանցքի ուղղությամբ՝ օգտագործելով կոպիտ կամ միկրոմետրիկ շարժման մեխանիզմներ: Կոպիտ շարժումը պետք է իրականացվի բավականին հեշտությամբ, բայց առանց խողովակի ինքնաբուխ իջեցման: Ավելի ճշգրիտ կարգավորումների համար օգտագործվում է միկրոմետր պտուտակ: Միկրոմետրի պտուտակն ունի բարդ կառուցվածք և մանրադիտակի ամենահեշտ վնասվող մասերից է: Մի պտտեք պտուտակը կես պտույտից ավելի այս կամ այն ​​ուղղությամբ (մանրադիտակի կոպիտ տեղադրումից հետո): Օբյեկտների աղյուսակը օգտագործվում է ուսումնասիրվող դեղամիջոցը տեղադրելու համար:

Օպտիկական մասը բաղկացած է հայելից, դիֆրագմայով կոնդենսատորից, օբյեկտներից և ակնոցներից։ Մանրադիտակի հայելին շարժական է։ Արհեստական ​​լույսի դեպքում ավելի լավ է օգտագործել գոգավոր հայելի, ցրված լույսի դեպքում՝ հարթ։ Հայելին արտացոլում է լույսի ճառագայթները և դրանք ուղղում դեպի կոնդենսատոր։ Կոնդենսատորը օգտագործվում է պատրաստուկի ավելի ուժեղ լուսավորություն ստանալու համար: Դիֆրագմը օգտագործվում է պատրաստուկի լուսավորությունը կարգավորելու համար։ Դիֆրագմը գտնվում է կոնդենսատորի ստորին մակերեսի և հայելու միջև:

Նպատակները մանրադիտակի ամենակարևոր մասն են, որոնք որոշում են դրա օպտիկական հզորությունը: Նպատակները պտտվում են ատրճանակի վարդակների մեջ և բաղկացած են ոսպնյակների համակարգից, որը փակված է մետաղական շրջանակի մեջ: Օբյեկտիվի առջևի կամ առջևի ոսպնյակը ամենափոքրն է և միակը, որը տալիս է խոշորացում: Ոսպնյակի մեջ մնացած ոսպնյակները ուղղիչ են: Ակնափորները մեծացնում են ոսպնյակի կողմից տրված պատկերը, բայց չեն բացահայտում հետազոտվող դեղամիջոցի որևէ մանրամասն:

Ոսպնյակները, որոնք շահագործման ընթացքում պետք է ընկղմվեն մայրու յուղի մեջ, կոչվում են սուզվող կամ սուզվող: Չոր ոսպնյակը ոսպնյակ է, որն օդ ունի պատրաստուկի և ոսպնյակի միջև: Յուրաքանչյուր մանրադիտակ հագեցած է չոր և ընկղմվող օբյեկտներով: 8 և 40 հիմնական խոշորացմամբ ոսպնյակները չոր են, իսկ 90 ներքին խոշորացումով օբյեկտիվը ընկղմում է:

MBR-1 մանրադիտակով աշխատելու կանոններ

1. Մանրադիտակը պահվում է պահարանում՝ այն փոշուց, խոնավությունից և լույսից պաշտպանելու համար: Մանրադիտակը տեղափոխվում է աջ ձեռքով՝ եռոտանի բռնակով, ձախ հենարանով ներքևից։
2. Մանրադիտակի հետ աշխատելուց առաջ սրբեք ակնաբույժը, օբյեկտը և հայելին կտորով:
3. Տեղադրեք մանրադիտակը եռոտանիով դեպի ձեզ, օբյեկտի բեմը ձեզանից հեռու: Նստած մանրադիտակի հետ կապված պետք է ավելի մոտեցնել ձախ ուսին: Մանրադիտակի աջ կողմում կա ալբոմ, մատիտներ, գունավոր մատիտներ և ռետին:
4. Տեղադրեք ցածր խոշորացման ոսպնյակը աշխատանքային դիրքում: Դա անելու համար պտտեք ատրճանակը, մինչև ցանկալի օբյեկտը գտնվի միջին դիրքում (բեմի բացվածքի վրայով): Երբ ոսպնյակը գտնվում է միջին դիրքում, ատրճանակի մեջ գործարկվում է հատուկ սարք՝ սողնակ, մինչդեռ մի փոքր սեղմում է լսվում և ատրճանակը ամրացվում է։ Հիշեք, որ ցանկացած օբյեկտի ուսումնասիրությունը սկսվում է փոքր աճով:
5. Մակրոմետրիկ պտուտակով ոսպնյակը բարձրացրեք բեմից մոտ 1 սմ-ով, բացեք դիֆրագմը, բարձրացրեք կոնդենսատորը մինչև բեմի մակարդակը:
6. Ձախ աչքով նայելով ակնոցի միջով, օգտագործեք հայելի՝ լույսն ուղղելու համար, որպեսզի ամբողջ տեսադաշտը լուսավորվի վառ և հավասարաչափ:
7. Պատրաստված նմուշը դրեք բեմի վրա՝ ծածկոցը վերև այնպես, որ առարկան լինի բեմի բացվածքի կենտրոնում։ Մակրոմետրիկ պտուտակով իջեցրեք ոսպնյակը պատրաստուկի վրայով 0,2 սմ-ով:
8. Նայեք ակնոցի մեջ, միևնույն ժամանակ դանդաղ շրջեք դարակը դեպի ձեզ և նրբորեն բարձրացրեք խողովակը մինչև (0,5 սմ), մինչև օբյեկտի պատկերը հայտնվի տեսադաշտում. զգուշորեն պտտելով միկրոմետրի պտուտակը ½ կամ ¾ լրիվ պտույտից ոչ ավելի, հասցրեք պարզ տեսարան:
9. Անդրադառնալով օբյեկտի բարձր խոշորացումով դիտարկմանը, անհրաժեշտ է կենտրոնացնել պատրաստումը, այսինքն. տեղադրել հետաքրքրության օբյեկտի մասը տեսադաշտի հենց կենտրոնում. Դա անելու համար նախապատրաստությունը տեղափոխեք ծնողների պատրաստուկների օգնությամբ կամ ձեր ձեռքերով, մինչև առարկան ընդունի ցանկալի դիրքը։ Եթե ​​օբյեկտը կենտրոնացած չէ, ապա մեծ խոշորացման դեպքում այն ​​կմնա տեսադաշտից դուրս:
10. Ավելի փոքրից ավելի մեծ խոշորացումից անցնելով՝ պտտեցրեք ատրճանակը՝ ավելի մեծ խոշորացման ոսպնյակը խողովակի ստորին բացվածքի դեմ դնելու համար: Նայեք ակնոցի մեջ և ուշադիր պտտելով միկրոմետրի պտուտակը, ստացեք հստակ պատկեր:
11. Նախապատրաստումը ուրվագծելիս ձախ աչքով նայեք ակնոցի մեջ, իսկ ալբոմի մեջ՝ աջ աչքով:
12. Ռևոլվերով մանրադիտակով աշխատելուց հետո փոխարինեք մեծ խոշորացման ոսպնյակը փոքր ոսպնյակով, հանեք պատրաստուկը սեղանից և նորից դրեք այն տեղում:
13. Մաքրել ձեր գրասեղանը; դեղեր և ուղեցույցներ ուսուցչի սեղանի վրա:

1.5 Բակտերիաների հիմնական ձևերը.

Ըստ իրենց ձևի՝ բակտերիաները սովորաբար բաժանվում են գնդաձև (կոկի), ձողաձև (կլոստրիդիաներ, բացիլներ) և ոլորված (վիբրիո, սպիրիլլա, սպիրոխետներ)։

Կոկկոիդ ձևերը՝ ըստ կոկկիների գտնվելու վայրի, բաժանվում են միկրոկոկիների՝ առանձին տեղակայված բջիջների. diplococci - cocci կապված երկու; tetracocci - cocci կապված չորս; streptococci - cocci դասավորված երկար կամ կարճ շղթայի տեսքով; sarcins - cocci դասավորված փաթեթների տեսքով; ստաֆիլոկոկներ - կոկիների պատահական կուտակում, հաճախ խաղողի տեսքով:

Ձողաձև ձևերը, ըստ ձողերի գտնվելու վայրի, բաժանվում են դիպլոբակտերիաների՝ զույգերով միացված ձողերի. streptobacteria - ձողիկներ, որոնք դասավորված են շղթայով: Սպոր առաջացնող բակտերիաներից առանձնանում են բացիլները և կլոստրիդները։ Բացիլների մոտ սպորի տրամագիծը չի գերազանցում վեգետատիվ բջջի լայնությունը, իսկ կլոստրիդիումում սպորն ավելի մեծ է, քան բջջի լայնությունը, ուստի բջիջը ստանում է սպինդի, թենիսի ռակետի, թմբուկի տեսք։

Խճճված ձևերը բաժանվում են վիբրիոների, որոնք ունեն ստորակետի ձև, սպիրիլլա, որոնք ունեն մի քանի (մինչև 5) գանգուրներ և սպիրոխետներ՝ մեծ քանակությամբ փոքր գանգուրներով։

Կատարման կարգը

2. Պատրաստի պատրաստուկների մանրադիտակ բակտերիաների հիմնական ձևերով.

Մանրադիտակի տեխնիկա.

Փորձարկման պատրաստումը տեղադրվում է օբյեկտի սեղանի վրա և ամրացվում սեղմակներով:

Ընկղման օբյեկտի 90-ի հետ աշխատելիս պատրաստման վրա կիրառվում է ընկղման յուղի կաթիլ, այնուհետև, օգտագործելով մակրոմետրիկ պտուտակ, կենտրոնացված 90 օբյեկտով խողովակը զգուշորեն իջեցվում է այնպես, որ դրա առջևի ոսպնյակը ընկղմվի յուղի կաթիլի մեջ, և ուշադրության կենտրոնում է նախապատրաստումը: Այնուհետև, նայելով ակնոցի մեջ, խողովակը շատ դանդաղ բարձրացվում է նույն պտուտակով (հարյուրերորդական միլիմետրով), մինչև երևան միկրոբների պատկերը: Դեղամիջոցի ճշգրիտ տեղադրումը ոսպնյակի կիզակետում իրականացվում է միկրոմետր պտուտակով:

Նշում.

Ընկղման համակարգի առավելությունն այն է, որ երբ ոսպնյակը ընկղմվում է յուղի մեջ, ապակու յուղի միջով անցնող լույսի ճառագայթները գրեթե չեն բեկվում, քանի որ այս կրիչների լույսի բեկման ինդեքսը գրեթե նույնն է: Արդյունքում, յուղով մանրադիտակի ընթացքում լուսավորությունը առավելագույն է:

Աշխատանքի վերջում ընկղման յուղը հանվում է օբյեկտի 90-ի առջևի ոսպնյակից փափուկ կտորի միջոցով, յուղի ավելի ամբողջական հեռացման համար առջևի ոսպնյակը սրբվում է ալկոհոլի խառնուրդով թրջված շորով և Եթերը 1:1 հարաբերակցությամբ, ապա ոսպնյակը չորանում է: Մանրադիտակը տեղադրված է պահեստում:

Մանրադիտակի ժամանակ ուշադրություն դարձրեք ուսումնասիրվող միկրոօրգանիզմի բջիջների ձևին և չափին, բջիջների կառուցվածքային առանձնահատկություններին՝ բակտերիաներում սպորների և պարկուճների առկայությանը, թթխմորի մեջ՝ բողբոջներին. կաղապարի պատրաստման մեջ - բջիջների մի շարք ձևերի համար՝ կլոր, օվալ, երկարավուն, գլանաձև, ճյուղավորված:

Մանրադիտակի հաշվետվություն.

Մանրադիտակի արդյունքները գրանցված են աղյուսակում (ձև 1):

Ձև 1

Վերահսկիչ հարցեր.

1. Ինչ սարքավորում պետք է հագեցած լինի մանրէաբանական լաբորատորիայով, դրա նպատակը:
2. Մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատելու հիմնական կանոնները.
3. Ինչ է սարքը օպտիկական համակարգկենսաբանական մանրադիտակ?
4. Ի՞նչ կանոններ պետք է պահպանել մանրադիտակ օգտագործելիս և խնամելիս:
5. Որո՞նք են բակտերիաների հիմնական ձևերը:

№ 2 ԼԱԲՈՐԱՏՈՐԻԱՅԻ ԱՇԽԱՏԱՆՔ.

Կենդանի միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրության համար մանրէաբանական պատրաստուկների պատրաստում («փշրված կաթիլ» և «կախված կաթիլ»): Մանրէաբանական մշակույթներից քսուքների պատրաստում.

Միկրոօրգանիզմների պատրաստուկների պատրաստման, ինչպես նաև միկրոօրգանիզմների տեղափոխման վերաբերյալ ցանկացած աշխատանք կատարվում է ասեպսիսի կանոնների պահպանմամբ:

Լաբորատոր սեղանի սարքավորումներ.

Միկրոօրգանիզմների հետ աշխատելու համար անհրաժեշտ է որոշակի սարքավորում։ Աշխատանքային լաբորատոր սեղանի վրա պետք է լինի սպիրտային լամպ կամ գազի այրիչ, մանրէաբանական օղակ, սլայդներ և ծածկոցներ, ներկերի հավաքածու, մանրադիտակ, անձեռոցիկ, մայրու յուղ, պինցետ, կամուրջով կուվետ, ջրով անոթ: , ավազե ժամացույց, մատիտ ապակու վրա, ֆիլտր թուղթ։

Դասի նպատակը.

Ծանոթացեք շարժունակության համար բակտերիաների ուսումնասիրման մեթոդներին:

Նյութական աջակցություն.

Միկրոօրգանիզմների երիտասարդ արգանակային կուլտուրաներ փորձանոթներում՝ շարժունակության ուսումնասիրման համար, ապակե սլայդներ և ծածկոցներ, անցքերով ապակե սլայդներ, մանրէաբանական օղակներ, Պաստերի պիպետներ, մանրադիտակներ, լուցկիներ, սպիրտ կամ գազի այրիչներ։

Ուսուցիչը պետք է ցույց տա միկրոօրգանիզմների չներկված պատրաստուկներ պատրաստելու, մանրադիտակը աշխատանքի համար պատրաստելու, տեսադաշտի լուսավորությունը կարգավորելու, խոշորացույցի տեղադրման և պատրաստուկների մանրադիտակի պատրաստման տեխնիկան։

Ուսանողների աշխատանքի ընթացքում ուսուցիչը պետք է մշտապես ստուգի յուրաքանչյուր մանրադիտակի տեսադաշտի լուսավորությունը, անհրաժեշտության դեպքում օգնի այն կարգավորել և դիտել հայտնաբերված առարկաների պատկերները: Պետք է տրվի չբիծ պատրաստուկ դիտելը Հատուկ ուշադրություն, քանի որ այստեղ ուսանողները պետք է տեսնեն և՛ բջիջների ձևը, և՛ նրանց շարժունակությունը։

Առաջադրանքներ.

1. Բակտերիաների շարժունակությունը որոշելու համար պատրաստել «փշրված և կախովի կաթիլ» պատրաստուկներ։
2. Մանրէաբանական կուլտուրայից քսուք պատրաստեք։
3. Իմացեք մանրադիտակի տեխնիկան և մանրադիտակի տակ դիտեք պատրաստված պատրաստուկները:
4. Պատրաստել զեկույց մանրադիտակի արդյունքների վերաբերյալ:
5. Դասի բովանդակությունը գրանցեք աշխատանքային գրքում:

Կատարման կարգը

1. «Փշրված և կախված կաթիլ» պատրաստուկներում մանրէների շարժունակության ուսումնասիրություն։

Մանրացված կաթիլ:

Եթե ​​օրգանիզմները գտնվում են հեղուկ միջավայրում, ապա կախույթի մի կաթիլը կիրառվում է յուղազրկված ապակու սլայդի վրա՝ օգտագործելով ստերիլ պիպետ: (Օգտագործելուց հետո պիպետտն անմիջապես տեղադրվում է ճենապակյա ապակու մեջ՝ ախտահանիչ լուծույթով: Կեղտոտ պիպետը աշխատասեղանին դնելն անընդունելի է): Եթե ​​մշակույթը աճեցվում է պինդ սննդային միջավայրի վրա, ապա ապակու վրա սկզբում մի կաթիլ ջուր են քսում, այնուհետև միկրոօրգանիզմների բջիջները կամ փորձանմուշի փորձանմուշը տեղադրվում են դրա մեջ այրիչի կրակի մեջ կալցինացված մանրէաբանական օղակով, և մանրակրկիտ խառնել:

Հեղուկի մի կաթիլը ծածկված է ծածկոցով: Որպեսզի դրա տակ օդային պղպջակներ չառաջանան, ծածկոցը նախ մի եզրով դրվում է ապակու սլայդի վրա, այնուհետև նրբորեն իջեցնում են՝ սեղմելով ներքև՝ կաթիլը «ջախջախելու» համար: Ցանկալի է խուսափել ավելորդ հեղուկից, որպեսզի միկրոօրգանիզմների կախոցը դուրս չսեղմվի ծածկույթի տակից։ Եթե ​​դա տեղի ունենա, ավելցուկային հեղուկը հեռացվում է ֆիլտրի թղթով: Օգտագործված թուղթը պետք է անմիջապես դրվի ախտահանիչ լուծույթի մեջ:

«Փշրված կաթիլ» պատրաստման մանրադիտակի համար օգտագործվում են միայն չոր համակարգով օբյեկտներ, այսինքն՝ առանց ընկղմման: Դեղամիջոցի այս տեսակը թույլ է տալիս որոշել բջիջների ձևը, չափը, սպորացման եղանակը, իսկ եթե բջիջները կենդանի են, ապա շարժունակության առկայությունը կամ բացակայությունը։

Դեղամիջոցի առավելությունն այն է, որ ստացվում է հեղուկի բարակ շերտ, որտեղ կարելի է տեսնել կենդանի օրգանիզմներ։

Թերությունն այն է, որ այն արագ չորանում է, իսկ շարժումը դադարում է, հաճախ օդ է մտնում, ինչը խախտում է մանրադիտակային պատկերը։

Դեղը պատրաստելու համար«կախված կաթիլ» միկրոօրգանիզմների կասեցման փոքր կաթիլը կիրառվում է ծածկույթի վրա, շրջվում է գլխիվայր և տեղադրվում է հատուկ ապակե սլայդի վրա, որի կենտրոնում անցք (անցք) է: Կաթիլը պետք է ազատորեն կախված լինի՝ չդիպչելով անցքի եզրերին և հատակին: Եթե ​​գալիս են բազմաթիվ օրերի դիտում, ապա անցքի եզրերը քսվում են նավթային ժելեով և կաթիլը հերմետիկորեն փակվում է խոնավ խցիկում: «Կախովի կաթիլ» պատրաստուկը օգտագործվում է միկրոօրգանիզմների շարժունակությունը հայտնաբերելու, վերարտադրության մեթոդներն ուսումնասիրելու, սպորների բողբոջումը վերահսկելու համար։

Խոհարարության համարշվաբրի պատրաստում մանրէի ուսումնասիրված մշակույթը խնամքով բաշխվում է միատեսակ բարակ շերտով ապակե սլայդի վրա: Կոշտ միջավայրի վրա աճեցված կուլտուրաներ պատրաստելիս վարվեք հետևյալ կերպ. Ստերիլ ծորակի ջրի կամ աղի լուծույթի կաթիլը կիրառվում է մաքուր ապակե սլայդի վրա ստերիլ խողովակով կամ մանրէաբանական օղակով:

ա) Վերցվում է կուլտուրայի խողովակ, որից անհրաժեշտ է քսուք պատրաստել. Մանրէաբանական օղակը կալցինացվում է այրիչի բոցի մեջ՝ այն պահելով ուղղահայաց դիրքում։

բ) Խցանափայտը պահելով փոքր մատի և աջ ձեռքի ափի միջև, հանեք այն փորձանոթից և ծայրը վար պահեք՝ խուսափելով խցանի այն հատվածի ձեռքի հետ շփումից, որը գտնվում էր փորձանոթում։

գ) Փորձանոթի բաց ծայրը կրակի վրա այրում ենք։

դ) Փորձանոթի մեջ օղակ ենք մտցնում (կրկին կրակի միջով անցած), հովացնում ենք՝ դիպչելով փորձանոթի պատին և հավաքում փոքր քանակությամբ նյութ՝ թեթևակի դիպչելով կուլտուրան և առանց օղակով միջավայրը քերծելու։

ե) Փորձանոթի ծայրերը և բամբակյա խցանի ծայրը այրում ենք այրիչի բոցի վրա։

զ) Խողովակը փակեք բամբակյա խցանով:

է) Վերցված նյութը էմուլսացվում է ապակու սլայդի վրա առկա կաթիլի տեսքով և օղակի բարակ շերտով հավասարաչափ բաշխվում մակերեսի վրա (1,5 x 2 սմ):

ը) Օղակը կալցինացված է և դրվում է տեղում:

Եթե ​​մշակույթը աճեցվում է հեղուկ սննդարար միջավայրում, ապա ստերիլ օղակը իջեցնում են հեղուկի մեջ, մի կաթիլ են բռնում և քսում ապակե սլայդի վրա:

3. Մանրադիտակի տեխնիկա.

Մանրադիտակը դրվում է աշխատասեղանի վրա՝ ծայրից 3-5 սմ հեռավորության վրա՝ խողովակի բռնակով դեպի ձեզ:

Հաստատվում է մանրադիտակի տեսադաշտի լավ միատեսակ լուսավորություն, որի համար, նայելով ակնոցի մեջ, հայելին լույսի ճառագայթն ուղղում է աղբյուրից դեպի ոսպնյակ: Կոնդենսատորը պետք է վերև լինի, իսկ դիֆրագմը բաց լինի: Մանրադիտակի տեսադաշտը պետք է լավ և միատեսակ լուսավորված լինի բոլոր կետերում:

Փորձարկման պատրաստուկը տեղադրվում է առարկայի սեղանի վրա քսելով կամ կաթիլով դեպի վեր և ամրացվում սեղմակներով:

Չներկված պատրաստուկները մանրադիտակով մանրադիտակ են անում x8 և x40 օբյեկտներով՝ կոնդենսատորն իջեցնելով 1-0,5 սմ-ով մինչև պատրաստուկը՝ հասնելով չներկված բջիջների լավագույն տեսանելիությանը:

Երբ մանրադիտակը «կենդանի» մանրէների (չբիծ պատրաստում) նշում է շարժունակությունը:

4. Զեկույց մանրադիտակի արդյունքների մասին:

գ) բջիջների նկարում մանրադիտակի տակ (նշվում է սպորների, պարկուճների, բողբոջների, շարժունակության առկայությունը):

5. Դասի բովանդակությունը գրի՛ր աշխատանքային գրքում:

Վերահսկիչ հարցեր

1. Ո՞րն է «փշրված և կախված կաթիլ» պատրաստուկների պատրաստման տեխնիկան:
2. Ո՞րն է պինդ սննդային միջավայրի վրա աճեցված բակտերիաների մշակույթից քսուքի պատրաստման կարգը:
3. Ի՞նչն է թույլ տալիս տեղադրել «փշրված կաթիլ» դեղը:
4. Ի՞նչ հետազոտության համար է օգտագործվում «կախված կաթիլ» դեղամիջոցը:

№3 ԼԱԲՈՐԱՏՈՐԻԱՅԻ ԱՇԽԱՏԱՆՔ.

Բակտերիաների ներկված պատրաստուկների պատրաստում.

Դասի նպատակը.

Իմացեք, թե ինչպես պատրաստել և ներկել բակտերիալ պատրաստուկները պարզ և Գրամ մեթոդով:

Նյութական աջակցություն.

Պատրաստի ներկերի լուծույթների հավաքածու շշերի մեջ, չոր ներկերի հավաքածու շշերի մեջ կամ ռետինե կամ խցանե խցաններով փորձանոթներում՝ հիմնային և թթվային ֆուքսին, գենտյան մանուշակ, մեթիլեն կապույտ, սաֆրանին, մալաքիտ և փայլուն կանաչ, մանրէների խառնուրդ։ գրամ դրական բակտերիաների կուլտուրաներ (Bac. subtilis, Staph. saprophyticus), գրամ-բացասական միկրոբների (E. coli) աճեցված թեք MPA-ի վրա, ապակե սլայդներ, ջրային ֆուքսին լուծույթ (Pfeiffer's magenta), մանրէաբանական օղակներ, ֆիլտրի թուղթ, մանրադիտակներ, ալկոհոլի կամ գազի այրիչներ.

Ուսուցիչը պետք է ցույց տա միկրոօրգանիզմների ներկված պատրաստուկների պատրաստման տեխնիկան, մանրադիտակը աշխատանքի համար պատրաստելը, տեսադաշտի լուսավորությունը կարգավորելը, խոշորացույցի տեղադրումը և պատրաստուկների մանրադիտակը:

Ուսանողների աշխատանքի ընթացքում ուսուցիչը պետք է մշտապես ստուգի յուրաքանչյուր մանրադիտակի տեսադաշտի լուսավորությունը, անհրաժեշտության դեպքում օգնի այն կարգավորել և դիտել հայտնաբերված առարկաների պատկերները: Գունավոր պատրաստուկը դիտելիս ուսանողը պետք է տեսնի սպորների և պարկուճների առկայությունը միկրոօրգանիզմների մեջ:

Առաջադրանքներ.

1. Պատրաստեք ափսեի քսուք և բիծ՝ օգտագործելով պարզ մեթոդ:
2. Պատրաստեք քսուք ստաֆիլոկոկի և էշերիխիա կոլիի խառնուրդից մեկ սլայդի վրա և ներկեք Gram-ով:
3. Դիտեք ներկված քսուքները ընկղմվող ոսպնյակով:
4. Դասի բովանդակությունը գրանցեք աշխատանքային գրքում:

Պատասխանել անվտանգության հարցերին.

Բացատրություն աշխատանքի համար

Մանրէաբանական բջջի և նրա որոշ կառուցվածքների ձևն ուսումնասիրելու համար ներկվում է հետազոտվող միկրոբ պարունակող նյութից պատրաստված պատրաստուկը (քսուք):

Մանրէների մեծ մասը արագ և լավ ներկվում է անիլինային ներկերի լուծույթներով: Ըստ քիմիական հատկություններդրանք սովորաբար բաժանվում են հիմնային և թթվային: Հիմնական ներկերի համար քրոմոֆորը (գույն տվող իոնը) կատիոն է, թթվային ներկերի համար՝ անիոն։

Հիմնական ներկերը ներառում են կարմիր - չեզոք կարմիր, մագենտա հիմնական, սաֆրանին, թիոնին, պիրոնին, հեմատոքսիլին; կապույտ - մեթիլեն կապույտ; մանուշակ - բյուրեղյա մանուշակ, մեթիլեն մանուշակ; կանաչ - մալաքիտ կանաչ, մեթիլեն կանաչ: Հիմնական ներկերը, որպես կանոն, հեշտությամբ կապվում են բջիջների միջուկային (թթվային) բաղադրիչներին։

Թթվային ներկերը ներառում են կարմիր և վարդագույն - թթու ֆուքսին, էոզին; դեղին - պիկրինաթթու, կոնգո, ֆլուորեսցեն; սև - նիգրոսին: Թթվային ներկերը ավելի ինտենսիվ ներկում են բջիջների (հիմնական) բաղադրիչները։

Ներկերի աշխատանքային լուծույթների պատրաստում.Մանրէներ ներկելու համար նախատեսված ներկերի աշխատանքային լուծույթներ պատրաստելուց առաջ, հաճախ նախօրոք մանրէներ ներկելու համար նախատեսված չոր ներկերից, հաճախ չոր ներկերից նախապես պատրաստվում են հագեցած ալկոհոլային լուծույթներ։ Դրա համար ներկը լցնում են 96% սպիրտով 1:10 հարաբերակցությամբ։ Այս հարաբերակցությամբ սպիրտը հագեցված է ներկով (ներկերի չլուծված մասը նստվածք կառաջանա)։ Գումար խնայելու համար խորհուրդ է տրվում 100 սմ³ սպիրտին ընդունել մեթիլեն կապույտ 7.0, գենտյան մանուշակ 4.8, հիմնական ֆուքսին 8.1:

Ավելի լավ հագեցվածության համար ալկոհոլային լուծույթները տեղադրվում են թերմոստատի մեջ և պահվում այնքան ժամանակ, մինչև ներկերը լիովին լուծվեն։ Ջրային աշխատանքային լուծույթները պատրաստվում են հագեցված ալկոհոլային լուծույթներից ըստ անհրաժեշտության:

Ամենատարածված ներկանյութերի լուծույթներն են.

Ցիլ ֆուքսին կարբոլիկ լուծույթ.Բյուրեղային կարբոլաթթվի 100 մլ 5% լուծույթին ավելացրեք 10 մլ հիմնային ֆուքսինի հագեցած ալկոհոլային լուծույթ։ Ֆուքսինի հագեցած լուծույթ է ստացվում՝ 8 գ ֆուքսին բյուրեղները 10 մլ սպիրտի մեջ խառնելով։ Ներկը կարմիր է։

Ֆուչսին ՊֆայֆերZiel's fuchsin-ի կարբոլիկ լուծույթ է՝ նոսրացված թորած ջրի մեջ 1։10 հարաբերակցությամբ։ Պատրաստված է անմիջապես օգտագործելուց առաջ։ Ներկը հարուստ վարդագույն գույն ունի։

Գենտյան մանուշակի կարբոլիկ լուծույթ.Ներկերի 10 մլ հագեցած ալկոհոլային լուծույթին ավելացրեք 100 մլ կարբոլաթթվի 2% ջրային լուծույթ: Հագեցած լուծույթ է ստացվում՝ 1 գ բյուրեղային մանուշակի լուծույթը 10 մլ 96% սպիրտի մեջ։ Ներկը կապույտ-մանուշակագույն գույն ունի։

Սաֆրանին. Պատրաստել օգտագործելուց անմիջապես առաջ՝ 100 մլ տաք ջրին ավելացնելով 1 գ սաֆրանին։ Ներկը կարմիր-շագանակագույն է։

Մեթիլեն կապույտ (Լեֆլերի կապույտ):Պատրաստել՝ 100 մլ թորած ջրին ավելացնելով ներկի 30 մլ հագեցած ալկոհոլային լուծույթ և 1 մլ KOH կամ NaOH 1% ջրային լուծույթ։ Լուծումը ունի մուգ կապույտ գույն:

Մալաքիտի կանաչ:1 գ ներկը լուծում են 100 մլ թորած ջրի մեջ, ֆիլտրում։ Լուծումը ունի կապույտ-կանաչ գույն:

Լուգոլի լուծում. Վերցրեք 1 գ բյուրեղային յոդ և 2 գ կալիումի յոդիդ 300 մլ թորած ջրի դիմաց: Սկզբում կալիումի յոդիդը լուծվում է փոքր քանակությամբ ջրի մեջ, ապա ավելացնում յոդի բյուրեղները։ Ամբողջական լուծարվելուց հետո ավելացվում է մնացած թորած ջուրը։

Գունավորման բարդ մեթոդներօգտագործվում է բջջի կառուցվածքի մանրամասն ուսումնասիրության, ինչպես նաև որոշ միկրոօրգանիզմների մյուսներից տարբերելու համար։ Ներկման բարդ մեթոդները հիմնված են բջջի և նրա մասերի ֆիզիկաքիմիական կառուցվածքի առանձնահատկությունների վրա: Գրամ բիծն ունի ամենամեծ գործնական գիտելիքները, ինչը թույլ է տալիս տարբերել բակտերիաները ըստ քիմիական կազմի և կառուցվածքի: բջջային պատը.

Մեթոդը մշակվել է դանիացի գիտնական Քրիստիան Գրամի կողմից 1885 թվականին: Գրամ մեթոդով ներկվելիս բոլոր բակտերիաները բաժանվում են երկու խմբի՝ գրամ դրական և գրամ-բացասական:

Կատարման կարգը

Գրամ ներկման տեխնիկա.

1. Պարզ գունավորման մեթոդ.ժամը պարզ մեթոդգունավորում, օգտագործվում է որոշ գունազարդման լուծույթներից մեկը, առավել հաճախ Pfeiffer fuchsine կամ methylene blue:

Ներկանյութի մի քանի կաթիլ լուծույթի վրա դրվում է պիպետտով ֆիքսված պատրաստուկի վրա, որպեսզի ծածկի քսուքի ամբողջ մակերեսը. Pfeiffer fuchsin 1-2 րոպե, methylene blue 3-5 րոպե: Այնուհետև ներկը լվանում են ջրով, իսկ քսուքը չորացնում են զտիչ թղթի թերթիկների միջև կամ օդում։

2. Նկարչական բարդ մեթոդներօգտագործվում է ախտորոշման նպատակով՝ բացահայտելով միկրոբների տարբերակիչ կառուցվածքները այն դեպքերում, երբ վերջիններս պարզ ձևով ներկված չեն:

Բջջային պատերի քիմիական կազմով և կառուցվածքով տարբերվող մանրէաբանական բջիջները տարբերելու համար օգտագործվում է գունավորման բարդ մեթոդ՝ Գրամ ներկ:

Գրամ ներկող բակտերիաները բաժանվում են երկու խմբի՝ գրամ դրական և գրամ-բացասական։

Գրամ դրական բակտերիաներում (G+) բջջային պատի հաստությունը 15-80 նմ է, այն բաղկացած է մի քանի շերտերում տեղակայված պեպտիդոգլիկանից (60-90%-ից), սպիտակուցից (մոտ 1%) և լիպիդներից (մոտ 1%)։ Հայտնաբերվել են հատուկ տեսակի պոլիմերներ՝ տեյխոինաթթուներ, որոնք կովալենտորեն կապված են պեպտիդոգլիկանի հետ։ Պեպտիդոգլիկանի բարձր պարունակությունը ապահովում է սպիրտադիմացկուն համալիրի ձևավորում գենդիալ մանուշակի և յոդի հետ՝ ըստ Գրամի ներկման, ինչի արդյունքում դրանք գունավորվում են կապույտ-մանուշակագույն։

Գրամ-բացասական բակտերիաների (G-) բջջային պատի հաստությունը 10-15 նմ է, սակայն դրա կառուցվածքը շատ ավելի բարդ է, քան գրամ դրական բակտերիաներինը։ Այն հիմնված է կողմնորոշված ​​ներքին լիպիդների վրա (10-20%), որոնք մակերեսորեն տեղակայված պոլիսախարիդներով կազմում են լիպոպոլիսախարիդային շերտ։ Սպիտակուցները և պոլիսախարիդները խճանկարային կերպով դասավորված են բջջային պատի մակերեսին։ Պեպտիդոգլիկանը ներկայացված է մեկ շերտով՝ ընդամենը 2-3 նմ հաստությամբ (մոտ 5-10%), ընկած է լիպոպոլիսախարիդային շերտի տակ և սերտորեն ծածկում է պրոտոպլաստը։ Լիպիդների բարձր պարունակության պատճառով գրամ-բացասական բակտերիաների բջջապատը, ըստ գրամի ներկվելիս, գենդիալ մանուշակի և յոդի հետ կազմում է բարդույթ, որը քայքայվում է ալկոհոլային բուժման արդյունքում, ինչի արդյունքում բջիջները գունաթափվում են։

Միկրոօրգանիզմների անհավասար վերաբերմունքը Gram-ի նկատմամբ կապված է բակտերիաների բջջային պատի կառուցվածքի և քիմիական կազմի տարբերությունների հետ:

Գրամ-դրական միկրոօրգանիզմների թվում են կոկիները, բացիլները (սպոր առաջացնող ձողեր), ակտինոմիցետները, միկոբակտերիաները, կլոստրիդային բակտերիաները:

Գրամ-բացասական միկրոօրգանիզմները ներառում են բակտերիաներ (չսպորներ առաջացնող ձողեր), սպիրիլլա, սալմոնելլա, E coli, Pseudomonas, Azotbacter, vibrios:

Կան գրամ փոփոխական միկրոօրգանիզմներ, որոնց վերաբերմունքը գրամ ներկերի նկատմամբ փոխվում է դրանց զարգացման որոշակի փուլերում։ կյանքի ցիկլ. Քանի որ բջիջների՝ ըստ Գրամի ներկելու ունակությունը կախված է նրանց տարիքից, երիտասարդ մշակույթի բջիջները, հաճախ մեկ օրական, օգտագործվում են գրամ ներկելու համար: Համեմատության համար նշենք, որ որոշվող օբյեկտի հետ միաժամանակ նպատակահարմար է ներկել միկրոօրգանիզմների բջիջները, որոնց կապը գրամ բիծի հետ հայտնի է (հսկողություն):

Գրամ ներկումն իրականացվում է հետևյալ կերպ.

1. Ապակե սլայդի վրա պատրաստվում են միկրոօրգանիզմների կուլտուրայի երեք քսուք՝ կենտրոնում՝ ուսումնասիրված մշակույթի քսուք, ձախ և աջ կողմում՝ հսկիչ միկրոօրգանիզմների քսուք:

Քսուքները պետք է բարակ լինեն, որպեսզի բջիջները հավասարաչափ բաշխվեն ապակու մակերևույթի վրա և կուտակումներ չառաջանան, քանի որ ներկման արդյունքները կարող են կախված լինել քսուքի հաստությունից: Քսուքները չորացրեք օդում, ամրացրեք այրիչի բոցի վրա։

1. Կեղտոտեք քսուքները կարբոլիկ գենտիան մանուշակով: Բծերի վրա քսում են բավարար քանակությամբ ներկ, պահում են 1-2 րոպե, ներկը քամում են և առանց ջրով լվանալու քսուքները մշակում են Լուգոլի լուծույթով մինչև սևանալը (մոտ 1-2 րոպե):
2. Լուգոլի լուծույթը քամվում է և պատրաստումը մշակվում է 0,5-1 րոպե (խիստ) 96% էթիլային սպիրտով` ընկղմելով մեկ բաժակ սպիրտի մեջ կամ քսուքներին սպիրտ քսելով (ամբողջ ներկման արդյունքը կախված է քսուքի ժամանակից: Ալկոհոլով բուժված. անբավարար վերամշակմամբ, բոլոր բակտերիաները պահպանում են գունավորումը, ավելորդ գույնը գունաթափվում է):
3. Պատրաստուկը անմիջապես լվանում են ջրով և 1-2 րոպե ներկում ջրային մանուշակագույնով։ Ներկանյութը քամում են, պատրաստուկը լվանում ջրով, չորացնում ֆիլտր թղթով։
4. Պատրաստուկը մանրադիտակով է անցնում ընկղմման համակարգով։ Գրամ-դրական բակտերիաները ներկում են մուգ մանուշակագույն, գրամ-բացասական բակտերիաները՝ կարմիր կամ մուգ վարդագույն (լրացուցիչ ներկի գույնը):

Էքսպրես մեթոդ միկրոօրգանիզմների գրամ տիպի որոշման համար (ըստ Կրեգենսենի).

Մեթոդը հիմնված է գրամ-բացասական բակտերիաների բջիջների ոչնչացման վրա ալկալային միջավայրև ազատ ԴՆԹ-ի որոշում:

3% KOH լուծույթի կաթիլը կիրառվում է ապակե սլայդի վրա, որի մեջ մանրէային օղակով ավելացվում է ուսումնասիրված բակտերիաները (24-ժամյա մշակույթը թեք ագարից) և լավ խառնվում օղակով:

5-10 վրկ հետո, երբ օղակը շարժվում է ապակու երկայնքով, դրական արձագանքով, գրամ-բացասական բակտերիաների փորձարկման արդյունքում առաջանում է 1-2 սմ երկարությամբ ցեխոտ հետք, եթե լորձ չի առաջանում, ապա ռեակցիան բացասական, այնուհետև ստուգվում է գրամ դրական մշակույթը:

3. Հաշվետվություն մանրադիտակի արդյունքների մասին:

ա) մանրադիտակի համակարգ.

բ) մանրադիտակային մշակույթ;

գ) բջիջների նկարում մանրադիտակի տակ (նշվում է սպորների, պարկուճների առկայությունը):

4. Դասի բովանդակությունը գրի՛ր աշխատանքային գրքում:

Վերահսկիչ հարցեր

1. Ի՞նչ ներկերի լուծույթներ են օգտագործվում պարզ ներկման եղանակով:
2. Նկարագրեք բակտերիաների գրամ ներկման ընթացակարգը:
3. Ինչու՞ են բակտերիաները տարբեր կերպ ընկալում Գրամի բծերը:
4. Ո՞ր բակտերիաներն են գրամ դրական և որոնք են գրամ բացասական:?

ԼԱԲ #4

Սննդային միջավայրեր և դրանց պատրաստման տեխնիկա:

Դասի նպատակը.

Տիրապետել սննդանյութերի պատրաստման տեխնիկային:

Նյութական աջակցություն.

Չոր սնուցող միջավայր, պատրաստի կրիչ, էլեկտրական վառարան, ճաշ պատրաստելու պարագաներ, ցուցիչ թուղթ, 20% նատրիումի հիդրօքսիդ, 20% աղաթթու, փորձանոթներ, պիպետներ, Պետրի ամաններ:

Աշխատանքը կատարելուց առաջ ուսանողները կրկնում են միկրոօրգանիզմների սնուցումը, սնուցող միջավայրերը, սննդարար միջավայրերի դասակարգումը, սննդարար միջավայրին ներկայացվող հիմնական պահանջները:

Լաբորատոր աշխատանք կատարելիս սովորողները պատրաստում են սնուցող միջավայր։

Առաջադրանքներ.

1. Կարդացեք աշխատանքի նկարագրությունը:
2. Պատրաստել սնուցող միջավայր (ուսուցչի ցուցումով):
3. Դասի բովանդակությունը գրանցեք աշխատանքային գրքում:

Պատասխանել անվտանգության հարցերին.

Բացատրություն աշխատանքի համար

Մանրէաբանական լաբորատորիաները չեն կարող անել առանց սննդանյութերի միջավայրի: Որոշել միկրոօրգանիզմի տեսակը, հայտնաբերել վարակիչ հիվանդության հարուցիչը, այսինքն՝ հաստատել հիվանդության ախտորոշումը, արտադրել հատուկ պատրաստուկներ (պատվաստանյութեր, շիճուկներ), բուժել և կանխարգելել վարակիչ հիվանդությունները, ստանալ հակաբիոտիկներ, կատարել սանիտարահիգիենիկ միջոցառումներ։ և շրջակա միջավայրի օբյեկտների մանրէաբանական ուսումնասիրությունները, միսը և մսամթերքը մանրէաբանական ուսումնասիրելու համար դիմում են միկրոօրգանիզմների արհեստական ​​մշակմանը սննդանյութերի վրա:

Լաբորատորիաներում միկրոօրգանիզմները մշակվում են in vitro, այսինքն. ապակե փորձանոթներում, կոլբայի կամ այլ անոթների մեջ: In vitro մշակումը պահանջում է ենթաշերտեր, որոնք միկրոօրգանիզմներն օգտագործում են որպես սննդանյութեր:

Ըստ սննդանյութերի անհրաժեշտության՝ բոլոր միկրոօրգանիզմները կարելի է բաժանել երեք խմբի.

առաջին խումբ - ոչ հավակնոտ, աճող պարզ միջավայրերի վրա (փտած, կոկային և այլ միկրոօրգանիզմների մեծ մասը);

երկրորդ խումբ - դրանց աճի համար լրացուցիչ սննդանյութեր պահանջող՝ ամբողջական սպիտակուց (հավի կամ շիճուկ), վիտամիններ, ամինաթթուների որոշակի հավաքածու, հետքի տարրեր (տուբերկուլյոզ, տուլարեմիայի բացիլ, լեպտոսպիրա և այլն);

երրորդ խումբ - չի աճում արհեստական ​​սննդանյութերի վրա, բայց կարող է վերարտադրվել միայն կենդանի բջիջների ներսում (վիրուսներ, ռիկեցիաներ):

Սնուցող միջավայրին ներկայացվող պահանջները հետևյալն են.

1. Դրանք պետք է պարունակեն ազոտի և ածխածնի աղբյուրներ, անօրգանական միացություններ, հետքի տարրեր, ինչպես նաև աճի գործոններ, վիտամիններ, հիմնականում B խմբի:

Պեպտոնները օգտագործվում են որպես ազոտի համընդհանուր աղբյուր։ Պեպտոնները մսի կամ կազեինի հիդրոլիզի քայքայման արտադրանք են: Դրանք պարունակում են պոլիպեպտիդներ, ամինաթթուներ և էական հանքանյութեր։

Որպես ածխածնի համընդհանուր աղբյուր՝ ածխաջրեր (շաքարներ) ավելացվում են սննդարար միջավայրին՝ գլյուկոզա, կաթնաշաքար, սախարոզա, օրգանական թթուներ՝ կաթնաթթու, կիտրոն և այլն, պոլիհիդրային սպիրտներ՝ մանիտոլ, գլիցերին, սորբիտոլ և այլն։

2. Սնուցող միջավայրը պետք է ունենա միջավայրի որոշակի արձագանք: Այսպիսով, կոկային, փտած և պաթոգեն միկրոօրգանիզմների մեծամասնության համար օպտիմալ pH-ը 7.0 ... 7.4 է, իսկ բորբոս սնկերը, խմորիչները, կաթնաթթվային միկրոօրգանիզմները ավելի լավ են զարգանում pH 6.0-ում:

3. Սնուցող միջավայրը պետք է լինի ստերիլ, այսինքն. չեն պարունակում միկրոօրգանիզմներ.

4. Սնուցող միջավայրը պետք է լինի խոնավ, քանի որ միկրոօրգանիզմների սնուցումն իրականացվում է դիֆուզիայի և օսմոսի օրենքներով։ Շատ կրիչներ պետք է թափանցիկ լինեն, որպեսզի կարողանան տարբերել դրանց վրա միկրոօրգանիզմների աճը և դիտարկել ֆիզիոլոգիական փոփոխությունները, որոնք տեղի են ունենում նրանց կենսագործունեության արդյունքում:

Ըստ հետևողականության՝ սննդարար միջավայրերը լինում են հեղուկ, կիսահեղուկ և խիտ։ Խիտ միջավայր պատրաստելու համար հեղուկ միջավայրին ավելացվում է 2 ... 3% կոնցենտրացիայի ագար-ագար, կիսահեղուկի համար՝ 0,2 ... 0,3% կոնցենտրացիայի ագար-ագար:

Ըստ ծագման՝ առանձնանում են բնական և արհեստական ​​միջավայրերը։

Բնական աճող մեդիակենդանական ծագման արտադրանք են (արյուն, արյան շիճուկ, կաթ, լեղ…) կամ բուսական ծագում (բանջարեղեն, մրգեր, հացահատիկային ապրանքներ), որոնք օգտագործվում են միկրոօրգանիզմների մշակման համար՝ առանց հատուկ մշակման՝ դրանց բնական հատկությունների լիարժեք պահպանմամբ:

Արհեստական ​​մշակույթի մեդիապատրաստված բույսերի վերամշակման մթերքներից, մսից, կաթից, լյարդից և այլն, հաճախ դրանցում ածխաջրերի ավելացումով, սեղանի աղ, ներկեր և այլն։

Արհեստական ​​միջավայրերից առանձնանում են սինթետիկ միջավայրերը, այսինքն. ճշգրիտ հայտնի քիմիական կազմով միջավայրեր։ Արհեստական ​​սննդային միջավայրերը բաժանվում են պարզ, պայմանական և բարդ:

Պարզ սննդարար միջավայրերը ծառայում են միկրոօրգանիզմների մեծ մասի աճեցմանը: Բոլոր լրատվամիջոցների սպիտակուցային հիմքը սննդարար արգանակ է: Հիմնական սննդանյութի արգանակը պատրաստելու համար սովորաբար օգտագործվում է երկու եղանակ՝ մսի ջրի վրա՝ պատրաստի պեպտոնի հավելումով՝ մսային-պեպտոն արգանակ, ֆերմենտների միջոցով ֆերմենտների (տրիպսին - Հոթինգերի արգանակ, պեպսին -). Marten արգանակ) կամ թթուներ, նման միջավայրերը ավելի հարուստ են ամինաթթուներով:

Միջավայրում ընդհանուր և ամինային ազոտի պարունակությունը կախված է միս-պեպտոն միջավայրի ազոտի բաղադրությունից և մսի և այլ հիդրոլիզատներում սպիտակուցի քայքայման աստիճանից:

Միկրոօրգանիզմների մեծ մասի լավ աճի համար անհրաժեշտ է 100 սմ արգանակի մեջ պարունակել առնվազն 250 ... 300 մգ ընդհանուր ազոտ՝ ամինաթթուների առկայությամբ՝ այս քանակությամբ, միջինում մոտ 25 ... 30%:

Ամենատարածված պարզ սնուցող միջավայրերն են մս-պեպտոն արգանակը (MPB), միս-պեպտոն ագարը (MPA), միս-պեպտոն ժելատինը (MPG):

Մսի պեպտոն ագար (MPA) - օգտագործվում է միկրոօրգանիզմների ընդհանուր թիվը որոշելու համար:

Բոլոր երեք լրատվամիջոցների հիմքը մսաջուրն է, որը պատրաստվում է տավարի աղացած մսից, լցված ջրով և եփում 1,5 ... 2 ժամ, ֆիլտրացված և ստերիլիզացված 20 ... 30 րոպե 120 ° C ջերմաստիճանում:

Միս-պեպտոն արգանակ.1% պեպտոն և 0,5% սովորական աղ ավելացվում են 1 լիտր մսային ջրին, ալկալիզացնում են 10% NaOH լուծույթով մինչև pH 7,4, զտվում և մանրէազերծվում 15 ... 20 րոպե 0,1 ՄՊա ճնշման տակ:

Միս-պեպտոն ագար.Մանր կտրատած ագար-ագարը (2…3%) ավելացնում են միս-պեպտոն արգանակին, խառնուրդը տաքացնում են մինչև ագարը հալվի, pH-ը սահմանվում է 7,2…7,6, զտվում է բամբակյա շղարշով ֆիլտրով, լցնում փորձանոթների մեջ։ և ստերիլիզացվում է կոլբայի մեջ 20…30 րոպե 120˚С ջերմաստիճանում:

Անհրաժեշտության դեպքում MPA-ն տաքացվում է ջրային բաղնիքում մինչև ամբողջական հալվելը: Փորձանոթները տեղադրվում են հատուկ դարակներում՝ 10˚ անկյան տակ, և պնդացումից հետո ստացվում է այսպես կոչված թեք ագարը, որն օգտագործվում է մանրէների կուլտուրաների համար։ Հալած միս-պեպտոն ագարը նույնպես լցնում են Պետրիի ուտեստների մեջ։

Նմանապես պատրաստվում է միս-պեպտոն ժելատին:

Կատարման կարգը

2. Սննդային միջավայրի պատրաստում պատրաստի չոր սնուցող միջավայրից:

Չոր սնուցող միջավայր:Արտադրվում են պարզ, ընտրովի և դիֆերենցիալ ախտորոշիչ չոր սննդանյութեր: Չոր սննդանյութերը հիգրոսկոպիկ փոշիներ են, որոնք հեշտությամբ լուծվում են ջրի մեջ: Չոր կուլտուրայի կրիչները հասանելի են ամուր պտուտակային գլխարկներով ապակե տարաների մեջ:

Նման կրիչները պատրաստվում են ցուցումների համաձայն՝ փոշին լուծելով նշված քանակությամբ թորած ջրի մեջ, զտելով և 20 րոպե ստերիլիզացնելով 120°C ջերմաստիճանում։

Չոր սննդարար ագարլուծված չոր ագարին (5 գ ագար 100 մլ-ին), մի փոքր քանակությամբ խմորիչի էքստրակտ, մսաջուր ավելացվում է որպես աճի գործոն, զտվում է բամբակյա շղարշով ֆիլտրով, լցնում փորձանոթների կամ սրվակների մեջ և մանրէազերծվում: 0,1 ՄՊա-ով 20 րոպե:

3. Դասի բովանդակությունը գրի՛ր աշխատանքային գրքում:

Վերահսկիչ հարցեր

1. Որո՞նք են սննդանյութերի հիմնական պահանջները:
2. Որո՞նք են միկրոօրգանիզմների աճեցման համար նախատեսված առավել հաճախ օգտագործվող սննդանյութերը, դրանց նպատակը:
3. Որո՞նք են պարզ սննդանյութերի բաղադրիչները:

Մատենագիտություն

1. Գրադովա Ն.Բ. Ընդհանուր մանրէաբանության լաբորատոր սեմինար - M .: DeLi print, 2010 թ.
2. Մարմուզովա Լ.Վ. Մանրէաբանության, սանիտարական և հիգիենայի հիմունքները սննդի արդյունաբերության մեջ - Մ.: 2005 թ.
3. Mudretsova-Viss K. A. Մանրէաբանություն, սանիտարական և հիգիենա - M .: DL, 2010 թ.

«Մանրէաբանության, սանիտարական և հիգիենայի հիմունքներ».

ՄԵԹՈԴԱԿԱՆ ՑՈՒՑՈՒՄՆԵՐ

№№1-4 լաբորատոր աշխատանքներին

ՀԿ ուսանողների համար

34.17 Երշիկեղենի արտադրության գործընթացների օպերատոր.

__________________________________________________________________

Ժուկովա Լյուբով Անատոլիևնա, Մոսկվայի ՏԿ թիվ 28 պետական ​​\u200b\u200bինքնավար ուսումնական հաստատության միջնակարգ կրթության հատուկ առարկաների ուսուցիչ.

Պետական ​​ինքնավար ուսումնական հաստատություն

միջին մասնագիտական ​​կրթությունՄոսկվա քաղաք

Թիվ 28 տեխնոլոգիական քոլեջ

Հասցե՝ Մոսկվա, փող. Վերին դաշտեր, 27

Տպագրության է ներկայացվել 07.02.2012թ.

Թղթի չափսը՝ 60x90/16

Տպաքանակը՝ 16 օրինակ։

Տպագրվել է տպարանում.

Պետական ​​ինքնավար ուսումնական հաստատություն

միջնակարգ մասնագիտական ​​կրթություն Մոսկվայում