ԴԱՍԳՐՔԵՐ ԵՎ ՈՒՍՈՒՄՆԱՍԻՐԱԿԱՆ ՕԳՆՔ ՈՒՍԱՆՈՂՆԵՐԻ ՀԱՄԱՐ

ԲՈՒՀԵՐ

V. N. KISLENKO

ԱՇԽԱՏԱՆՔ

ԱՆԱՍՆԱԲՈՒԺՈՒԹՅԱՆ ՄԱՍԻՆ

ՄԱՆՐԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ

ԵՎ ԻՄՈՒՆՈԼՈԳԻԱ

Նախարարության կողմից հաստատված ԳյուղատնտեսությունՌԴ-ն

որակ ուսումնական ուղեցույցհամալսարանի ուսանողների համար

ուսումնական հաստատություններմասնագիտությամբ ուսանողներ

«Անասնաբուժություն»

ՄՈՍԿՎԱ «Կոլոսուս» 2005 թ

UDC 619: 579 (075.8) BBK 48ya73 K44

Խմբագիր Տ.Ս. Մոյաոչաևա
Գրախոսներ՝ անասնաբուժական գիտությունների դոկտոր, պրոֆեսոր V. I. Պլեշակովա(Veete ինստիտուտ

Օմսկի պետական ​​ագրարային համալսարանի ռինարային բժշկություն); անասնաբուժական գիտությունների դոկտոր, պրոֆեսոր ՏՏ. I. Ba

Ռիշնիկով(Ալթայի պետական ​​ագրարային համալսարանի անասնաբուժության ինստիտուտ)

Կիսլենկո Վ.Ն.

K44 սեմինար անասնաբուժական մանրէաբանության և իմունոլոգիայի վերաբերյալ: - M.: KolosS, 2005.- 232 p. Լ.: հիվանդ: - (Դասագրքեր և դասագրքեր բարձրագույն ուսումնական հաստատությունների ուսանողների համար). ISBN 5-9532-0332-2

Սեմինարը բաղկացած է երկու բաժնից. «Ընդհանուր մանրէաբանություն» բաժինը պարունակում է տեղեկատվություն մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատանքի կանոնների մասին, միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրման հիմնական մանրէաբանական, գենետիկական և իմունոլոգիական մեթոդների նկարագրությունը: «Վարակիչ հիվանդությունների հարուցիչներ» բաժնում թվարկված են լաբորատոր ախտորոշման մեթոդները, հարուցիչների տարբերակումը և տրված է օգտագործվող կենսաբանական պատրաստուկների ցանկը։

Տրված են ուսուցիչների համար գործնական պարապմունքների անցկացման ուղեցույցներ:

Կցվում են թեստերի հավաքածուներ էլեկտրոնային կրիչներով (CD-սկավառակ) ընդհանուր և մասնավոր մանրէաբանության, իմունոլոգիայի, ինչպես նաև տեսական դասընթացի համար:

«Անասնաբուժություն» մասնագիտությամբ բարձրագույն ուսումնական հաստատությունների ուսանողների համար.

ՆԵՐԱԾՈՒԹՅՈՒՆ

Անասնաբուժական լաբորատորիաները պետական ​​անասնաբուժական ծառայության հաստատություններ են, որոնց գործունեությունն ուղղված է անասնաբուծության բարեկեցության ապահովմանը, կենդանիների հիվանդությունների և մահացության կանխարգելմանը և վերացմանը, ինչպես նաև բնակչությանը կենդանիներին և մարդկանց ընդհանուր հիվանդություններից պաշտպանելուն: Անասնաբուժական լաբորատորիաներն ըստ նշանակման լինում են շրջանային, միջշրջանային (զոնալ), մարզային (տարածքային) և հանրապետական։

Անասնաբուժական լաբորատորիաների հիմնական խնդիրն է գյուղատնտեսական կենդանիների, այդ թվում՝ թռչունների, մորթատու կենդանիների, ձկների և մեղուների հիվանդությունների ճշգրիտ ախտորոշումը, ինչպես նաև մսի, կաթի և կենդանական և բուսական ծագման այլ սննդամթերքի հետազոտություն անցկացնելը։ . Կատարում են նաև լաբորատորիաները գիտական ​​աշխատանք, իրականացնել որոշ կենսախթանիչների, հակաբիոտիկների արտադրություն և այլն։

Լաբորատոր հետազոտության նյութը արյունն է, մեզը, խորքը, կաթը, կղանքը, կենդանու կյանքի ընթացքում ստացված թարախների (թարախի) պարունակությունը. պարենխիմային օրգանների կամ այլ հյուսվածքների կտորներ դրանց մահից հետո, շրջակա միջավայրի օբյեկտների նմուշներ (ջուր, օդ, հող, կեր, բույսեր, լվացումներ խնամքի պարագաներից): Լաբորատորիայում նյութը հետազոտվում է մանրէաբանական, շճաբանական, հյուսվածաբանական, կենսաքիմիական, սնկաբանական և թունաբանական մեթոդներով, որոնց համար. անհրաժեշտ պայմանները(հատուկ նշանակված տարածքներ, սարքավորումներ, միկրոկլիմա և այլն):

Լաբորատորիան զբաղեցնում է առանձին շենք, որը գտնվում է ճանապարհներից հեռու։ Այն պետք է ունենա ընդունելության բաժին, ախտաբանական, մանրէաբանական, շճաբանական, կենսաքիմիական և վիրուսաբանական բաժանմունքներ, ինչպես նաև թերմոստատների, սպասք լվանալու, ավտոկլավի հատուկ սենյակներ։ Սպասք լվանալու սենյակում կան սեղաններ, լվացարաններ, տաք և սառը ջրամատակարարում, գազ կամ էլեկտրական վառարան, լվացված սպասքի համար նախատեսված դարակներ, գոլորշիներ, արծնապակի լոգարաններ, ավազաններ և այլ տարաներ, թթվային լուծույթ ապակե անոթներում՝ պիպետները ախտահանելու համար, սլայդներ։ և այլ պարագաներ: Առանձին սենյակ հատկացված է մանրէաբանական խոհանոցին (միջավայր-ժայռ), որտեղ միկրոօրգանիզմների մշակման համար պատրաստվում են սննդանյութեր, իսկ մանրէազերծման համար պատրաստվում են սպասք։ Այստեղ պահարաններում պահում են ստերիլ սպասք և լավ փաթեթավորված քիմիական նյութեր, Բաղադրիչներ մշակութային լրատվամիջոցներ.

Ասեպտիկ պայմաններում աշխատանք կատարելու համար կահավորված են հատուկ մեկուսացված սենյակներ. տուփեր(անգլերեն տուփ - տուփ), որը բաղկացած է բուն տուփից և նախնական տուփից։ Նրանք նաև օգտագործում են աշխատասեղանի տուփեր, առարկաներ և օդ, որոնցում ախտահանվում են ուլտրամանուշակագույն լամպերով, ինչպես նաև լամինար հոսքի պահարաններ, որտեղ օգտագործվում է նաև օդի ակտիվ հեռացում:

Լաբորատոր կենդանիները (սպիտակ մկներ, ծովախոզուկներ, սպիտակ առնետներ, նապաստակներ և այլն) տեղադրվում են. վիվարիումներ.Որպես կանոն, վիվարիումը պարունակում է նաև առողջ դոնոր ոչխարներ, որոնց արյունն օգտագործվում է կոմպլեմենտի ֆիքսման ռեակցիայի (CFR) և սննդարար միջավայրերի պատրաստման համար։ Վարակված լաբորատոր կենդանիները պահվում են մեկուսացված սենյակում։

Բացի այդ, շենքում կան սենյակներ մասնագետների, սպասարկող անձնակազմի համար, կառավարչի աշխատասենյակ, գրադարան, կշռման սենյակ, հանդերձարան, պահեստ և այլն։

Պատշաճ մաքրությունը պահպանելու համար սենյակների հատակը ծածկված է լինոլեումով կամ սալիկներով։ Պատերն ու առաստաղները, որպես կանոն, հարթ են (առանց քիվերի և ձուլվածքների), կլորացված անկյուններով, բաց գույներով ներկված յուղաներկով։ Առաստաղները կարելի է սպիտակեցնել կրաքարով։ Ցանկալի է պատերը հատակից առաստաղ երեսպատել պլաստիկով կամ սալիկներով։

Լաբորատորիան պետք է ունենա տաք և սառը ջուր, կոյուղի, ոտքով աշխատող աղբամաններ, որոնք ամեն օր դատարկվեն, լվացվեն և ախտահանվեն, սրբիչներ, օճառ և ախտահանիչ լուծույթ: Սենյակները պարունակում են միայն ամենաանհրաժեշտ սարքավորումները՝ սեղաններ, փոքր տեխնիկա պահելու պահարան, ներկեր, ռեագենտներ, սպասք, գործիքներ և այլն։ Սեղանները սովորաբար տեղադրվում են պատուհանների դիմաց։ Նրանք պետք է լինեն կայուն, հարմարավետ, 80 սմ բարձրությամբ, եզրագծով։ Սեղանների մակերեսը ծածկված է պլաստմասե կամ լինոլեումով, ապակիով կամ սպիտակ հատուկ ներկով։ Սեղանին դրվում է մանրադիտակ, ինչպես նաև մանրէաբանական աշխատանքների համար անհրաժեշտ պարագաներ։

Մանրէաբանական հետազոտության մեթոդը, որպես կանոն, ներառում է մանրադիտակ, մեկուսացում և լաբորատոր կենդանիների (կենսաբանական նմուշ) հարուցչի մաքուր մշակույթի հատկությունների ուսումնասիրություն: Մանրէաբանական անալիզի արդյունքները, որոնք ստորագրված են բաժնի պետի կամ լաբորատորիայի տնօրենի կողմից, զեկուցվում են միայն պաշտոնատար անձանց՝ անասնաբույժին, կենդանաբանական այգու ինժեներին, ձեռնարկության ղեկավարին:

Մանրէաբանական լաբորատոր սարքավորումներ.

Լաբորատորիայում աշխատելու համար անհրաժեշտ են հետևյալ գործիքներն ու ապարատները՝ կենսաբանական ընկղմամբ մանրադիտակներ լրացուցիչ սարքերով (լուսավորիչ, ֆազային կոնտրաստ սարք, մութ դաշտի կոնդենսատոր և այլն), լյումինեսցենտ մանրադիտակներ, թերմոստատներ, ստերիլիզացման սարքավորումներ, pH մետրեր, սարքեր

թորած ջրի (թորիչ), ցենտրիֆուգների, տեխնիկական և անալիտիկ կշեռքների, զտիչ սարքավորումների (Seitz ֆիլտր և այլն), ջրային բաղնիքների, սառնարանների, բամբակյա շղարշի խրոցակների պատրաստման ապարատի, գործիքների հավաքածուի (մանրէաբանական օղակներ, սպաթուլաներ, ասեղներ), պինցետներ և այլն), լաբորատոր ապակյա իրեր (փորձանոթներ, կոլբաներ, Պետրիի ամաններ, ներքնակներ, սրվակներ, ամպուլներ, պաստերի և աստիճանավոր պիպետներ) և այլն։

Լաբորատորիան ունի մանրադիտակային պատրաստուկների ներկման հատուկ տեղ, որտեղ կան հատուկ ներկանյութերի լուծույթներ, սպիրտ, թթուներ, ֆիլտրի թուղթ և այլն: Յուրաքանչյուր աշխատավայր հագեցած է գազայրիչով կամ սպիրտային լամպով, ախտահանիչ լուծույթով տարաով: Համար ամենօրյա աշխատանքլաբորատորիան պետք է ունենա անհրաժեշտ սննդանյութեր, քիմիական ռեակտիվներ, ախտորոշիչ պատրաստուկներ և այլ լաբորատոր նյութեր: Խոշոր լաբորատորիաներում կան միկրոօրգանիզմների զանգվածային աճեցման, շճաբանական ռեակցիաների ստեղծման թերմոստատիկ սենյակներ։

Հետևյալ սարքավորումները նախատեսված են կուլտուրաների մշակման, պահպանման, լաբորատոր ապակյա իրերի ստերիլիզացման և այլ նպատակներով.

1. 
   Թերմոստատ. Սարքավորում, որը պահպանում է մշտական ​​ջերմաստիճանը: Շատ միկրոօրգանիզմների բազմացման համար օպտիմալ ջերմաստիճանը 37 «C է: Թերմոստատները օդն ու ջուրն են:
2. 
   Միկրոանաերոստատ. Անաէրոբ պայմաններում միկրոօրգանիզմների աճեցման սարք։
3. 
   Սառնարաններ. Օգտագործվում է մանրէաբանական լաբորատորիաներում՝ միկրոօրգանիզմների, սննդարար միջավայրերի, արյան, շիճուկների, պատվաստանյութերի և այլ կենսաբանական պատրաստուկների կուլտուրաները պահելու համար մոտ 4 °C ջերմաստիճանում: Պատրաստուկները 0°C-ից ցածր պահելու համար նախագծված են ցածր ջերմաստիճանի սառնարաններ, որոնցում ջերմաստիճանը պահպանվում է -20°C և ցածր:
4. 
   Ցենտրիֆուգներ. Օգտագործվում է միկրոօրգանիզմների, էրիթրոցիտների և այլ բջիջների նստեցման, անհամասեռ հեղուկների (էմուլսիաներ, կախոցներ) տարանջատման համար։ Լաբորատորիաներում օգտագործվում են տարբեր աշխատանքային ռեժիմներով ցենտրիֆուգներ։
5. 
   Չորացման և ստերիլիզացման պահարան (Pasteur վառարան): Նախատեսված է լաբորատոր ապակյա իրերի և այլ նյութերի օդային ստերիլիզացման համար:
6. 
   Գոլորշի ստերիլիզատոր (ավտոկլավ): Նախատեսված է ճնշման տակ գոլորշու ստերիլիզացման համար։ Մանրէաբանական լաբորատորիաներում օգտագործվում են տարբեր մոդելների ավտոկլավներ (ուղղահայաց, հորիզոնական, ստացիոնար, շարժական)։

Մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատանքի կանոններ.

Մանրէաբանը հիմնականում զբաղվում է միկրոօրգանիզմների մաքուր կուլտուրաներով, որոնք մեկ բջջի սերունդ են: Քանի որ լաբորատորիայում օդում և առարկաների մակերեսին միշտ կան միկրոօրգանիզմների բազմազանություն (սեղանների, գործիքների, գործիքների, ինչպես նաև հագուստի, ձեռքերի և այլն), դուք պետք է մշտապես հոգ տանեք, որ պահպանեք մաքրությունը: ուսումնասիրվող մշակույթները: Հետևաբար, երբ աշխատում է մանրէաբանական լաբորատորիապետք է խստորեն պահպանվեն որոշակի կանոններ, որոնցից մեկը մաքրության պահպանումն է, ներառյալ բոլոր տարածքների ամենօրյա հիգիենիկ մաքրումը:

Կան ախտահանման տարբեր մեթոդներ՝ օդում և մակերեսների վրա միկրոօրգանիզմները ոչնչացնելու համար:

Լաբորատորիայում օդը մասնակիորեն մաքրվում է օդափոխության միջոցով: Օդափոխումը կտրուկ նվազեցնում է օդում միկրոօրգանիզմների քանակը, հատկապես, երբ սենյակից դուրս և ներսում ջերմաստիճանի զգալի տարբերություն կա: Օդափոխման տևողությունը առնվազն 30 ... 60 րոպե է:

Օդի ախտահանման առավել արդյունավետ և ամենատարածված մեթոդը ուլտրամանուշակագույն ճառագայթման (UVR) ազդեցությունն է, որն ունի բարձր հակամանրէային ազդեցություն և հանգեցնում է ոչ միայն վեգետատիվ բջիջների, այլև միկրոօրգանիզմների սպորների մահվան: Թույլ թափանցող ուժի պատճառով ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումը չի անցնում սովորական ապակիով և հեշտությամբ կլանում է փոշու մասնիկները։ Հետևաբար, ստերիլիզացման համար ազդեցության ժամանակը 30 րոպեից մինչև մի քանի ժամ է՝ կախված օդի աղտոտվածության աստիճանից։

Որպես ուլտրամանուշակագույն ճառագայթման աղբյուր օգտագործվում են մանրէասպան լամպերը (UFL): Դրանցում արտանետիչը էլեկտրական աղեղ է, որը առաջանում է ցածր ճնշման սնդիկի գոլորշու մեջ և ուլտրամանուշակագույն շրջանում արձակում է գծային սպեկտր, որի էներգիայի ավելի քան 80%-ը ընկնում է 2,5 նմ ալիքի երկարության վրա։

Բակտերիասպան լամպը ապակե խողովակ է, որը տեղադրված է երկու էլեկտրական կոնտակտների միջև և միացված է ցանցին խեղդիչի միջոցով: Խողովակը պատրաստված է հատուկ ապակուց, որը փոխանցում է 2,5 նմ ալիքի երկարությամբ բոլոր ճառագայթները և հետաձգում 2 նմ-ից կարճ ալիքի երկարությամբ ճառագայթումը։ Պետք է հիշել, որ ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումը ճառագայթումից անմիջապես հետո առաջացնում է աչքերի եղջերաթաղանթի սուր բորբոքում` բնորոշ լակրիմացիայով և ֆոտոֆոբիայով: Ուստի ուղղակի կամ արտացոլված ուլտրամանուշակագույն ճառագայթների աչքերի վրա չազդելու համար օգտագործվում են ակնոցներ։ Անհնար է լինել փոքր սենյակներում, որտեղ մանրէասպան լամպը միացված է։

Մանրէաբանական լաբորատորիայում հատակը, պատերը և կահույքը մաքրվում են տարբեր ախտահանիչների լուծույթներով։ Փոշեկուլով հեռացվում է փոշին և միկրոֆլորայի զգալի մասը առարկաներից: Որպես ախտահանիչ լուծույթներ, առավել հաճախ օգտագործվում է 0.5 ... 3%: ջրի լուծույթքլորամին. Առանձնահատուկ ուշադրություն պետք է դարձնել սեղանի մակերեսը ախտահանելու համար, որի վրա իրականացվում է միկրոօրգանիզմների հետ աշխատանք: Այն պետք է սրբել ախտահանիչ լուծույթով և՛ աշխատանքից առաջ, և՛ հետո։ Լրացուցիչ տարրերն արգելված են աշխատասեղանին: Բոլոր ռեակտիվները և լուծույթները պետք է լինեն պիտակավորված և խստորեն սահմանված վայրերում: Լաբորատորիայում չի թույլատրվում ուտել, խմել և ծխել: Աշխատանքը պետք է լինի խալաթով:

Լաբորատոր պայմաններում միկրոօրգանիզմները աճեցվում են պինդ և հեղուկ սննդարար միջավայրերի վրա, որոնք լցնում են փորձանոթների, կոլբայի կամ Պետրի ափսեների մեջ։ Սպասքները և մշակութային կրիչները նախապես ստերիլիզացված են: Միկրոօրգանիզմների բջիջների ներմուծումը ստերիլ միջավայր կոչվում է սերմացում կամ պատվաստում: Միկրոօրգանիզմների ցանքը (կամ վերացանքը) պահանջում է որոշակի կանոնների խստիվ պահպանում՝ ուսումնասիրվող մշակույթը օտար միկրոօրգանիզմների աղտոտումից պաշտպանելու համար:

Ստերիլ միջավայրում միկրոօրգանիզմների պատվաստումը լավագույնս կատարվում է հատուկ սենյակներում՝ տուփերում: Բռնցքամարտը փոքր մեկուսացված սենյակ է, որը բաժանված է երկու մասի միջնորմով։ Տուփի հիմնական աշխատանքային սենյակ մուտք է գործում գավթի միջով, որն ունի լոգարիթմական դուռ, որը բացառում է օդի կտրուկ շարժումը և, հետևաբար, արտաքին միկրոֆլորայի ներմուծումը։ Բռնցքամարտի սարքավորումները ներառում են հեշտ մաքրվող մակերևույթով սեղան, աթոռ, գազի կամ ալկոհոլային այրիչներ, հատուկ տակդիրի մեջ տեղադրված մանրէասպան լամպ կամ տուփի առաստաղին տեղադրված: Տուփում հարմար է ունենալ կոմունալ սեղան, որի վրա կտեղադրվեն աշխատանքի ընթացքում անհրաժեշտ իրեր։ Բոլոր տուփային սարքավորումները, դրա պատերը, հատակը և առաստաղը պարբերաբար լվանում և սրբում են ախտահանիչ լուծույթներով: Աշխատանքից առաջ տուփը 40...60 րոպե ճառագայթվում է մանրէասպան լամպով։

Ցանքից հետո փորձանոթները կամ այլ անոթները, որոնցում միկրոօրգանիզմներ են աճեցվում, տեղադրում են թերմոստատներում, որտեղ թերմոստատների օգնությամբ պահպանվում է մշտական ​​ջերմաստիճան։ Մանրէաբանական կուլտուրաներ պարունակող անոթները, որոնք պետք է հեռացվեն, ավտոկլավացվում են՝ բջիջները լվանալուց առաջ սպանելու համար: Ախտահանող լուծույթը լցվում է խիտ միջավայրով սպասքի մեջ, որը մեկ օր անց հանվում է, և սպասքը լվանում է։ Միկրոօրգանիզմների կուլտուրաների հետ անզգույշ վարվելը հանգեցնում է բակտերիալ աերոզոլի ձևավորմանը, որը վտանգ է ներկայացնում աշխատողների առողջության համար:

Լաբորատորիաների, ինչպես նաև մանրէաբանության ամբիոնների բոլոր աշխատակիցները, ասպիրանտները, ուսանողները, ովքեր գալիս են դասերի և աշխատում գիտական ​​ուսանողական շրջանակներում, նախքան վարակիչ նյութերի հետ աշխատանքը սկսելը (ախտածին մանրէների կուլտուրաներ, փորձարարական վարակված կենդանիների դիակներ, հիվանդ կենդանիների արտազատումներ, արյուն և այլն) ) պարտավոր են ծանոթանալ և խստորեն պահպանել անասնաբուժական մանրէաբանական լաբորատորիաներում աշխատանքի և անվտանգության նախազգուշական միջոցների հետևյալ կանոնները.

լաբորատորիա մտնել միայն հատուկ հագուստով` խալաթով, սպիտակ գլխարկով կամ շարֆով: Զգեստը պետք է ամուր կոճկած լինի, մազերը խցկված լինեն գլխարկի տակ;

Լաբորատորիա մի բերեք որևէ առարկա կամ սնունդ: Պայուսակները և պայուսակները ծալվում են հատուկ նշանակված վայրում.

լաբորատորիայում խստիվ արգելվում է ուտել, խմել և ծխել.

յուրաքանչյուր աշխատակցի (ուսանողի) որոշակի թվով հատկացվում է աշխատատեղ, մանրադիտակ և այլ պարագաներ.

աշխատավայրը պետք է ունենա սարքավորումներ միայն կոնկրետ առաջադրանքի համար: Սովորաբար սա ներկերի հավաքածու է, թորած ջրով տափաշիշ, արտահոսքի բաժակ, մաքուր և օգտագործված ակնոցներով բանկա, մանրէաբանական օղակ, եռոտանի, ախտահանող լուծույթով բանկա;

Աշխատանքն սկսելուց առաջ անհրաժեշտ է ստուգել տեխնիկայի, սպասքի, գազի այրիչների (ալկոհոլային լամպեր) և այլնի առկայությունը և սպասարկումը: Դիտարկված թերությունների և անսարքությունների մասին պետք է տեղեկացնել պատասխանատու անձին, իսկ դասարանում՝ ուսուցչին.

Պայթյունից խուսափելու համար անհնար է վառել մեկ ոգեղեն լամպը (կամ գազի այրիչը) մյուսից. օգտագործել միայն լուցկիներ;

մետաղական և այլ առարկաների հետ մի հպեք էլեկտրական ցանցի լարերին և հպվող մասերին.

ուսանողներն առանց ուսուցչի կամ ուղեկցողների իմացության չպետք է միացնեն էլեկտրական սարքերը և սարքավորումները.

ուսանողները սկսում են կատարել առաջադրանքը միայն ուսուցչի թույլտվությամբ. աշխատանքի ընթացքը պետք է խստորեն համապատասխանի ուսումնասիրվող մեթոդին.

յուրաքանչյուրը՝ աշխատողը և ուսանողը պետք է աշխատավայրում պահպանեն կոկիկություն, մաքուր պահեն աշխատավայրը և սարքավորումները.

մարզումների ժամանակ օգտագործվող նյութը համարվում է հատկապես վտանգավոր.

Հետազոտության ուղարկված նյութը բացելիս պետք է զգույշ լինել. բանկաների արտաքին մասը մաքրվում է ախտահանող լուծույթով և տեղադրվում է միայն սկուտեղների կամ կուվետների վրա.

Ստացված նյութի ուսումնասիրության և բակտերիալ մշակույթների հետ աշխատելիս նրանք պահպանում են մանրէաբանական պրակտիկայում ընդհանուր ընդունված տեխնիկական մեթոդները, որոնք բացառում են աշխատողի վարակվելու հնարավորությունը.

Վարակիչ հիվանդությունների պաթոգենների ուսումնասիրման գործընթացում ուսանողները պետք է սովորեն անվտանգության կանոնակարգերի առանձնահատկությունները հատուկ պաթոգենների հետ աշխատելիս.

Փորձարարական (լաբորատոր) կենդանիների դիակների դիահերձումն իրականացվում է հատուկ հագուստով հագեցած սեղանի վրա՝ օգտագործելով անհրաժեշտ գործիքներայդ նպատակով օգտագործելով մոմով (կամ պարաֆինով) լցված կուվետ: Բացելուց հետո արգելվում է գործիքներ դնել սեղանին. դրանք տեղադրվում են ախտահանիչ լուծույթով բաժակի մեջ կամ այրվում այրիչի կրակի վրա;

հեղուկ վարակված նյութի հետ աշխատելիս օգտագործեք ռետինե փուչիկներ՝ կապված պիպետտի հետ;

եթե աշխատանքի ընթացքում պաթոլոգիական նյութը պատահաբար հայտնվում է սեղանի վրա, այն անմիջապես հանվում է ախտահանիչ լուծույթով թրջված շվաբրով։ Մաշկի, կոնյուկտիվայի, բերանի խոռոչում վարակված նյութի հետ շփման դեպքում շտապ միջոցներ են ձեռնարկվում ախտահանման համար.

Աշխատանքի վերջում ախտահանվում են պաթոլոգիական նյութը, օգտագործված միկրոօրգանիզմների կուլտուրաները, գործիքները և սեղանի մակերեսը.

Դասի վերջում սովորողները պետք է ուսուցչին հանձնեն բակտերիաների կուլտուրաներ և այլ նյութեր և կարգի բերեն աշխատավայրը: Խստիվ արգելվում է լաբորատորիայից դուրս հանել կուլտուրաներով, պատրաստուկներով (քսուքներով) և այլ իրեր ունեցող խողովակներ.

Հետագա աշխատանքի համար անհրաժեշտ պաթոլոգիական նյութերը և բակտերիալ կուլտուրաները պահվում են փակ սառնարանում կամ պահարանում.

Լաբորատորիայից դուրս գալուց առաջ դուք պետք է հանեք խալաթը, մանրակրկիտ լվացեք ձեռքերը և բուժեք յոդացված ալկոհոլով: Արգելվում է լաբորատորիայից դուրս գալ խալաթներով.

Մանրէաբանության դասընթացներում աշխատանքի կանոնների և անվտանգության նախազգուշական միջոցների պահպանումը վերահսկվում է ուղեկցողների կողմից: Մանրէաբանության ամբիոնում աշխատելիս ուսանողները առաջին դասին ծանոթանում են անվտանգության նախազգուշական միջոցներին, որոնք ստորագրում են ամսագրում:

Պահպանելով վերը նշված կանոնները՝ լաբորատորիայում աշխատողը ապահովում է մանիպուլյացիաների ստերիլությունը և կանխում ներլաբորատոր և արտալաբորատոր աղտոտման առաջացումը:

Լաբորատոր գրառումների պահպանում. Նոթատետր համար լաբորատոր աշխատանքծառայում է որպես փաստաթուղթ, որը թույլ է տալիս վերահսկել ստացված տվյալների ճշգրտությունը: Այն պետք է պարունակի տվյալ աշխատանքի կատարման հետ կապված տեղեկատվություն: Գրառումը պետք է պահպանվի կոկիկ, հստակ և որոշակի հերթականությամբ, օրինակ՝ 1) փորձի անվանումը, դրա տեղադրման և ավարտի ամսաթիվը. 2) ուսումնասիրության օբյեկտ. 3) փորձի անցկացման պայմանները. 4) կիրառվող վերլուծության մեթոդի հիմնական սկզբունքը. 5) փորձի արդյունքները.

Ստացված արդյունքները մանրամասն նկարագրված են, թվային նյութն ամփոփվում է աղյուսակներում, անհրաժեշտության դեպքում՝ գրաֆիկներով, դիագրամներով, գծագրերով։ Յուրաքանչյուր լաբորատոր աշխատանք պետք է ավարտվի աշխատանքային գրքում գրանցված իր դիտարկումներով և եզրակացություններով:

Աշխատանքի ընթացքում ուսանողները տիրապետում են միկրոսկոպիայի տեխնիկային և մեթոդներին, ծանոթանում միկրոօրգանիզմների տարբեր խմբերի ներկայացուցիչների մորֆոլոգիայի հետ, տիրապետում են մաքուր մշակույթների մեկուսացման և դրանց նույնականացման մոտեցումներին, ուսումնասիրում են շրջակա միջավայրի պայմանների և գործոնների ազդեցությունը աճի վրա: և միկրոօրգանիզմների տարբեր թափոնների ձևավորում և ծանոթանալ բակտերիաների գենետիկական հետազոտության որոշ մեթոդների:

ԸՆԴՀԱՆՈՒՐ ՄԱՆՐԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ

Կրթության դաշնային գործակալություն

Պետական ​​ուսումնական հաստատություն

«Իրկուտսկ Պետական ​​համալսարան»

ՄԱՆՐԵՍԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ ՄԱՍԻՆ ՓՈՔՐ ԱՐՄԵՆՊՐԵՍ

Ուսումնական օգնություն

Իրկուտսկ 2009 թ

UDC 579 (076.5)

Հրատարակվել է Իրկուտսկի պետական ​​համալսարանի խմբագրական և հրատարակչական խորհրդի որոշմամբ

Ժիլկինի սեմինար մանրէաբանության վերաբերյալ. Դասագիրք-մեթոդ. նպաստ ուսանողների համար. ավելի բարձր դասագիրք հաստատություններ «Մանրէաբանություն», «Կենսաբանություն» և «Ֆիզիոլոգիա» մասնագիտությունների գծով։

6. Մանրէաբանական զանգվածը չպետք է աղտոտի ձեռքերը, սեղանը և շրջակա առարկաները: Թափված մանրէաբանական կախոցը չեզոքացվում է ախտահանիչ միջոցների միջոցով:

7. Աշխատանքի ավարտից հետո մշակույթները հանձնվում են ուսուցչին, սերմնավորված փորձանոթներն ու բաժակները տեղադրվում են թերմոստատի մեջ։

8. Մանրէաբանական օղակները, ասեղները, պինցետները և այլ մետաղական առարկաները միկրոօրգանիզմների հետ շփվելուց հետո այրվում են սպիրտային լամպի բոցի մեջ և տեղադրվում հատուկ տակդիրի մեջ:

9. Օգտագործված սլայդներն ու ծածկոցները, պիպետները, սպաթուլաները և այլն տեղադրվում են կարբոլաթթվի կամ այլ ախտահանիչ լուծույթների 3–5% լուծույթում:

10. Փորձանոթներում, Պետրի ափսեներում և այլն ծախսած կուլտուրաները օրվա ընթացքում չեզոքացվում են ախտահանիչ լուծույթներով, ապա եփում են սպասքը և լվանում։

11. Անձնական հիգիենան պետք է խստորեն պահպանել՝ աշխատանքն ավարտելուց հետո ձեռքերը մանրակրկիտ լվացեք օճառով և ջրով։

12. Էլեկտրական սարքերի և քիմիական նյութերի հետ աշխատելիս անհրաժեշտ է պահպանել անվտանգության նախազգուշական միջոցները:

ԿՐԹՈՒԹՅԱՆ ԴԱՇՆԱԿԱՆ ԳՈՐԾԱԿԱԼՈՒԹՅՈՒՆ

ԿԱՐԱՉԱԵՎ-ՉԵՐԿԵՍ ՊԵՏԱԿԱՆ ՏԵԽՆՈԼՈԳԻԱԿԱՆ ԱԿԱԴԵՄԻԱ

Անասնաբուծական մթերքների արտադրության տեխնոլոգիայի բաժին

ՄԱՆՐԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ

ՄԵԹՈԴԱԿԱՆ ՑՈՒՑՈՒՄՆԵՐ

ուսանողների համար լաբորատոր և գործնական պարապմունքների համար

գյուղատնտեսական ինստիտուտ

Չերքեսկ - 2010 թ

Կազմվել է օրինակելի և աշխատանքային ծրագրեր«Մանրէաբանություն» դասընթացին համապատասխան պետական կրթական չափորոշիչբարձրագույն մասնագիտական ​​կրթություն 110305 «Գյուղմթերքների արտադրության և վերամշակման տեխնոլոգիա» և 110201 «Ագրոնոմիա» (2000 թ.) մասնագիտությամբ։

Քննարկվել է TPPZH վարչության նիստում (02.07.2009թ.)

Հաստատված է Ագրարային ինստիտուտի մեթոդական հանձնաժողովի կողմից (01.01.2001թ. թիվ 6 արձանագրություն). Հրապարակվել է Կարաչայ-Չերքեսի պետական ​​տեխնոլոգիական ակադեմիայի ուսումնամեթոդական խորհրդի որոշմամբ (01.01.2001թ. արձանագրություն)

Կազմեց՝Կենսաբանական գիտությունների թեկնածու, դոցենտ , Գյուղատնտեսական գիտությունների թեկնածու, դոցենտ , օգնական

Գրախոսներ. – կենսաբանական գիտությունների թեկնածու

Ագրոնոմիական ամբիոնի դոցենտ

«ԹՊՓԺ» ամբիոնի դոցենտ

Խմբագիր՝ բ.գ.թ. գիտություններ, դոց
Բովանդակություն

Ներածություն……………………………………………………………………………….. 6

1. Մանրադիտակ…………………………………………………………………….. 7

1.1 Լույսի դաշտային մանրադիտակ………………………………………………… .7

1.1.1. Մանրադիտակի սարք………………………………………………………………………………………

2. Աշխատանք միկրոօրգանիզմների հետ ……………………………………………………… 8

2.1.Պատրաստումների պատրաստման եղանակները……………………………………………………………………………………………

2.1.1 Պատրաստուկների համար մշակույթ վերցնելու տեխնիկա………………………………… 8

2.1.2. Միկրոօրգանիզմների կենդանի բջիջների ուսումնասիրությունը մեթոդով

մանրացված կաթիլ…………………………………………………………………………………………………

2.1.3. Միկրոօրգանիզմների ֆիքսված պատրաստուկներ………………………… 9

Լուսավորման համակարգը գտնվում է բեմի տակ։ Հայելին արտացոլում է իր վրա ընկած լույսը կոնդենսատորի մեջ: Հայելու մի կողմը հարթ է, մյուսը՝ գոգավոր։ Կոնդենսատորով աշխատելիս անհրաժեշտ է օգտագործել հարթ հայելի։ Գոգավոր հայելին օգտագործվում է առանց խոշորացման նպատակներով առանց կոնդենսատորի աշխատելու ժամանակ: Կոնդենսատորը բաղկացած է 2-3 կարճ ֆոկուս ոսպնյակներից, հավաքում է հայելից եկող ճառագայթները և ուղղում դեպի օբյեկտ։ Սուզման համակարգերի հետ աշխատելիս անհրաժեշտ է կոնդենսատոր: Կոնդենսատորն ունի ծիածանաթաղանթ (ծաղկաթերթ) դիֆրագմ՝ բաղկացած կիսալուսնաձեւ պողպատե թիթեղներից։

Ներկված պատրաստուկները դիտարկվում են գրեթե ամբողջությամբ բաց դիֆրագմայով, չբիծը՝ դիֆրագմայի կրճատված բացվածքով:

Տեսապակի- բազմաշերտ ոսպնյակների համակարգ, որի որակը որոշում է օբյեկտի պատկերը: Արտաքին ոսպնյակը կոչվում է առջևի ոսպնյակ, այն ապահովում է խոշորացում: Մնացած ոսպնյակները կատարում են օպտիկական թերությունները շտկելու գործառույթները։

Ոսպնյակները չոր են և ընկղմված (ընկղմում): Չոր ոսպնյակների հետ աշխատելիս օբյեկտի առջևի ոսպնյակի և ուսումնասիրվող առարկայի միջև օդ կա: V = 90x ընկղման օբյեկտի հետ աշխատելիս ծածկույթի ապակու և օբյեկտիվ ոսպնյակների միջև դրված է մայրու յուղ, որի բեկման ինդեքսը մոտ է ապակու բեկման ինդեքսին՝ համապատասխանաբար 1,515 և 1,52: Ոսպնյակներն ունեն 8x, 40x և 90x խոշորացում։

Ակնոցծառայում է որպես մարդու աչքի «ոսպնյակների» (ոսպնյակների) անմիջական շարունակություն։

Ակնոցը բաղկացած է երկու ոսպնյակից՝ վերինը՝ աչքի և ստորին՝ կոլեկտիվ, փակված մետաղական շրջանակի մեջ։ Ակնոցի նպատակն է մեծացնել պատկերը, որը տալիս է ոսպնյակը: Նրա շրջանակի վրա փորագրված է ակնոցի խոշորացումը։ Ակնոցների աշխատանքային խոշորացումը տատանվում է 4x-ից մինչև 15x:

Ակնոցները լինում են տարբեր տեսակների, և ընտրությունը կախված է ոսպնյակից: Մանրադիտակի հետ երկար աշխատելիս օգտագործվում է երկդիտակ կցորդ, քանի որ այն բարելավում է օբյեկտի տեսանելիությունը, նվազեցնում պատկերի պայծառությունը և դրանով իսկ պահպանում տեսողությունը։

Աշխատեք միկրոօրգանիզմների հետ

2.1. Պատրաստման մեթոդներ

2.1.1. Մշակույթի պատրաստման տեխնիկա

Բոցի մեջ այրված մանրէաբանական ասեղը փորձանոթից փոքր քանակությամբ մանրէաբանական զանգված է վերցնում։ Եթե ​​մշակույթը հեղուկ է, ապա դրա համար ավելի լավ է օգտագործել հանգույց, այլ դեպքերում՝ ասեղ։

2.1.2. Մանրացված կաթիլային մեթոդով միկրոօրգանիզմների կենդանի բջիջների ուսումնասիրություն

Ուսումնասիրեք միկրոօրգանիզմների կենդանի բջիջները՝ օգտագործելով մանրացված կաթիլային մեթոդը, նախապես ներկեք առարկան ողջ կյանքի ներկերով. կենսական գունավորում(ներկանյութեր՝ մեթիլեն կապույտ, չեզոք կարմիր՝ 0,001-ից 0,0001% կոնցենտրացիաներով):

Պատրաստուկները մանրադիտակով են՝ մի փոքր մգացնելով տեսադաշտը; կոնդենսատորը մի փոքր իջեցված է, լույսի հոսքը կարգավորվում է գոգավոր հայելու միջոցով: Նախ, նրանք օգտագործում են ցածր խոշորացում՝ 8x ոսպնյակ, անկման եզրը հայտնաբերելուց հետո տեղադրում են 40x կամ ընկղմվող ոսպնյակ (90x):

Մանրացված կաթիլային մեթոդի դեպքում ծորակի ջրի կաթիլը կիրառվում է մաքուր ապակե սլայդի վրա: Դրան ավելացնում են կուլտուրա և խառնում ջրի հետ։ Ավելորդ ջուրը հանվում է ֆիլտրի թղթով։ Ընկղման ոսպնյակ օգտագործելիս մայրու յուղի կաթիլը դրվում է ապակե սլայդի վրա և մանրադիտակով:

2.1.3. Միկրոօրգանիզմների ֆիքսված պատրաստուկներ

Ֆիքսված պատրաստուկները ներառում են կենդանի բջիջների այնպիսի մշակում, որը հնարավորություն է տալիս արագորեն ընդհատել օբյեկտի կենսագործունեության ընթացքը՝ պահպանելով նրա նուրբ կառուցվածքը։ Ֆիքսացիայի արդյունքում բջիջները ամուր կպչում են ապակին և ավելի լավ ներկվում։ Ֆիքսացիան անհրաժեշտ է պաթոգեն միկրոօրգանիզմների հետ աշխատելիս (անվտանգության նկատառումներով):

Քսուք պատրաստում.Ծորակի ջրի մի կաթիլը կիրառվում է մաքուր, առանց ճարպի ապակե սլայդի վրա: Ապակու յուղազերծման համար օգտագործեք էթիլային սպիրտի և ծծմբային եթերի խառնուրդ 1:1 հարաբերակցությամբ: Կալցինացված մանրէաբանական ասեղով կուլտուրայի խողովակից վերցվում է փոքր քանակությամբ մանրէաբանական զանգված և ավելացվում մի կաթիլ ջրի մեջ։ Կաթիլը խնամքով քսվում է ապակու վրա օղակով մոտ 4 սմ2 տարածքի վրա:

Եթե ​​կախոցը հաստ է, ապա այն նախ նոսրացնում են ջրով։ Դա անելու համար մի փոքր կախոց է վերցվում կալցինացված օղակով և տեղափոխվում ջրի կաթիլ մեկ այլ ապակե սլայդի վրա: Նորմալ խտության կախոցը բարակ շերտով քսում են ապակու վրա, այնուհետև քսուքը չորացնում են օդում սենյակային ջերմաստիճանում կամ ցածր ջերմությամբ՝ պատրաստուկը պահելով այրիչի կրակից բարձր: Չորացման ընթացքում դեղամիջոցի ուժեղ տաքացումը խորհուրդ չի տրվում խուսափել սպիտակուցի կոագուլյացիայից, որը խաթարում է բջիջների կառուցվածքն ու ձևը: Չորացրած պատրաստուկը ամրագրված է:

Քսուք ֆիքսացիա.Նրան իրականացնում են այրիչի բոցի վրակամ քիմիական նյութերի օգնությամբմիություններ։Առաջին դեպքում դեղը դանդաղորեն իրականացվում է երեքից չորս անգամ ներքևի կողմով այրիչի կրակի վրա, երկրորդ դեպքում օգտագործվում են քրոմի միացություններ՝ ֆորմալին, օսմիկ թթու, ացետոն: Ֆիքսացիայի տարածված մեթոդներից է պատրաստուկի մշակումը 96%-անոց սպիրտով կամ հավասար ծավալներով էթիլային սպիրտի և եթերի խառնուրդով (Նիկիֆորովի հեղուկ)։ Դրա համար պատրաստուկները 10-30 րոպե ընկղմվում են ամրացնող հեղուկի մեջ։

Դեղերի ներկում.Մի քանի կաթիլ ներկ կիրառվում է քսուքի վրա: Կախված ներկանյութի տեսակից և հետազոտության նպատակից՝ ներկման տևողությունը տատանվում է 1-ից մինչև 5 րոպե, որոշ դեպքերում տևում է մինչև 30 րոպե: Ներկման վերջում պատրաստուկը լվանում են ջրով, ջուրը հանում են զտիչ թղթով, չորացնում օդում և մանրադիտակով:

Գոյություն ունեն ներկման պարզ և տարբերակված մեթոդներ։

ժամը պարզներկելով ցանկացած մեկ ներկով (մեթիլեն կապույտ, ֆուքսին, գենտյան մանուշակ), ամբողջ բջիջը ներկվում է:

ժամը տարբերակվածներկում, առանձին բջիջների կառուցվածքները ներկվում են տարբեր ներկանյութերով (գրամ բիծ, սպորային բիծ):

Միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիայի ուսումնասիրություն

3.1. բջջային ձևը

3.1.1. բակտերիաներ

Ըստ ձևի՝ բոլոր բակտերիաները բաժանվում են գնդաձև (կոկի), ձողաձև և ոլորված։

Գնդաձև բակտերիաներ - կոկիկներ:

1. Միկրոկոկեր -մեկ գնդաձև բջիջներ ( Միկրոկոկ արագաշարժ).

2. Դիպլոկոկներ -գնդաձև կոկիներ՝ միացված զույգերով։ ( Ազոտոբակտեր chroococcum).

3. Tetracocci- գնդաձև կոկիներ, որոնք միացված են չորսով:

4.streptococci- շղթաներով միացված գնդաձև բակտերիաներ (հիմնականում պաթոգեն, ինչպես նաև կաթնաթթվային բակտերիաներ Լակտոկոկ lactis).

5. Սարցիններ- գնդաձև բակտերիաներ, որոնք խմբավորված են 8 բջիջներում, առաջանում են բջիջների բաժանման արդյունքում երեք փոխադարձ ուղղահայաց հարթություններում: Սարկինաների որոշ տեսակներ կազմում են խորանարդաձեւ մեծ փաթեթներ, որոնցում յուրաքանչյուր կողմում կա 4 սարկինա։ բնորոշ ներկայացուցիչ Սարկինա ֆլավա(sarcina դեղին) - օդի միկրոֆլորայի ամենատարածված ներկայացուցիչը:

Բոլոր գնդաձև բակտերիաները, բացառությամբ Streptococcus lactis, դիտվում է ֆիքսված և մագենտա ներկված պատրաստուկների վրա:

ձողաձև բակտերիաներ. Դրանք ներառում են սպորներ չառաջացնող ձևեր (սեռ Pseudomonas, Աքրոմոբակտեր, Lactobacillusև այլն) և սպոր առաջացնող (սեռ բացիլ, Կլոստրիդիումև այլն):

Չսպոր առաջացնող բացիլ Pseudomonas stutzeri – նրա ցիտոպլազմը հավասարապես ներկված է:

սպոր առաջացնող ձողեր Bacillus mycoidesԵվ Bacillus mesentericus.Մանրադիտակի տակ նրանք անհավասար գունավոր տեսք ունեն։ Սպորները չեն ներկվում, ինչպես ավելի խիտ կառուցվածքները: Բջիջներ բացիլ միկոիդներդասավորված շղթաներով, դրանք streptobacilli են:

Ձողաձև բակտերիաները դիտվում են ամրացված և ներկված պատրաստուկների վրա:

Խճճված ձևեր

1. Վիբրիոսներ – մի փոքր կոր բջիջներ:

2. Սպիրիլան կարող է ունենալ մեկ գանգուր՝ ռուսերեն C տառի տեսքով, երկու գանգուր՝ լատինական S տառի, կամ մի քանի գանգուր՝ պարույրի տեսքով։

3. Spirochetes - երկար և բարակ բջիջներ մեծ քանակությամբ գանգուրներով; բջիջների երկարությունը 5-200 անգամ գերազանցում է դրանց հաստությունը։

Հարմար է դիտել վիբրիոն և սպիրիլլան ֆիքսված և ներկված պատրաստուկի վրա, որը պատրաստված է ցեխից, որը նախապես ինկուբացվել է մի քանի օր թերմոստատում: Նման պատրաստուկի վրա առկա բազմաթիվ միկրոօրգանիզմներից հաճախ հայտնաբերվում են խճճված ձևեր:

Սպիրոխետների հետ կարելի է ծանոթանալ ատամնափառի ֆիքսված ներկված պատրաստուկի վրա, հատկապես հաջողակ են կարիես ատամից քերելու պատրաստուկները։ Ատամնաբուժական սպիրոխետները շատ բարակ են, մազերի նման, կարճ (ընդամենը 2-3 պտույտ):

3.1.2. ակտինոմիցետներ

Ակտինոմիցետները շողացող սնկեր են։ Սննդարար միջավայրերի վրա ակտինոմիցետների միցելիումը տարբերվում է. դրա մի մասը ընկղմված է սուբստրատի մեջ (սուբստրատի միցելիում), մյուսը՝ սուբստրատի վերևում (օդային միցելիում):

Ակտինոմիցետների շատ ներկայացուցիչներ արտադրում են պիգմենտներ, հետևաբար նրանց օդային միցելիումը և հատկապես գաղութները գունավոր են կապույտ, կապույտ, մանուշակագույն, վարդագույն, շագանակագույն, շագանակագույն կամ սև: Ակտինոմիցետները սնուցող միջավայրը ներկում են համապատասխան գույներով:

Ակտինոմիցետների գաղութի մի կտոր դրվում է ապակե սլայդի վրա միջավայրի հետ միասին: Երկրորդ ապակու սլայդով այս կտորը ամուր սեղմվում է ապակու վրա, տրորում և քսում ապակու վրա։ Դեղը չորանում է, ամրացվում, ներկվում, դիտվում է մանրադիտակի տակ, որտեղ մասամբ տեսանելի են միցելիային միաբջիջ թելերը։

3.1.3. Խմորիչ

Խմորիչները տարբեր ձևերի միաբջիջ մանրադիտակային սնկեր են՝ էլիպսաձև, տանձաձև, կլոր, գլանաձև։ Բազմանում են վեգետատիվ և սեռական ճանապարհով։

Հացթուխի խմորիչը օգտագործվում է լաբորատոր հետազոտությունների համար։ Դասերից մի քանի ժամ առաջ խմորիչ զանգվածի մի փոքր կտոր դրվում է տաք շաքարով ջրի մեջ և տեղադրվում տաք տեղում: Ձևավորվում է սպիտակավուն պղտոր հեղուկ։ Այս հեղուկի մի կաթիլը դրվում է սլայդի վրա, ծածկված ծածկոցով, մի կաթիլ մայրու յուղ է քսվում վերևում և պատրաստումը դիտվում է ընկղմման համակարգով: Տեսանելի են բողբոջող և բաժանվող բջիջները:

3.2. Քիմիական մեթոդներհետազոտություն

3.2.1. Միկրոօրգանիզմների բջիջների գրամ գունավորում

Մանրէաբանական բջիջների տարբերակման այս մեթոդը հիմնված է բջջային թաղանթների քիմիական կազմի տարբերությունների վրա։ Որոշ տեսակի միկրոօրգանիզմների բջիջներում առաջանում է սպիրտում չլուծվող յոդի միացություն՝ հիմնական ներկով, իսկ մյուս տեսակների մոտ այդ միացությունը հայտնվում է ժամանակավորապես և լուծվում ալկոհոլով մշակվելուց հետո։ Առաջին խմբի միկրոօրգանիզմները կոչվում են գրամ-դրական երկրորդ - գրամ-բացասական.

Գրամ ներկման տեխնիկա.Միկրոօրգանիզմների տարբեր կուլտուրաների երեք բարակ քսուքներ կիրառվում են յուղազերծված ապակու սլայդի վրա (դրանցից երկուսը հսկիչներ են՝ հայտնի առնչություն ունենալով Գրամ բիծի հետ): Քսուքները չորանում են օդով, ամրացվում այրիչի կրակի վրա և ներկվում 1 րոպե գենտյան մանուշակի (կամ բյուրեղյա մանուշակագույն) ֆենոլային լուծույթով՝ սլայդը մի փոքր թեքված դիրքում պահելով: Այնուհետև ներկը քամում են և առանց պատրաստուկը ջրով լվանալու, դրա վրա քսում են Լուգոլի լուծույթը 1 րոպե (մինչև քսուքն ամբողջությամբ սևանա)։ Ապակին պահվում է թեք վիճակում։ Դեղը, առանց ջրով լվանալու, մշակվում է անընդհատ թափահարելով 96% ալկոհոլով 15-20 վրկ։ Կարևոր է պահպանել գունաթափման ժամանակը, քանի որ գրամ-դրական բջիջները նույնպես գունաթափվում են, եթե նշված ժամանակը գերազանցում է:

Ջրով լվանալուց հետո պատրաստուկը ներկվում է Pfeifer fuchsin-ով 1 րոպե: Գրամ-դրական միկրոօրգանիզմները ձեռք են բերում մուգ մանուշակագույն գույն, իսկ գրամ-բացասական միկրոօրգանիզմները ներկվում են լրացուցիչ գույնով (magenta):

Գրամ ներկերի արդյունքները կախված են մշակույթի տարիքից. հին մշակույթներում մահացած բջիջները միշտ գրամ բացասական են ներկում: Հետեւաբար, ավելի լավ է օգտագործել երիտասարդ մեկօրյա մշակույթները:

Խմորիչները լավ թիրախ են մանրէաբանական բջիջների գրամ ներկման համար: Bacillus mesentericusկամ Bacillus subtilis(գրամ-դրական) և Escherichia coli (գրամ-բացասական):

Ներկանյութեր և ռեակտիվներ գրամ ներկելու համար:

1. Գենտիական մանուշակի ֆենոլային լուծույթ. gentian violet - 1 գ, ալկոհոլ 96% - 10 մլ, բյուրեղային ֆենոլ - 2 գ, թորած ջուր - 100 մլ.

Որոշ դեպքերում դիմեք գենդիանի ալկոհոլային լուծույթմանուշակագույն:գենտյան մանուշակ (կամ բյուրեղյա մանուշակ) - 1 գ, ալկոհոլ 96% (ռեկտիֆիկացված) - 100 մլ, գլիցերին - 5 մլ: Խառնուրդը 24 ժամով տեղադրվում է թերմոստատի մեջ, ապա զտվում։

2. Լուգոլի լուծումը(կալիումի յոդիտ՝ 2 գ, բյուրեղային յոդ՝ 1 գ, թորած ջուր՝ 300 մլ)։ Սկզբում 5 մլ ջրի մեջ պատրաստում են կալիումի յոդիտի խտացված լուծույթ, դրանում լուծում են յոդ, ապա 300 մլ-ին ավելացնում են ջուր։

3. Ալկոհոլ 96%:

4. Ֆուչսին Պֆայֆեր(Ziel carbolic fuchsin-ի ջրային լուծույթ) 1 մլ Ziel carbolic fuchsin և 9 մլ թորած ջուր: Այն պատրաստվում է հետևյալ կերպ՝ 1 գ ֆուքսին, 5 գ բյուրեղային ֆենոլ, 96% սպիրտ՝ 10 մլ, մի քանի կաթիլ գլիցերին, 100 մլ թորած ջուր, ֆուքսինը լուծվում է էթանոլում, ավելացնում են ջրում լուծված ֆենոլ։ Լուծումը խառնում են և թողնում մի քանի օր։ Օգտագործելուց առաջ այն զտվում է։

3.2.2. Բակտերիալ սպորների գունավորում

Բակտերիալ սպորները բարձր դիմացկուն են շրջակա միջավայրի անբարենպաստ պայմանների նկատմամբ՝ համեմատած վեգետատիվ բջիջների հետ: Կլոր, ձվաձեւ կամ էլիպսաձեւ գոյացություններ են։ Եթե ​​սպորի տրամագիծը չի գերազանցում այն ​​բջջի տրամագիծը, որտեղ առաջացել է սպորը, բջիջը կոչվում է. բացիլային, եթե այն գերազանցում է, ապա կախված սպորի գտնվելու վայրից կենտրոնում կամ բջջի վերջում, այս բջիջը կոչվում է համապատասխանաբար. կլոստրիդային կամ plectridial . Բացիլային խցում սպորը կարող է տեղակայվել բջջի կենտրոնում. կենտրոնականդիրքը վերջում տերմինալև ավելի մոտ ծայրերից մեկին - ենթատերմինալդիրք.

Կենդանի սպոր առաջացնող բակտերիաները դիտարկելիս նրանց սպորները կարելի է առանձնացնել լույսի ճառագայթների ավելի ուժեղ բեկումով։ Սպորները թթու դիմացկուն են, ուստի դրանք դժվար է ներկել ներկերով։ Դա բացատրվում է թաղանթի բարձր խտությամբ, նրանում ազատ ջրի ցածր կոնցենտրացիայով, սպորներում լիպիդների բարձր պարունակությամբ։ Ներկված պատրաստուկներում պարզ ուղիներկամ ըստ Գրամի՝ սպորները մնում են անգույն (բացասական գույն):

Սպորների ներկման բոլոր մեթոդները հիմնված են մեկ սկզբունքսկզբում սպորները փորագրվում են տարբեր նյութերով՝ քրոմ, աղաթթու, ծծմբային, քացախաթթու, ամոնիակ, կաուստիկ սոդա կամ ջրածնի պերօքսիդ, այնուհետև սպորով բջիջը ներկվում է տաքացնելիս, և վերջում՝ ցիտոպլազմը գունաթափվում և լրացուցիչ ներկվում է։ կոնտրաստային ներկ:

Մյուլլերի կողմից փոփոխված Ziehl-Neelsen մեթոդը:Նախքան բակտերիաների քսուքը կրակի վրա ամրացնելը, պատրաստումը պատրաստվում է սովորական եղանակով։ Այնուհետև քրոմաթթվի 5% լուծույթը կիրառվում է կրակի մեջ ամրացված և սառեցված դեղամիջոցի վրա: 5-10 րոպե հետո այն լվանում են ջրով։ Պատրաստուկը պատում են զտիչ թղթի շերտով և առատորեն թրջում են Ziehl carbol fuchsine-ով։ Դեղը կրակի վրա տաքացնում են մինչև գոլորշիների առաջանալը (ոչ մինչև եռալ), այնուհետև այն մի կողմ են դնում և ավելացնում ներկանյութի նոր բաժինը։ Այս պրոցեդուրան կատարվում է 7 րոպե։ Կարևոր է, որ ներկը գոլորշիանա, բայց թուղթը չչորանա։ Սառչելուց հետո այն հանվում է, պատրաստուկը լվանում ջրով և մանրակրկիտ քսում ֆիլտրի թղթով։ Այս բուժման արդյունքում սպորներով բջիջները միատեսակ ներկված են:

Այնուհետև, բջիջների ցիտոպլազմը (բայց ոչ սպորները) գունաթափվում է 15-30 վրկ հիդրոքլորային կամ ծծմբաթթվի 1% լուծույթով մշակելու միջոցով: Սպորի պատրաստման ժամանակ բացիլ միկոիդներկամ բացիլ mesentericusԽորհուրդ է տրվում գունազերծել ցիտոպլազմը 16-18 վայրկյանով (չափել բարձրաձայն 21-ից մինչև 37-40): Եթե ​​այս ժամանակը գերազանցվի, սպորները նույնպես կարող են գունաթափվել: Այնուհետև պատրաստուկը լվանում են ջրով և 2 րոպե ներկում մեթիլեն կապույտով։

Գույնը հակապատկեր է, և վառ կարմիր սպորները հստակորեն աչքի են ընկնում ցիտոպլազմայի կապույտ ֆոնի վրա:

Պեշկովի մեթոդ.Մեթիլեն կապույտ Լեֆլերը լցնում են կրակի մեջ ամրացված պատրաստուկի վրա, բերում եռման աստիճանի և եռացնում 15-20 վրկ՝ բաժակը պահելով կրակի վրա։ Քսուքը լվանում են ջրով և ներկում 30-ը չեզոք կարմիրի 0,5% ջրային լուծույթով: Կրկին ողողեք, չորացրեք և այնուհետև ուսումնասիրեք պատրաստուկը օբյեկտի յուղի ընկղմմամբ: Սպորները ներկված են կապույտ կամ կապույտ, ցիտոպլազմը՝ վարդագույն։

Սպորների ուսումնասիրության համար հարմար առարկաներ կարող են լինել բացիլ mesentericusկամ բացիլ միկոիդներ 4 օրական հասակում.

Ռեակտիվներ բակտերիալ սպորները ներկելու համար: 1. Կարբոլ ֆուքսինՑիլյա(տես 3.2.1):

2. Մեթիլեն կապույտ Լեֆլեր(տես 3. 2. .1).

3. Մեթիլեն կապույտի հագեցած ջրային լուծույթ: 2 գ ներկ և 100 մլ թորած ջուր։

4. քրոմաթթու, 5% լուծույթ:

5. Աղ(կամ ծծմբաթթու, 1% լուծույթ:

4. Միկրոօրգանիզմների աճեցում

4.1. Սնուցող կրիչներ

4.1.1. Մեդիա պատրաստում

Միս-պեպտոն արգանակ (MPB):Միս-պեպտոնային միջավայրի պատրաստման համար օգտագործել մսի արգանակ, 500 գ մանր աղացած թարմ միսը լցնում են էմալապատ թավայի մեջ 1 լիտր ծորակի ջրով մինչև 50°C տաքացրած և թողնում են թրմվի 12 ժամ սենյակային ջերմաստիճանում կամ 1 ժամ 50-55°C ջերմաստիճանում: . Միսը քամում են, էքստրակտը բամբակի շերտով ֆիլտրում են շղարշով, 30 րոպե եփում կոլոիդային սպիտակուցները մակարդելու համար և երկու անգամ զտում (առաջին անգամ բամբակով շղարշով, երկրորդ անգամ՝ թղթե ֆիլտրով)։ Ֆիլտրատը լցնում են ջրով մինչև 1 լիտր, լցնում են կոլբայի մեջ, փակում բամբակյա խցաններով և ստերիլիզացնում 120°C ջերմաստիճանում 20 րոպե (կոլբաների խցանները վերևից փակվում են թղթե գլխարկներով):

Մսի պաշարները կարող են օգտագործվել ցանկացած պահի մեդիա պատրաստելու համար: Եթե ​​դրանք անմիջապես եփվեն, ապա մսի արգանակի նախնական ստերիլիզացում չի պահանջվում։

MPB պատրաստելու համար 1 լիտր մսի արգանակին ավելացրեք 5-10 գ պեպտոն(սպիտակուցի հիդրոլիզի առաջին արտադրանքը) միջավայրի կալորիականությունը բարձրացնելու համար և 5 գ սեղանի աղստեղծել օսմոտիկ ակտիվություն. Միջոցը տաքացնում են մինչև պեպտոնը լուծվի՝ անընդհատ խառնելով։

Միջավայրի չեզոք կամ թեթևակի ալկալային ռեակցիա է հաստատվում՝ ավելացնելով Na2C03 20% լուծույթ, մինչև թաց կարմիր լակմուսի թուղթը կապույտ դառնա: Միջավայրի pH-ը ստուգելու համար հարմար է օգտագործել ցուցիչ։ bromthymolblau:Դրանից 1-2 կաթիլը խառնում են ճենապակյա բաժակի մեջ մի կաթիլ արգանակի հետ։ Bromothymolblau-ն շշով կանաչ է չեզոք միջավայրում, դեղին` թթվային միջավայրում և կապույտ` ալկալային միջավայրում:

pH-ը հաստատելուց հետո միջավայրը կրկին եփում են 5-10 րոպե, իսկ այն սպիտակուցները, որոնք կաթնաշոռ են դարձել, երբ միջավայրի ռեակցիան փոխվում է, զտում են թղթե ֆիլտրի միջով՝ առանց արգանակը պարզելու կամ սպիտակուցով պարզելու։ Դրա համար թարմ ձվի սպիտակուցը հարում են կրկնակի քանակությամբ ջրով և խառնում մինչև 50°C սառեցված արգանակի հետ։ Խառնուրդը եփում են, խառնելով, 10 րոպե մարմանդ կրակի վրա, ապա ֆիլտրում։ Թափանցիկ միս-պեպտոն արգանակը լցնում են փորձանոթների մեջ, փակում բամբակյա խցաններով և ստերիլիզացնում 120 °C ջերմաստիճանում 20 րոպե։

Մսային պեպտոն ագար (MPA): 1 լիտր MPB-ին ավելացրեք 15-20 գ ագար։ Միջավայրը տաքացնում են մինչև ագարը լուծարվի (նրա հալման ջերմաստիճանը 100°С է, պնդացման ջերմաստիճանը՝ 40°С), միջավայրը 20% Na2C03 լուծույթով մի փոքր ալկալային ռեակցիայի է դրվում և ձագարով լցվում է փորձանոթների մեջ։ մոտավորապես 10 մլ ագար սյունակում՝ հետագայում Պետրի ափսեների մեջ լցնելու համար, և 5 մլ՝ թեք ագար-շերեփներ ստանալու համար):

Ագարը թափելիս փորձանոթների եզրերը պետք է չոր մնան, հակառակ դեպքում խցանները կկպչեն ապակուց։ Միջինով խողովակները մանրէազերծվում են ավտոկլավում 120°C ջերմաստիճանում 20 րոպե:

4.2. Ստերիլիզացման մեթոդներ

Ստերիլիզացում - սա միկրոօրգանիզմների բջիջների ամբողջական ոչնչացումն է սննդարար միջավայրում, ճաշատեսակներում և այլն:

Հայտնի են ստերիլիզացման մի քանի մեթոդներ. Ավելի հաճախ օգտագործվում է ջերմային ստերիլիզացում:

4.2.1. Բոցավառվող, կամ խորոված

Օգտագործելուց անմիջապես առաջ կարող եք բոցավառվել պլատինե օղակները, ասեղները, սպաթուլաները, մանր մետաղական առարկաները (մկրատ, նշտար, պինցետ), ինչպես նաև ապակե ձողեր, սլայդներ, ծածկոցներ և այլն:

4.2.2. Չոր ջերմային ստերիլիզացում

Օգտագործվում է սպասքի և չոր նյութերի մշակման համար՝ օսլա, կավիճ։ Միաժամանակ ստերիլիզացման ենթակա առարկան 2 ժամ (պահանջվող ջերմաստիճանի հաստատման պահից) պահվում է 170 °C ջերմաստիճանում՝ էլեկտրական չորացման պահարաններում։ Ջերմաստիճանը 170 ° C-ից բարձր բարձրացնելը խորհուրդ չի տրվում. բամբակյա խցաններն ու թուղթը սկսում են փլվել:

Մանրէազերծումից առաջ ապակյա իրերը փակվում են բամբակյա խցաններով և փաթաթվում թղթի մեջ: Բաժակները, փորձանոթները, պիպետները, բամբակյա բուրդը, շղարշը փաթաթվում են թղթի մեջ կամ տեղադրվում են հատուկ պատյաններում ու պատյաններում, որոնցում ստերիլիզացումից հետո կարելի է պահել ստերիլ սպասքը:

Ստերիլիզացման ավարտին պահարանը բացվում է միայն այն բանից հետո, երբ ջերմաստիճանը իջնում ​​է սենյակային ջերմաստիճանի, հակառակ դեպքում ապակին կարող է պայթել:

4.2.3. Ստերիլիզացիա գոլորշու միջոցով

Հեղուկ գոլորշի (100 ° C) օգտագործվում է չոր շոգից փչացած առարկաների և որոշ սննդարար միջավայրերի մշակման համար, որոնք չեն կարող դիմակայել ավելի բարձր ջերմաստիճաններին (ածխաջրեր, NRM, կաթ): Մանրէազերծումն իրականացվում է Կոխի կաթսայում 30 րոպե տևողությամբ օրական 3 օր։ Այս ստերիլիզացումը կոչվում է կոտորակային.

30 րոպե 100 ° C ջերմաստիճանում մեկ տաքացման դեպքում վեգետատիվ բջիջները մահանում են, մինչդեռ շատ միկրոօրգանիզմների սպորները մնում են կենսունակ: Նման տաքացումից հետո միջավայրը 24 ժամով տեղադրվում է 28–30°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։ Առաջին տաքացման ժամանակ պահպանված սպորներն այս ընթացքում ժամանակ ունեն բողբոջելու վեգետատիվ ձևերի, որոնք մահանում են հետագա տաքացման ժամանակ։ Այնուհետեւ այս գործողությունը կրկնվում է եւս 2 անգամ։

4.2.4. Ստերիլիզացում հագեցած գոլորշով ճնշման տակ

Սա ստերիլիզացման ամենաարագ և հուսալի մեթոդն է, որը սպանում է ամենադիմացկուն սպորները։ Նրա օգնությամբ մշակութային կրիչների և ճաշատեսակների մեծ մասը ստերիլիզացվում է:

Հագեցած գոլորշու հետ մշակումն իրականացվում է հերմետիկ փակված հաստ պատերով կաթսայում. ավտոկլավ.Ավտոկլավի կափարիչի կամ կողքի վրա կա գոլորշու ելքի փական, ճնշման չափիչ և անվտանգության փական: Մանոմետրը ցույց է տալիս, թե որքան է գոլորշու ճնշումը կաթսայի ներսում նորմայից բարձր: Պայթյունը կանխելու համար, երբ ճնշման սահմանը գերազանցում է, միացվում է անվտանգության փականը, որը գոլորշու ելք է տալիս:

Ֆիզիկական մթնոլորտներում մանոմետրի ցուցիչը համապատասխանում է որոշակի ջերմաստիճանի:

Հուսալի մանրէազերծումն իրականացվում է 120 °C ջերմաստիճանում և 1 ատմ ճնշման տակ 20 րոպե տաքացնելով:

Ստերիլիզացումն իրականացվում է հետևյալ կերպ. Ավտոկլավի մեջ ջուր են լցնում, մեջը դնում են ստերիլիզացման ենթակա առարկաները, պտտում են ավտոկլավի կափարիչը և սկսում ջեռուցումը։ Ծորակը բաց է թողնվում այնքան ժամանակ, մինչև ավտոկլավի ամբողջ օդը տեղափոխվի ջրային գոլորշիներով: Երբ գոլորշին անընդհատ հոսքով սկսում է դուրս գալ ծորակից, ծորակը փակվում է, գոլորշու ճնշումը ավտոկլավում հասցվում է 1 ատմ և պահպանվում է այս մակարդակում 20-30 րոպե։ Հետո ջեռուցումը դադարեցվում է, սպասում են, մինչև մանոմետրի սլաքը իջնի 0-ի, զգուշորեն (դանդաղ) բացում են ծորակը և բաց թողնում գոլորշին։ Միայն դրանից հետո արձակեք ավտոկլավի կափարիչը: Եթե ​​ծորակը բացվի մինչև ճնշման անկումը, ապա ստերիլիզացված անոթների հեղուկը կեռա և խրում է խցանները դրանցից:

Ավտոկլավը օգտագործվում է նաև հոսող գոլորշիով մասնակի մանրէազերծման համար։ Այս դեպքում կափարիչը չի պտտվում, որպեսզի գոլորշին ազատ դուրս գա:

4.2.5. Պաստերիզացիա

Pasteurization-ը թերի կամ մասնակի ստերիլիզացում է, որը նշանակում է տաքացում 65-80°C ջերմաստիճանում համապատասխանաբար 30-10 րոպե, որին հաջորդում է արագ սառեցում մինչև 10-11°C: Պաստերիզացնել կաթը, գարեջուրը, գինին և այլ ապրանքներ:

Նյութեր և սարքավորումներ

BCH, ագար, լակմուս կարմիր, բրոմթիմոլբլաու, ճենապակյա ափսեներ հորերով կամ սպասքով, ապակե ձողեր, 20% Na2C03 լուծույթ, փորձանոթներ դարակաշարերում (ագար լցնելու համար), ձագարներ, բամբակյա բուրդ, Պետրի ամաններ, 1 մլ Mohr պիպետներ, թուղթ բաժակի համար։ և պիպետների փաթաթաներ, 250 մլ տափաշիշ, կոշտ թելեր։

5. Միկրոօրգանիզմների մաքուր մշակույթի քանակի և մեկուսացման հաշվառում

5.1. Միկրոօրգանիզմների քանակի հաշվման մեթոդներ

5.1.1. Հողում միկրոօրգանիզմների քանակի (CFU) հաշվառում սննդարար թիթեղների մեթոդով՝ հաջորդական նոսրացումների մեթոդով

Հողը միկրոօրգանիզմների զարգացման համար ամենաբարենպաստ միջավայրն է։ Իր բաղադրության մեծ տարասեռության պատճառով՝ հաշվի առնել նրանում առկա միկրոօրգանիզմների քանակը՝ ուսումնասիրվող տարածքից, վերցնել միջինհողի փորձարկում.

Նախ, պատրաստում են կախույթներ (նոսրացման մեթոդով), որոնք պարունակում են հողի տարբեր կոնցենտրացիաներ 1 մլ ջրի մեջ: Դա անելու համար ստերիլ ճենապակյա սպաթուլայով կամ ալյումինե թեյի գդալով ստերիլ ժամացույցի ապակու վրա տարայից կամ տոպրակից վերցվում է 1 գ հողի նմուշ: Հողը կշռելիս ժամացույցի ապակին պատում են մեկ այլ ստերիլ ժամացույցի ապակիով։

Հողի նմուշը, պահպանելով ասեպտիկ պայմանները, տեղափոխվում է 250 մլ տարողությամբ կոլբայի մեջ 99 մլ ստերիլ ջրով: Խառնուրդը թափահարում են 5 րոպե՝ առանց խցանը թրջելու։ 10-2 գ հող պարունակող 1 մլ կախոցը վերցվում է ստերիլ պիպետտով և տեղափոխում փորձանոթի մեջ 9 մլ ստերիլ ծորակի ջրով։ Պիպետտը բազմիցս լվանում է ջրով փորձանոթի մեջ, որպեսզի հնարավորինս լվացվեն բջիջները նրա պատերից։ Մեկ այլ ստերիլ խողովակով կոլբայից վերցվում է ևս 1 մլ կասեցում և տեղադրվում երկրորդ կոլբայի մեջ, որը նույնպես պարունակում է 99 մլ ստերիլ ծորակ ջուր: Այս խողովակը լվանում է նույն կերպ, ինչպես առաջին դեպքում: Թափահարել փորձանոթը և երկրորդ կոլբը 1 րոպե: Փորձանոթում հողի կոնցենտրացիան կկազմի 10-3 գ, երկրորդ կոլբայում՝ 10-4 գ, նույն կերպ, նոր ստերիլ խողովակներով, երկրորդ կոլբայից 1 մլ կախույթը տեղափոխում են երկրորդ փորձանոթի մեջ: 9 մլ և երրորդ կոլբայի մեջ 99 մլ ստերիլ ծորակ ջրով և պատրաստել նոր կասեցումներ, որոնք պարունակում են համապատասխանաբար 10-5 և 10-6 գ հող:

սղագրություն

1 Կրթության և գիտության նախարարություն Ռուսաստանի ԴաշնությունԿրթության դաշնային գործակալություն Մոսկվայի պետական ​​ճարտարագիտական ​​էկոլոգիայի համալսարան Կուստովա Ն.Ա. ԼԱԲՈՐԱՏՈՐԻԱԿԱՆ Աշխատանոց ՄԱՆՐԵԲԱՆՈՒԹՅԱՆ ՄԱՍԻՆ Մոսկվա 2005 թ

2 Մանրէաբանության լաբորատոր սեմինարը նախատեսված է «Մանրէաբանության և կենսատեխնոլոգիայի հիմունքներ» առարկաների 3207 և 3302 մասնագիտությունների ուսանողների համար, ինչպես նաև «Բնապահպանական և արդյունաբերական մանրէաբանություն» առարկայի «Բնապահպանական և արդյունաբերական կենսատեխնոլոգիա» ամբիոնի ուսանողների համար: Սեմինարը բաղկացած է երեք բաժիններից. Առաջին բաժինը նվիրված է ընդհանուր մանրէաբանության հարցերին: Այս բաժնի աշխատանքներում ուսումնասիրվում են միկրոօրգանիզմների տարբեր խմբերի մորֆոլոգիական կառուցվածքը, մանրադիտակային հետազոտության մեթոդները, մանրէաբանական սերմնավորման տեխնիկան, մանրէազերծման մեթոդները, միկրոօրգանիզմների քանակական հաշվառման մեթոդները։ Երկրորդ բաժինը պարունակում է աշխատություններ կենսատեխնոլոգիայում միկրոբների օգտագործման վերաբերյալ՝ օրգանական թթուների, սպիրտների, հակաբիոտիկների և ֆերմենտների տարբեր նյութեր ստանալու համար։ Երրորդ բաժնի աշխատություններում ուսումնասիրվում են էկոլոգիական մանրէաբանության հարցեր։ Աշխատանքներից մի քանիսը ցույց են տալիս միկրոօրգանիզմների դերը գլոբալ կենսաերկրաքիմիական ցիկլերում, իսկ մնացածը նվիրված են կենսատեխնոլոգիական պաշտպանության խնդիրներին։ միջավայրը. Յուրաքանչյուր թեմա պարունակում է տեսական ներածություն և գործնական մաս, որտեղ նկարագրված են կիրառվող մեթոդները, աշխատանքի հերթականությունը, աշխատանքի վերաբերյալ հաշվետվության բովանդակությունը, ինչպես նաև հսկիչ հարցեր։ 2

3 ՆԱԽԱԲԱՆ Մանրէաբանության լաբորատոր սեմինարը նախատեսված է 3207 և 3302 մասնագիտությունների 3-րդ կուրսի ուսանողների համար՝ «Մանրէաբանության և կենսատեխնոլոգիայի հիմունքներ», ինչպես նաև «Էկոլոգիական և արդյունաբերական կենսատեխնոլոգիա» ամբիոնի 4-րդ կուրսի ուսանողների համար. Կենսատեխնոլոգիական շրջակա միջավայրի պաշտպանություն» առարկայի «Էկոլոգիական և արդյունաբերական մանրէաբանություն. Լաբորատոր սեմինարը հիմնված է Լաբորատոր աշխատանքների ուղեցույցի վրա, խմբ. Պ.Ի.Նիկոլաևը, որոնք օգտագործվել են «Մանրէաբանական արտադրության գործընթացներ և սարքեր» բաժնում՝ բաժնի ստեղծման պահից: Ավագ գիտաշխատող, բ.գ.թ. Ն.Վ.Պոմորցևա. Ուղեցույցները պատրաստվել են նրա ղեկավարությամբ բաժնի հետազոտողների կողմից՝ Մ.Ա.Բորուզդինա, Ի.Է.Լոմովա, Ն.Ա.Կուստովա, Տ.Ա.Մախոտկինա և Կ.Ա. Փոփոխություն ուսումնական պլանԲնապահպանի ինժեների նոր մասնագիտության համաձայն՝ անհրաժեշտ էր ընդլայնել մանրէաբանության կուրսը և լրացնել այն շրջակա միջավայրի պահպանության կենսատեխնոլոգիական մեթոդների առաջադրանքներով։ Լաբորատոր սեմինարը բաղկացած է երեք բաժիններից. Առաջին բաժինը նվիրված է ընդհանուր մանրէաբանությանը. միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիա, դրա ուսումնասիրության մեթոդներ, մանրէաբանական պատվաստման տեխնիկա, միկրոօրգանիզմների քանակական հաշվառման մեթոդներ: Երկրորդ բաժինը ներառում է արդյունաբերության մեջ մանրէների օգտագործման որոշ օրինակներ: Երրորդ բաժինն ընդգրկում է միկրոօրգանիզմների էկոլոգիայի հարցերը, նրանց դերը տարրերի գլոբալ ցիկլերում, ինչպես նաև շրջակա միջավայրի պահպանության կենսատեխնոլոգիական մեթոդներում: Այս աշխատաժողովի պատրաստմանը մասնակցել են ամբիոնի ասպիրանտ Ն.Վ.Զյաբրևան և ավագ գիտաշխատող։ E.S. Գորշինա. Հեղինակն իր խորին շնորհակալությունն է հայտնում դոց. սրճարան մանրէաբանություն, Մոսկվայի պետական ​​համալսարան N.N. Կոլոտիլովան արժեքավոր մեկնաբանությունների և խորհուրդների, ինչպես նաև ավագ գիտաշխատողի համար: Պ.Պ. Մակեևը տեքստի և պատկերազարդ նյութի պատրաստման հարցում օգնության համար: 3

4 4 ԱՇԽԱՏԱՆՔԻ ԸՆԴՀԱՆՈՒՐ ԿԱՆՈՆՆԵՐԸ ՄԱՆՐԵՍԱԿԱՆ ԼԱԲՈՐԱՏՈՐԻԱՅՈՒՄ Աշխատանքի և վարքագծի կանոններ լաբորատորիայում Մանրէաբանական լաբորատորիայում աշխատանքի և վարքի կանոնները շատ ընդհանրություններ ունեն քիմիական լաբորատորիաներում աշխատանքի կանոնների հետ, բայց դրանք ունեն իրենց առանձնահատկությունները: Մանրէաբանը շատ դեպքերում աշխատում է միկրոօրգանիզմների մաքուր կուլտուրաների հետ, այսինքն. ցանկացած սեռի, տեսակի և շտամի միկրոօրգանիզմների հետ: Քանի որ շրջակա բոլոր առարկաների և օդում կան օտար մանրէներ, օգտագործվում են հատուկ աշխատանքային մեթոդներ՝ ուսումնասիրվող միկրոօրգանիզմի մշակույթի կամ անձամբ անձի աղտոտումից խուսափելու համար: Դրա համար ստերիլիզացվում են կուլտուրայի կրիչները, սպասքը, գործիքները, մաքրվում են լաբորատորիան և աշխատատեղերը, պահպանվում են որոշակի կանոններ մանրէների հետ աշխատելիս։ Լաբորատորիայում ավելորդ իրեր չպետք է լինեն։ Թաց մաքրումը պետք է պարբերաբար իրականացվի։ Լաբորատոր տարածքների տարբեր մակերեսները պարբերաբար ենթարկվում են ախտահանման։ Ախտահանումը ախտահանում է, այսինքն. վարակիչ հիվանդությունների պաթոգենների ոչնչացում շրջակա միջավայրի օբյեկտներում. Դա անելու համար օգտագործեք քլորամինի 0,5 3% լուծույթ կամ ֆենոլի 3 5% լուծույթ (կարբոլաթթու): Աշխատանքային սեղանը պետք է ախտահանվի էթիլային կամ իզոպրոպիլային սպիրտի 70% լուծույթով։ Օդի ախտահանումը կատարվում է պարզ օդափոխության միջոցով (առնվազն րոպե): Ավելին արդյունավետ մեթոդսենյակի օդի ախտահանման ճառագայթումը ուլտրամանուշակագույն ճառագայթներով, օգտագործելով մանրէասպան լամպեր: Հատկապես հաճախ ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումը օգտագործվում է տուփը մանրէազերծելու համար: Բռնցքամարտը հատուկ փոքր սենյակ է մաքուր կուլտուրաների վերացանման, Պետրիի ափսեների վրա միկրոօրգանիզմների քանակական հաշվառման և հատկապես մաքուր պայմաններ պահանջող որոշ այլ աշխատանքների համար: Աշխատանքից առաջ տուփը ճառագայթվում է րոպե. Սեղանը սրբվում է սպիրտով, պատերն ու հատակը պարբերաբար լվանում են։ Բռնցքամարտի փոխարեն լաբորատորիաները կարող են համալրվել լամինար պահարաններով (նկ. 1), որոնք նույնպես մանրէազերծված են մանրէասպան լամպերով։ ժամը

5 աշխատանքը ներառում է օդափոխիչ՝ մանրէազերծված օդի շերտավոր հոսք ստեղծելու համար, որն անցնում է մանրէասպան ֆիլտրերով: Մանրէաբանական լաբորատորիայի հիմնական սարքավորումները ներառում են. գունաչափեր, pH-մետրեր և այլն): Յուրաքանչյուր ուսանողի նշանակվում է աշխատատեղ, որտեղ նրանք տեղադրում են. մանրադիտակ՝ ծածկված ծածկով, մանրէաբանական օղակ, սլայդներ և ծածկոցներ, ստերիլ պիպետներ, սպիրտի այրիչ, ֆիլտր թղթի ժապավեններ, ապակե մարկեր, ախտահանող հեղուկով անոթ: Սեղանին չպետք է լինի ոչինչ, որն անմիջականորեն կապված չէ կատարվող աշխատանքի հետ։ Մանրէաբանության լաբորատոր դասընթացներում պետք է պահպանվեն անվտանգության կանոնները: 5

6 6 Համառոտ տեղեկատվությունլաբորատորիայում անվտանգության մասին Մանրէաբանական պրակտիկայում լայնորեն կիրառվում են քիմիական ապակյա իրերը: Դրա հետ աշխատելիս պետք է զգույշ լինել։ Մանրակրկիտ մաքրեք կոտրված սպասքը: Վերլուծության ժամանակ հաճախ օգտագործվում են ալկալիների և թթուների ուժեղ լուծույթներ։ Նրանց հետ պետք է մեծ խնամքով աշխատել, քանի որ այդ նյութերը վնասակար ազդեցություն են ունենում ձեռքերի մաշկի և հագուստի վրա։ Եթե ​​թթուն պատահաբար թափվել է, այն պետք է ծածկել մեծ քանակությամբ սոդայով, ապա մի քանի անգամ լվանալ ջրով։ Թափված ալկալը պետք է մանրակրկիտ մաքրվի, իսկ այն առարկաները, որոնց վրա այն ընկել է, պետք է բուժել քացախաթթվի թույլ լուծույթով։ Եթե ​​թթուները կամ ալկալիները շփվում են մարդու մաշկի հետ, դրանք պետք է անմիջապես լվանալ շատ ջրով: Մանրէաբանական լաբորատորիայում նրանք գործ ունեն կենդանի միկրոօրգանիզմների հետ։ Հիմնական աշխատանքն իրականացվում է ստերիլ, այսինքն. աշխատել միկրոօրգանիզմների մեկ մշակույթի հետ, որոնք չպետք է վարակվեն օտար մանրէներով: Մշակաբույսերի վարակումը կանխելու համար օգտագործվում են մանրէազերծման հատուկ մեթոդներ։ Բացի այդ, կարևոր է լաբորատորիայում պահպանել մաքրությունը: Չի կարելի բաց թողնել միկրոօրգանիզմների կուլտուրաներով ուտեստները։ Միկրոօրգանիզմների կենսազանգվածը, եթե այն անհրաժեշտ չէ վերլուծության համար, դուրս է մղվում միայն ավտոկլավում մանրէազերծելուց հետո: Միկրոօրգանիզմների մշակաբույսերը արտադրվում են գազի կամ ալկոհոլային այրիչի բոցի մոտ, այնպես որ դուք պետք է զգուշանաք այրվածքներից և, առաջին հերթին, ուշադիր հավաքեք երկար մազերը: Այրիչը պետք է այրվի միայն անհրաժեշտության դեպքում: Եթե ​​ցանքի ժամանակ բամբակյա խցանը, սպիրտային լամպը կամ թուղթը պատահաբար բռնկվում են, ապա կրակը մարվում է սրբիչով։ Ավելի մեծ հրդեհների դեպքում օգտագործվում են կրակմարիչներ: Օգտագործված պիպետներ, սլայդներ, ծածկոցներ, սպաթուլաներ և այլն: տեղադրվում է ախտահանիչ հեղուկով տարայի մեջ: Ուսանողները պետք է անընդհատ հիշեն, որ գործ ունեն միկրոօրգանիզմների հետ, որոնք միշտ չէ, որ կարող են անվտանգ լինել, հատկապես շրջակա միջավայրի օբյեկտներից միկրոբների մեկուսացման աշխատանքներում: Ուստի դասի վերջում սովորողները պետք է կարգի բերեն աշխատավայրը և լվացեն ձեռքերը օճառով և ջրով:

7 Էլեկտրական ցանցում անսարքության դեպքում անջատեք էլեկտրական սարքերը և դրանց կենտրոնացված էլեկտրամատակարարումը: ԲԱԺԻՆ 1. ԸՆԴՀԱՆՈՒՐ ՄԱՆՐԱՊԵՏՈՒԹՅԱՆ ԹԵՄԱ 1. Միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիա և դրա ուսումնասիրության մեթոդներ Մանրէաբանությունն ուսումնասիրում է այն օրգանիզմները, որոնք ունեն մանրադիտակային չափումներ, այսինքն. չափված միկրոմետրերով կամ միկրոմետրերի ֆրակցիաներով: Մեկ միկրոմետրը հավասար է 10-6 մետրի և կրճատվում է որպես միկրոն։ Միկրոօրգանիզմները բնութագրվում են ինտենսիվ նյութափոխանակությամբ և ունակ են իրականացնել տարբեր քիմիական փոխակերպումներ։ Տարբեր միկրոօրգանիզմներ տարբերվում են ինչպես իրենց կառուցվածքով, այնպես էլ կենսաքիմիական գործընթացներով, որոնք նրանք իրականացնում են: Դրանք մեկ խմբի մեջ միավորելը պայմանավորված է ոչ միայն նրանց փոքր չափերով, այլև մշակման և հետազոտության մեթոդների ընդհանրությամբ։ Ուսումնասիրել միկրոօրգանիզմների կառուցվածքը, նրանց տեսքը, ձևը, չափը, այսինքն. միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիան ուսումնասիրելու համար օգտագործել մանրադիտակ: Ամենափոքր մասնիկները, որոնք կարելի է տեսնել ժամանակակից լուսային մանրադիտակներում, ունեն լույսի ալիքի երկարության 1/3-ից ավելի մեծություն, այսինքն. ոչ պակաս, քան 0,2 միկրոն, որը կապված է լույսի տեսանելի մասի օգտագործման հետ, որն ունի 0,4 միկրոնից մինչև 0,7 մկմ ալիքի երկարություն: Մանրադիտակի սարք Նկ. 2 ցույց է տրված տեսքըհետազոտության մեջ տարածված և կրթական պրակտիկամանրադիտակ MBI-3. Դիտարկվող առարկան՝ պատրաստուկը, դրվում է առարկայի սեղանի վրա և ներքևից լուսավորվում լուսային ճառագայթներով, որոնք դուրս են գալիս լուսատուից, ընկնում հայելու վրա, հետո անցնում կոնդենսատորով և կենտրոնանում պատրաստության վրա։ Մանրադիտակի հիմնական մասերը՝ ակնաբույժներ, խողովակ, պտուտահաստոց՝ նպատակներով, բեմ՝ պատրաստման համար սեղմիչներով, կոնդենսատոր, մակրո և միկրո պտուտակներ՝ կենտրոնացման համար և, վերջապես, եռոտանի, որի մեջ տեղադրված է այս ամենը։ 7

8 Մինչև մանրադիտակը ստուգեք լուսավորության ճիշտ տեղադրումը (ըստ Քյոլերի): Դա անելու համար լուսատուի քարթրիջը լույսի լամպով շարժելով՝ ստացվում է թելի հստակ պատկեր 8

9 լամպի շիկացում ամբողջովին փակ կոնդենսատորի դիֆրագմայի վրա, որպեսզի այս պատկերն ամբողջությամբ լրացնի կոնդենսատորի անցքը: Լուսավորիչի դիֆրագմը փակելուց հետո բացվում է կոնդենսատորի դիֆրագմը և, շարժելով կոնդենսատորը, մանրադիտակի տեսադաշտում ստացվում է լուսավորիչի դիֆրագմայի կտրուկ պատկերը։ Դեպի պայծառ լույսչկուրացրեց աչքերը, նախ նվազեցրեք լամպի թելի շիկացումը: Եվ, վերջապես, դիֆրագմայի բացվածքի պատկերը դրվում է տեսադաշտի կենտրոնում, և լուսատուի բացվածքը բացվում է այնպես, որ ամբողջ տեսադաշտը լուսավորվի։ Մանրադիտակը խոշորացման երկու փուլով օպտիկական համակարգ է. առաջին խոշորացումն իրականացվում է օբյեկտիվով, երկրորդը՝ ակնաբույժով։ Ոսպնյակը տալիս է օբյեկտի ընդլայնված հակառակ պատկերը, որը դիտվում է ակնաբույժի միջոցով: Արդյունքում, դիտորդի աչքը տեսնում է օբյեկտի խիստ խոշորացված հակադարձ պատկերը: Հետեւաբար, օբյեկտի շարժումը դեպի ձախ աչքով ընկալվում է որպես շարժում դեպի աջ։ Մանրադիտակի ընդհանուր խոշորացումը, այսինքն. Խոշորացումը, որով օբյեկտը դիտվում է մանրադիտակի տակ, սահմանվում է որպես օբյեկտի և ակնոցի խոշորացումների արտադրյալ: Ոսպնյակները մեծացնում են 10, 40, 60, 90 անգամ, ակնոցները՝ անգամ: Եթե ​​օգտագործվում է երկդիտակ կցորդ, այն ապահովում է լրացուցիչ խոշորացում: Նկ. 3-ը ցույց է տալիս միացման սխեման օպտիկական համակարգմանրադիտակ. O ոսպնյակը Z հարթությունում ձևավորում է A առարկայի իրական շրջված A պատկերը: Ոսպնյակի կողմից տրված պատկերն ավելի է մեծանում E ակնոցի միջոցով: Քանի որ Z-ը գտնվում է E ակնոցի կիզակետում, դիտորդը տեսնում է մեծացած վիրտուալ պատկեր: A-ն X հարթությունում, որը սովորաբար գտնվում է աչքից 25 սմ հեռավորության վրա, այսինքն. մոտ տեսողության համար հարմար հեռավորության վրա։ Պետք է նկատի ունենալ, որ պատկերի ձևավորման մեխանիզմի նման գաղափարը խիստ պարզեցված է, քանի որ այն անտեսում է դիֆրակցիայի և մի շարք այլ գործոնների ազդեցությունը: Մանրադիտակով աշխատելիս ուսանողները մի քանի անգամ մեծացմամբ ուսումնասիրում են մանրէների պատրաստուկները: Օպտիկական մանրադիտակի կողմից տրված ամենաբարձր խոշորացումը 3000x է: Ամենափոքր մասնիկի չափը, որը կարելի է դիտել նման մանրադիտակով, 9-ն է

10-ը հավասար է 0,2 միկրոն, որը պայմանավորված է սպեկտրի տեսանելի մասի ալիքի երկարությամբ։ Միկրոօրգանիզմների ձևաբանություն Միկրոօրգանիզմների աշխարհը ներառում է ձևերի հսկայական բազմազանություն, որոնք չեն կազմում մեկ համակարգված խումբ: Մանրէաբանության հիմնական առարկաները բակտերիաներն են, սակայն դրանցից բացի մանրէաբաններն ուսումնասիրում են նաև խմորիչները, սնկերը, մանրադիտակային ջրիմուռները և որոշ նախակենդանիներ։ Նկ. 4-ը ցույց է տալիս միկրոօրգանիզմների հիմնական խմբերը (բացառությամբ նախակենդանիների); պահպանված են դրանց չափերի հարաբերակցությունները։ Բոլոր կենդանի օրգանիզմները, բացի վիրուսներից, ունեն բջջային կառուցվածքը. Ըստ իրենց բջջային կազմակերպման՝ դրանք բաժանվում են պրոկարիոտների և էուկարիոտների։ 10

11 Էուկարիոտների և պրոկարիոտների հիմնական տարբերությունը երկրորդական խոռոչների առկայությունն է, որոնք բաժանում են միջուկը և բջջային այլ կառուցվածքները ցիտոպլազմայից: Հենց երկրորդական խոռոչների հայտնվելը հնարավորություն տվեց թռիչք կատարել ողջ կենդանի աշխարհի էվոլյուցիայի մեջ՝ էուկարիոտիկ թաղանթների ներքին մակերեսի մեծացման պատճառով։ Սա հնարավոր դարձրեց դիֆուզիոն արագության բարձրացմանը համապատասխան, միաժամանակ իրականացնել մեմբրանների վրա տեղի ունեցող ավելի շատ կենսաքիմիական ռեակցիաներ: Պրոկարիոտները բակտերիաներ են, այդ թվում՝ ակտինոմիցետներ և ցիանոբակտերիաներ։ Էուկարիոտները բոլոր բույսերն են, կենդանիները, խմորիչները, սնկերը, նախակենդանիները: Պրոկարիոտների շարքում ներկայումս առանձնանում է արխեբակտերիաների մի խումբ, որը ներառում է մեթանոգեններ, ծայրահեղ հալոֆիլներ (ապրում են շատ աղի ջրում), ծայրահեղ ջերմաֆիլ բակտերիաներ, որոնք օքսիդացնում և նվազեցնում են մոլեկուլային ծծումբը, ինչպես նաև բջջային պատից զուրկ թերմոպլազմաներ: Համեմատության հիման վրա կատարվել է նոր բաժանում նուկլեոտիդային հաջորդականություններռիբոսոմային ՌՆԹ-ի փոքր հատվածներում: տասնմեկ

12 Արխեբակտերիաները տարբերվում են բջջային պատերի, լիպիդների և որոշ այլ ֆիզիոլոգիական և կենսաքիմիական հատկանիշներով (օրինակ, նրանք ունեն CO 2-ի ամրագրման այլ մեխանիզմ): Այսպիսով, բջջային կազմակերպության կառուցվածքում ներկայումս առանձնանում են 3 խումբ՝ արխեբակտերիաներ (ըստ նոր անվանացանկի Archaea, archaea), էվբակտերիաներ (ըստ նոր անվանացանկի Բակտերիաներ, բակտերիաներ) և էուկարիոտներ (ըստ նոր անվանացանկի Eukarya) . Աշխատանք 1. Բակտերիաների մանրադիտակային ուսումնասիրություն Բակտերիաների մորֆոլոգիա Տեսական ներածություն Միկրոօրգանիզմների այս խումբն ամենաբազմաթիվն է, տարածված է բնության մեջ և ունի արդյունաբերական մեծ նշանակություն։ Միկրոօրգանիզմների անվանման համար օգտագործվում է երկուական անվանացանկ, ինչպես կենդանաբանության և բուսաբանության մեջ։ Այս անվանացանկի համաձայն՝ յուրաքանչյուր տեսակ ունի անուն, որը բաղկացած է երկուսից Լատինական բառեր. Առաջին բառը նշանակում է սեռ, իսկ երկրորդ տեսակը։ Ընդհանուր անունը միշտ գրված է մեծատառով, իսկ կոնկրետ անունը միշտ փոքրատառ է: Բակտերիաների մեծ մասը միաբջիջ օրգանիզմներ են, որոնք գնդաձև են, ձողաձև կամ ոլորված։ Բակտերիաների շարքում կան փոքր քանակությամբ թելիկ ձևեր: Բակտերիաները շատ փոքր են, գնդաձեւ բակտերիաների բջջի տրամագիծը 1 2 միկրոն է։ Բակտերիաները բազմանում են բաժանման միջոցով (բարենպաստ պայմաններում բաժանումը տեղի է ունենում րոպեների ընթացքում)։ Որոշ բակտերիաներ շարժուն են։ Շարժվելու ունակությունը կապված է դրոշակի հատուկ օրգանելների առկայության հետ: Ձևով ամենապարզը գնդաձև բակտերիաներն են (կոկիները): Դրանք առաջանում են կա՛մ միայնակ գնդակների, կա՛մ իրար միացված գնդակների տեսքով: Ըստ բաժանումից հետո բջիջների դասավորության՝ գնդաձև բակտերիաները բաժանվում են մոնոկոկերի (մեկ կոկի), տետրակոկերի (4-ով համակցված), սարկինների (8-ով համակցված), ստաֆիլոկոկների (կլաստերներ), streptococci-ների (կոկիների շղթաներ)։ 12

13 Ձողաձև բակտերիաները բակտերիաների ամենաբազմաթիվ խումբն են։ Դրանք գլանաձև բջիջներ են՝ կլորացված կամ սրածայր ծայրերով և մեծապես տարբերվում են երկարության և լայնության հարաբերակցությամբ: Նրանք կարող են տեղակայվել առանձին կամ ձևավորել կարճ կամ երկար շղթաներ: Ձողերը կարող են լինել տարբեր երկարությունների, սովորաբար մի քանի միկրոն, իսկ լայնությունը մոտ 1 մկմ: Որոշ ձողաձև բակտերիաներ բջջի ներսում ձևավորում են հատուկ սպորային մարմիններ։ Յուրաքանչյուր բջիջ արտադրում է մեկ սպոր, որը ծառայում է անբարենպաստ պայմաններին դիմանալու համար։ Սպորը համապատասխան պայմաններում (ջերմաստիճան, խոնավություն, սննդանյութեր) բողբոջում է՝ վերածվելով փայտիկի։ Բակտերիաների սպորների դիմադրողականությունը գերազանցում է ցանկացած կենդանի օրգանիզմի դիմադրությունը։ Օրինակ՝ Bacillus subtilis hay bacillus-ի սպորը կարող է դիմակայել 100°C ջերմաստիճանին 3 ժամ:Սպորների նման դիմադրությունը դժվարացնում է վարակների դեմ պայքարը: Փաթաթված միկրոօրգանիզմները տարբերվում են բջիջների կորության աստիճանով և պարույրների քանակով։ Դրանք բաժանվում են վիբրիոների, սպիրիլլաների և սպիրոխետների։ Եթե ​​բակտերիան ունի պարույրի մեկ թերի կծիկ, ապա այն կոչվում է վիբրիո: Եթե ​​բակտերիան ունի մի քանի պարուրաձև գանգուրներ, ապա այն կոչվում է սպիրիլլա, իսկ մանրէները, որոնք ոլորված ձև ունեն մեծ քանակությամբ փոքր գանգուրներով, կոչվում են սպիրոխետներ: Թելային բակտերիաները թելեր են, որոնք բաղկացած են գլանաձեւ կամ սկավառակաձեւ բջիջներից։ Որոշ տեսակների թելերը փակվում են լորձաթաղանթի մեջ, որը կարող է ներծծվել երկաթի հիդրօքսիդով կամ մանգանի աղերով։ Լուծույթներից ծանր մետաղների կուտակման գործընթացը տեղի է ունենում երկաթի որոշ բակտերիաների բջիջներում: Խոշոր թելիկ մանրէներ r. Բեգյատոան ծծումբ է կուտակում իրենց բջիջներում: Թելային բակտերիաները սովորաբար ապրում են ծովային և քաղցրահամ ջրեր, հանդիպում են նաև քայքայվող օրգանական մնացորդներում՝ կենդանիների աղիքներում։ Ցիանոբակտերիաները ներառում են օրգանիզմների մեծ խումբ, որոնք միավորում են բջջի պրոկարիոտային կառուցվածքը ֆոտոսինթեզ իրականացնելու ունակությամբ։ Ցիանոբակտերիաների բջիջների պիգմենտները, բացի քլորոֆիլ a-ից (կանաչ), պարունակում են ֆիկոցիանին պիգմենտ 13:

14 կապույտ. Այդ պատճառով դրանք նախկինում կոչվում էին կապույտ-կանաչ ջրիմուռներ։ Դրանց մեծ մասը բազմաբջիջ օրգանիզմներ են, որոնք երկար, առավել հաճախ չճյուղավորված թելեր են (տրիխոմներ)։ Թելերի բջիջները միավորված են ընդհանուր արտաքին պատով։ Երբեմն դրանք կազմում են լորձաթաղանթային կուտակումներ «գորգեր»։ Վերարտադրումն իրականացվում է թելը առանձին հատվածների բաժանելով։ Որոշ տեսակներ շարժվում են սահելով (r. Spirulina)։ Ակտինոմիցետները (ճյուղավորվող բակտերիաներ, ճառագայթող սնկեր) պրոկարիոտ միկրոօրգանիզմների մեծ խումբ են, որոնք ձևավորում են մի քանի մմ երկարությամբ և 0,5-1,5 մկմ տրամագծով բարակ ճյուղավորված թելեր։ Դրանք միկրոօրգանիզմների յուրօրինակ խումբ են, որը ձևաբանորեն նման է բորբոս սնկերին (նկ. 5): Այս խմբի ներկայացուցիչների զգալի մասի բջիջները կարողանում են ճյուղավորվել, ինչը բնորոշ նշանսունկ. Այնուամենայնիվ, ակտինոմիցետների ճյուղավորվող թելերի երկարությունը հասնում է մի քանի միլիմետրի, մինչդեռ սնկային միցելիումի երկարությունը մի քանի սանտիմետր է: Սնկերի հիֆերը սովորաբար մի քանի անգամ ավելի հաստ են, քան ակտինոմիցետների թելերը։ Ըստ մորֆոլոգիայի և զարգացման՝ ակտինոմիցետները բաժանվում են բարձր և ստորին ձևերի։ Բարձրագույն օրգանիզմները ներառում են լավ 14 օրգանիզմներ

15 զարգացած են միջնապատ կամ ոչ միջնապատ միցելիում և հատուկ սպորացման օրգաններ: Սպորները շղթաների տեսքով առաջանում են օդային միկելիումի հատուկ սպորակիր հիֆերի վրա։ Սպորացման օրգանների կառուցվածքը տարբեր տեսակների մոտ տարբեր է՝ երկար կամ կարճ, ուղիղ կամ պարուրաձև (նկ. 6)։ Միկելիումի և սպորացման օրգանների կառուցվածքի առկայությամբ բարձրագույն ակտինոմիցետները նման են միցելիային սնկերին։ Որոշ ակտինոմիցետներ ունեն միցելիում միայն երիտասարդ կուլտուրայում, որը տարիքի հետ քայքայվում է ձողաձև և կոկային բջիջների ձևավորմամբ: Ակտինոմիցետների ստորին ձևերը իրական միցելիում չունեն: Միցելիում առաջացնելու ունակությունը նրանց մեջ արտահայտվում է միայն բջիջների ճյուղավորման հակումով։ Ստորին ակտինոմիցետները ներառում են, օրինակ, Mycobacterium ցեղի տեսակները, որոնք ունեն կուլտուրայի տարիքի հետ բջիջների ձևը փոխելու հատկություն (նկ. 7): Այս հատկությունը կոչվում է պլեոմորֆիզմ։ Բարձրագույն ակտինոմիցետների շարքում բնական միջավայրերում առատությամբ առաջատար տեղն են զբաղեցնում Streptomyces ցեղի տեսակները։ Ակտինոմիցետները կարևոր դեր են խաղում 15-ի գործընթացներում

16 հողի ձևավորում և հողի բերրիության ստեղծում: Ակտինոմիցետները ոչնչացնում են բարդ օրգանական միացությունները (ցելյուլոզա, հումուս, քիտին, լիգնին և այլն), որոնք անհասանելի են բազմաթիվ այլ միկրոօրգանիզմների համար։ Streptomyces ցեղի գրեթե բոլոր տեսակները կազմում են հակաբիոտիկ հատկություններով հատուկ թափոններ: Որոշ տեսակներ բույսերի, կենդանիների և մարդկանց հարուցիչներ են: Բացի բակտերիաների հիմնական ձևերից, կան ցողունային և բողբոջող բակտերիաներ, որոնք կրում են պրոստեկ կոչվող աճը: (նկ.8) 16

17 Պրոստեկի գործառույթները տարբեր են. Որոշ բակտերիաների մոտ դրանք ծառայում են բազմացման, մյուսների մոտ՝ բջիջը սուբստրատին կցելու համար։ 17

18 18 Գործնական մաս Աշխատանքի նպատակն է ուսումնասիրել բակտերիաների ներկայացուցիչների մորֆոլոգիան Աշխատանքի հերթականությունը Կատարելով առաջին աշխատանքը՝ սովորողները սովորում են օգտագործել մանրադիտակ, դիտում են բակտերիաների ներկայացուցիչների պատրաստի պատրաստուկները, այնուհետև ինքնուրույն։ պատրաստել կենդանի բակտերիաների պատրաստուկներ և մանրադիտակով դրանք: Նախ, ուսանողները մանրադիտակով ուսումնասիրում են բակտերիաների պատրաստի ֆիքսված պատրաստուկները: Ֆիքսված պատրաստուկները ներսում կասեցված միկրոօրգանիզմներ են ջրային միջավայրչորացրած ապակե սլայդի վրա և ներկված անիլինային ներկերով: Որոշ կենդանի միկրոօրգանիզմների պատրաստուկներ սովորողները պատրաստում են ինքնուրույն: Դա անելու համար ծորակի ջրի մի փոքր կաթիլը կիրառվում է մաքուր ապակե սլայդի վրա, որի մեջ կալցինացված և սառեցված մանրէաբանական հանգույցով ներմուծվում է ուսումնասիրվող փոքր քանակությամբ մանրէներ, որոնք մանրակրկիտ խառնվում են և ծածկվում ծածկոցով: Ավելորդ ջուրը հանվում է ֆիլտրի թղթով։ Դեղը դրվում է առարկայի սեղանի վրա և ամրացվում սեղմակներով: Նախ, դիտելով ակնոցի մեջ և պտտելով մակրոպտուտակը, ձեռք է բերվում օբյեկտի կտրուկ պատկերը ցածր խոշորացմամբ 10x օբյեկտիվով: Այնուհետև մանրադիտակը տեղափոխվում է մեծ խոշորացում՝ 40x օբյեկտիվով։ Պտուտակների պտույտը պետք է կատարվի զգուշությամբ, քանի որ եթե շատ կտրուկ իջեցնեն, ոսպնյակը կարող է տրորվել ոսպնյակի կողմից: Մանրադիտակի ժամանակ պետք է նկատի ունենալ, որ մանրադիտակը, հատկապես բարձր խոշորացումների դեպքում, չի գրավում առարկայի ողջ խորությունը, հետևաբար, երբ խողովակն աստիճանաբար իջեցվում է միկրոպտուտակով, առարկան տեսանելի է նախ վերևից, այնուհետև օպտիկական հատվածում։ 1. Միկրոօրգանիզմների ֆիքսված պատրաստուկների դիտում: Lactococcus lactis-ը կաթնաթթվային խմորման պատճառական գործակալն է. բջիջների ձևը գնդաձև կոկի է. բջիջները միացված են շղթաներով. Այն օգտագործվում է կաթնաթթվային արտադրանք ստանալու համար։

19 Lactobacillus acidophilum ձողաձեւ բակտերիաներ; կաթնաթթվային խմորման պատճառական գործակալ. Այն օգտագործվում է կաթնաթթվային արտադրանք ստանալու համար։ Acetobacter aceti-ն ձողաձեւ բակտերիաներ են, որոնք էթանոլը օքսիդացնում են քացախաթթվի: Օգտագործվում է սննդի քացախ ստանալու համար։ Streptomyces griseus actinomycete, բջջի ձևը բարակ ճյուղավորված թելերի տեսքով; հակաբիոտիկ streptomycin արտադրող. Saccacharopolyspora erythrae actinomycete, բջջի ձևը բարակ ճյուղավորված թելերի տեսքով; Էրիտրոմիցին հակաբիոտիկի արտադրող: 2. Bacillus subtillis բջիջների կենդանի պատրաստուկների դիտում բարակ շարժական ձողերի տեսքով; ձևավորում է վեճեր; ֆերմենտային պատրաստուկների արտադրող: Spirulina platensis ցիանոբակտերիա; բջիջների ձևը մեկ թելի տեսքով, որը բաղկացած է գլանաձև բջիջներից, սերտորեն հարակից միմյանց. ունի սահող շարժում։ Օգտագործվում է որպես սննդային հավելում։ Զեկույցի բովանդակությունը 1. Միկրոօրգանիզմի լատիներեն անվանումը. 2. Բջջի մորֆոլոգիա (տրեք գծագիր, որը ցույց է տալիս մանրադիտակի խոշորացումը և պահպանելով բջիջների չափերի հարաբերակցությունը): 3. Ուսումնասիրված բակտերիաների օգտագործումը արդյունաբերության մեջ. Թեստային հարցեր 1. Նկարագրե՛ք մանրադիտակի կառուցվածքը: 2. Ինչպե՞ս որոշել մանրադիտակի խոշորացումը: 3. Ինչպիսի՞ն է բակտերիալ բջիջների ձևը: 4. Անվանե՛ք ակտինոմիցետների մորֆոլոգիայի առանձնահատկությունները: 5. Բակտերիաների ո՞ր ներկայացուցիչներին եք ճանաչում և ո՞րն է դրանց գործնական նշանակությունը: Աշխատանք 2. Էուկարիոտ միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիա Տեսական ներածություն 19.

20 Էուկարիոտիկ միկրոօրգանիզմները, որոնք ուսումնասիրվում են մանրէաբանների կողմից, ներառում են սնկերը, խմորիչները, միկրոջրիմուռները և որոշ նախակենդանիներ: Սնկերի մորֆոլոգիա Սնկերը քլորոֆիլազուրկ միկրոօրգանիզմներ են՝ թելավոր բջիջներով: Նրանց առաջացրած երկար, ճյուղավորված թելերը կոչվում են հիֆեր։ Հիֆերը միասին կազմում են միկելիումը։ Չափերով սնկային հիֆերը շատ ավելի մեծ են, քան ակտինոմիցետները։ Մի շարք կաղապարների միցելիումը բաժանված է միջնորմներով (septate mycelium), մինչդեռ այլ տեսակի միջնորմները բացակայում են։ Կենսատեխնոլոգիայում բորբոս սնկերը հիմնականում օգտագործվում են որպես արտադրող։ «Բորբոսը սնկերի» անվան տակ համակցված են ֆիկոմիցետների, մարսուների և անկատար սնկերի որոշ ներկայացուցիչներ։ Խիտ ենթաշերտերի վրա կաղապարները ձևավորում են կանաչ, դեղնավուն, սև կամ սպիտակ գույնի կլորացված փափուկ, սարդոստայնանման, բամբակի կամ փոշոտ գաղութներ: Բորբոսնած գաղութները բաղկացած են մեծ քանակությամբ հիֆերից։ Հիֆերի մեծ մասը զարգանում է օդում, իսկ մի մասը՝ սուբստրատի հաստությամբ։ Հիֆերի վրա հաճախ առաջանում են կոնիդիոֆորներ, որոնց վրա սպորներ են առաջանում կա՛մ սպորանգիումի ներսում, կա՛մ շղթաներով դասավորված էկզոսպորների տեսքով։ Կոնիդիոսպորները կամ կոնիդիաները ծառայում են անսեռ բազմացման համար (նկ. 10): Կոնիդիաները, հասնելով բարենպաստ պայմանների, բողբոջում են միկելիումի։ Բորբոսնած սնկերը բնության մեջ շատ տարածված են և ունեն հզոր ֆերմենտային ապարատ։ Ուստի նրանք են հիմնական կործանիչները օրգանական միացություններԲնության մեջ. Կաղապարները լայնորեն օգտագործվում են նաև արդյունաբերության մեջ՝ օրգանական թթուների, հակաբիոտիկների և ֆերմենտների արտադրության համար։ 20

21 Խմորիչի մորֆոլոգիա Խմորիչները միաբջիջ մանրադիտակային սնկերի առանձին խումբ են, որոնք մեծ գործնական նշանակություն ունեն: Խմորիչ բջիջները մեծ կլոր կամ ձվաձեւ բջիջներ են (նկ. 11): Որոշ խմորիչներ կարող են ձևավորել տարրական միցելիում, որը կոչվում է «կեղծոմիցելիում»: Բջջի չափը տատանվում է 3 մկմ-ից մինչև 10 մկմ երկարությամբ և 2-ից 8 մկմ լայնությամբ: Խմորիչների մեծ մասը բազմանում է բողբոջելով: Միաժամանակ 21

Երիկամի փոքր ուռուցիկությունը (երբեմն ոչ թե մեկ, այլ մի քանի) հայտնվում է բջջի մակերեսին, աստիճանաբար մեծանում է չափերով և, վերջապես, բաժանվում է այն արտադրող բջջից։ Մայր բջջից անջատված բողբոջը դառնում է նոր խմորիչ բջիջ։ Որոշ խմորիչներ բազմանում են տրոհման միջոցով։ Կենդանի խմորիչի մանրահատիկ պարունակության մեջ (պրոտոպլազմա) հստակ տեսանելի են մեծ վակուոլները։ Վակուոլները պրոտոպլազմայի ներսում գտնվող խոռոչներ են՝ լցված բջջային հյութով: Այն բաղկացած է էլեկտրոլիտներից, սպիտակուցներից, ածխաջրերից և ջրում լուծված ֆերմենտներից։ Երիտասարդ խմորիչ բջիջներում պրոտոպլազմը միատարր է, և զարգացման հետագա փուլերում պրոտոպլազմայում հայտնվում են վակուոլներ՝ լցված մետաբոլիկ արտադրանքներով բջջային հյութով։ Երբ սնուցող միջավայրը սպառվում է, շատ խմորիչներում առաջանում է սպորացում: Խմորիչի որոշ տեսակների մեջ սպորները կլորացված են և ծածկված հարթ կեղևով։ Բարենպաստ պայմաններում սպորները բողբոջում են։ Խմորիչները բնության մեջ լայն տարածում ունեն։ Դրանք հանդիպում են խաղողի, այլ հատապտուղների և մրգերի, կաթի, ջրի և հողի, ինչպես նաև մարդու մաշկի վրա։ Շատ խմորիչներ իրականացնում են ալկոհոլային խմորում և օգտագործվում են թխման, գինեգործության և գարեջրագործության մեջ ալկոհոլ արտադրելու համար։ 22 Նախակենդանիների մորֆոլոգիա Նախակենդանիները կենդանական աշխարհի միաբջիջ օրգանիզմներ են։ Միկրոօրգանիզմների շարքում դրանք ամենաբարդն են՝ ունենալով բազմաբջիջ կենդանիներին բնորոշ պարզունակ օրգաններ։ Նրանցից ոմանք ունեն բերանի խոռոչ և հետանցք, կծկվող և մարսողական վակուոլներ։ Նախակենդանիները բազմանում են անսեռ (բջիջների բաժանմամբ) և սեռական ճանապարհով։ Նախակենդանիների դասակարգումը հիմնված է շարժման մեթոդների վրա։ 1. Սարկոդ. Նրանք շարժվում և գրավում են սնունդը կեղծ ոտքերի օգնությամբ։ Տիպիկ ներկայացուցիչը Ամեոբան է։ Ամեոբաների չափերը չեն գերազանցում միկրոնը։

23 2. Դրոշակ. Նրանք ունեն խիտ պլազմային թաղանթ և շարժվում են դրոշակների օգնությամբ։ Դրոշակների հողային ձևերը շատ փոքր են (2-5 մկմ), իսկ ջրային ձևերը մեծ են (մինչև 20 մկմ): Տիպիկ ներկայացուցիչը Էուգլենան է։ 3. Թարթիչ. Ամենաբարձր կազմակերպված նախակենդանիները։ Բջիջների չափերը տատանվում են 20-ից 80 մկմ: Տիպիկ ներկայացուցիչը Paramecium shoe ciliate-ն է, որը մշակվում է որպես ձկան տապակի կեր։ 4. Սպորոզոաններ. ֆիքսված ձևեր. Շատ պաթոգեններ, ինչպիսիք են մալարիայի հարուցիչը՝ պլազմոդիումը։ Ամենապարզները լայնորեն տարածված են բնության մեջ։ Հանդիպում են ջրային մարմիններում, տիղմում և հողում։ Բնության մեջ նախակենդանիների արժեքը շատ բազմազան է։ Նրանք ապրում են տարբեր կենդանիների աղեստամոքսային տրակտում՝ մասնակցելով մարսողությանը բուսական սնունդ, մասնակցում են հողում օրգանական մնացորդների հանքայնացմանը, ինչպես նաև կեղտաջրերի մաքրման կայաններում կենսացենոզի կարևոր մասն են կազմում։ Սնվելով բակտերիաներով և կասեցված պինդ նյութերով՝ նրանք նպաստում են ջրի պարզաբանմանը։ Ամենապարզը կատարում է ցուցանիշների գործառույթը. որոշակի ձևերի մշակումը կարող է օգտագործվել կեղտաջրերի մաքրման որակը դատելու համար: Այսպիսով, ակտիվացված տիղմի բաղադրության մեջ ամեոբայի գերակշռությունը և թարթիչավորների բացակայությունը վկայում է բուժման օբյեկտների վատ աշխատանքի մասին: Թարթիչավոր Tetrahymena-ն լայնորեն օգտագործվում է առաջնային թունավորության գնահատման համար: Նախակենդանիների տարբեր տեսակներ ներկայացված են նկ. 12. Ջրիմուռների մորֆոլոգիա Ջրիմուռները բույսերի օրգանիզմների ընդարձակ խումբ են: Նրանց բոլորի համար ընդհանուր քլորոֆիլի առկայությունը և դրա արդյունքում առաջացած ֆոտոավտոտրոֆիկ սնուցումը, արևի լույսի և ածխածնի երկօքսիդի էներգիայի օգտագործմամբ օրգանական նյութեր սինթեզելու ունակություն: Շատ ջրիմուռների մեջ քլորոֆիլի կանաչ գույնը քողարկված է այլ պիգմենտներով: Նրանց թվում կան շատ փոքր միաբջիջ և բազմաբջիջ ձևեր, որոնք դասակարգվում են որպես միկրոօրգանիզմներ, ինչպես նաև 23.

24 բազմաբջիջ օրգանիզմներ, որոնք ապրում են ծովերում և օվկիանոսներում և երբեմն հասնում են հսկա չափերի… Մանրէաբանության ուսումնասիրության օբյեկտները մանրադիտակային չափերի որոշ ջրիմուռներ են: Նրանք ունեն տարբեր ձևեր և ապրում են ինչպես ցամաքում, այնպես էլ ջրային միջավայրում (նկ. 13): 24

25 Գործնական մաս Աշխատանքի նպատակն է ուսումնասիրել էուկարիոտների տարբեր խմբերի ներկայացուցիչների մորֆոլոգիան։ Աշխատանքի կատարման կարգը Ուսանողները ինքնուրույն պատրաստում են սնկերի, խմորիչի, ջրիմուռների և նախակենդանիների ներկայացուցիչների կենդանի պատրաստուկներ. դրանք մանրադիտակի են ենթարկվում x40 ոսպնյակով և ուրվագծվում են մանրադիտակի խոշորացման ցուցումով: Բորբոսնած սնկերը Aspergillus niger ձևավորում են բջիջներ՝ միջնորմներով միցելիումի տեսքով; Որոշ հիֆերի վրա կան չճյուղավորված կոնիդիոֆորներ՝ սպորներով: Կոնիդիոֆորները միաբջիջ են, գնդաձև ուռած, այտուցի մակերեսին կան կարճ քորոցաձև բջիջներ (ստերիգմատա), որոնցից յուրաքանչյուրը կտրված է սև գույնի կոնիդների շղթայից։ Այն օգտագործվում է օրգանական թթուներ և ֆերմենտներ ստանալու համար։ Penicillium chrysogenum hyphae-ը բաժանված են; Որոշ հիֆերի վրա կան ճյուղավորված կոնիդիոֆորներ՝ սպորներով: Կոնիդիաները ձևավորվում են ոլորուն ճյուղավորված կոնիդիոֆորների ծայրերում։ Այն օգտագործվում է հակաբիոտիկ պենիցիլին արտադրելու համար: 25

26 Խմորիչ Saccharomyces cerevisiae միայնակ խմորիչ օվալաձև և կլորացված բջիջներով; բազմանալ բողբոջելով: Օգտագործվում են գարեջրագործության, թխման, ալկոհոլի արտադրության մեջ։ Բնության մեջ դրանք հանդիպում են հատապտուղների և այլ մրգերի մակերեսին։ Saccharomyces vini բջջային ձևը օվալ է և կլոր; վերարտադրել բողբոջում; բողբոջելուց հետո նրանք որոշ ժամանակ չեն առանձնանում՝ կազմելով փոքր «ճյուղեր»։ Օգտագործվում է գինեգործության մեջ։ Rhodotorula glutinis բջջային ձևը էլիպսաձև է. միայնակ բջիջներ; բազմանալ բողբոջելով: Դրանք նարնջագույն են՝ բջիջներում կարոտինոիդների պարունակության պատճառով։ Կարող է աճել այնպիսի միջավայրերում, որտեղ նավթի ածխաջրածիններն են որպես ածխածնի աղբյուր: Օգտագործվում է որպես կերային խմորիչ։ Candida tropicalis խմորիչը օվալաձև և բարձր երկարաձգված բջիջներով՝ ձևավորելով «կեղծոմիցելիում»։ Կարող է աճել հանքային միջավայրում՝ որպես ածխածնի աղբյուր ածխաջրածիններով: Օգտագործվում է որպես կերային խմորիչ։ Արդյունաբերական մասշտաբով դրանք աճեցվում են ալկոհոլի և թղթի արտադրության թափոնների վրա: Ջրիմուռ Chlorella vulgaris-ը մանրադիտակային կանաչ ջրիմուռ է՝ կլորացված բջիջներով (5-10 մկմ տրամագծով); բազմանում են ավտոսպորներով, որոնք ձևավորվում են մայր բջջի ներսում 4-ից 32 քանակով և ազատվում նրա թաղանթի պատռվելուց հետո։ Դրանք կարող են օգտագործվել զանգվածային մշակման համար՝ կերային սպիտակուց ստանալու համար, ինչպես նաև փակ համակարգերում օդի վերածնման համար (սուզանավեր, տիեզերական կայաններև այլն): Scenedesmus sp. պատկանում է կանաչ ջրիմուռների խմբին; ունի օվալաձև բջիջների ձև; արտաքին բջիջները հաճախ ունեն սուր ծայրեր. բջիջները միացված են չորսով: Այն օգտագործվում է սննդի սպիտակուց ստանալու համար։ 26

27 Նախակենդանիներ Նախապատրաստումը պատրաստվում է օդափոխման բաքի ակտիվացված նստվածքից: Ուսումնասիրել նախակենդանիների հայտնաբերված ներկայացուցիչների մորֆոլոգիան և նկարել դրանք։ Զեկույցի բովանդակությունը 4. Միկրոօրգանիզմի լատիներեն անվանումը. 5. Բջջի մորֆոլոգիա (տրեք գծագիր, որը ցույց է տալիս մանրադիտակի խոշորացումը և պահպանելով բջիջների չափերի հարաբերակցությունը): 6. Ուսումնասիրված միկրոօրգանիզմների օգտագործումը արդյունաբերության մեջ. Վերահսկիչ հարցեր 1. Նկարագրեք սնկերի ներկայացուցիչների բջիջների ձևը և դրանց գործնական օգտագործումը: 2. Նկարագրեք խմորիչ բջիջների ձևը; անվանել ներկայացուցիչներին և պատմել դրանց գործնական օգտագործման մասին: 3. Պատմե՛ք միկրոջրիմուռների մորֆոլոգիայի և դրանց գործնական օգտագործման մասին: 4. Անվանեք նախակենդանիների ներկայացուցիչներին և պատմեք կենսատեխնոլոգիայի մեջ դրանց կիրառության մասին: Աշխատանք 3. Միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիայի ուսումնասիրության մեթոդները Բակտերիաների մորֆոլոգիայի ուսումնասիրման ամենատարածված մեթոդը միկրոօրգանիզմների մաքուր կուլտուրաներից կամ փորձանմուշից պատրաստված ֆիքսված պատրաստուկների մանրադիտակն է: Կենդանի վիճակում միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրությունն օգտագործվում է ավելի մեծ ձևերի ուսումնասիրության և բջիջների շարժունակության դիտարկման ժամանակ։ Միկրոօրգանիզմների ֆիքսված պատրաստուկների պատրաստում Միկրոօրգանիզմների ֆիքսված պատրաստուկներ պատրաստելու համար նախ պատրաստում են քսուք, չորացնում, ամրացնում, այնուհետև ներկում: Քսուքները պատրաստվում են անթերի մաքուր ապակե սլայդների վրա։ Ապակին կարելի է յուղազերծել էթիլային սպիրտով, ալկոհոլի և եթերի հավասար ծավալների խառնուրդով և այլն։

28 հեղուկ. Ապակու յուղազերծման ամենահեշտ և հարմար միջոցը այն երկու կողմից սրբելն է լվացքի օճառով: Օճառը ապակուց հանվում է չոր բամբակյա բուրդով կամ անձեռոցիկով։ Ագարի միջավայրի վրա աճեցված բակտերիաների գաղութից քսուքի պատրաստման ժամանակ մի կաթիլ ջուր կամ աղի լուծույթ նախ քսվում է յուղազերծված ապակու վրա: Այնուհետև մանրէաբանական օղակը կալցինացվում է այրիչի բոցի մեջ: Դրանից հետո փորձանոթի ներքին պատի օղակը սառեցնելուց հետո գաղութի մի մասն առանց ագարի գրավվում է օղակի կողմից։ Մշակույթի հետ օղակը ներմուծվում է բաժակի վրա ջրի կամ աղի կաթիլի մեջ և կատարվում են 2 3 շրջանաձև շարժումներ: Բակտերիաների մի մասը կասեցված է հեղուկի մեջ: Օղակի վրա մնացած բակտերիաների ավելցուկը այրվում է այրիչի կրակի մեջ՝ շիկացնելով օղակը: Այնուհետև կախոցի մի կաթիլը սառեցված օղակով ցրվում է ապակու վրա։ Քսվածքի տարածքը պետք է լինի 1,5-2 սմ տրամագծով, քսուքը պետք է լինի բարակ՝ նյութի միատեսակ բաշխմամբ։ Եթե ​​հեղուկ սննդարար միջավայրի վրա աճեցված մշակույթից քսուք են պատրաստվում, ապա, պահպանելով ստերիլության նույն կանոնները, կուլտուրայի մի կաթիլ հավաքում են օղակով կամ պիպետտով և քսում անյուղ ապակու մեջտեղում: Պիպետտը մնացած կուլտուրայի հետ ընկղմվում է ախտահանիչ լուծույթով անոթի մեջ։ Կաթիլը մանրէաբանական օղակով հավասարաչափ բաշխվում է ապակու վրա: Օղակը այրվում է այրիչի բոցի մեջ և տեղադրվում եռոտանի կամ բաժակի մեջ։ Քսուքը չորանում է օդում կամ տաք օդի հոսքի մեջ՝ այն պահելով այրիչի բոցից բարձր երկայնական կողերով։ Քսվածքի եզրագծերը ուրվագծվում են մոմ մատիտով հակառակ կողմըապակի, իսկ քսուքի կողքին բաժակի մի ծայրին դրեք դեղամիջոցի համարը: Այս նշաններով դուք հեշտությամբ կարող եք նավարկել ապակու վրա քսուքի տեղը: Չորացրած քսուքը ամրացվում է: Ֆիքսացիան ունի հետևյալ նպատակները. 1) սպանել մանրէները, ինչը դեղը դարձնում է անվտանգ հետագա աշխատանքի համար. 2) ապակու վրա մանրէներ ամրացնել, որպեսզի ներկելիս և ջրով լվանալիս չլվանան. 3) բարելավել ներկերի զգայունությունը. 28

29 Ամենապարզը, հարմար գրեթե բոլոր մանրէաբանական օբյեկտների համար և պրակտիկայում ամենատարածված մեթոդը այրիչի կրակի մեջ ամրացումն է: Դրա համար ապակու սլայդը 3-4 անգամ անցնում է այրիչի բոցի ամենաթեժ վերին մասով՝ խուսափելով պատրաստուկի ավելորդ գերտաքացումից, որպեսզի չառաջացնի սպիտակուցի դենատուրացիա և չխախտի բակտերիաների կառուցվածքն ու մորֆոլոգիան: Տարբերակել պարզն ու բարդը դիֆերենցիալ մեթոդներգունավորում. Պարզ ներկավորումն օգտագործվում է փորձարկման նյութում մանրէները հայտնաբերելու, դրանց թիվը, ձևը և գտնվելու վայրը որոշելու համար: Պարզ երանգավորումը բաղկացած է պատրաստուկի վրա ցանկացած անիլինային ներկ կիրառելուց: Ամենից հաճախ այդ նպատակների համար օգտագործվում է մանուշակագույն կարմիր գույն, ինչպես նաև մեթիլեն կապույտ (Լեֆլեր կապույտ) կապույտ գույնի ալկալային լուծույթ: Գունավորման տեխնիկա. լավ ամրացված պատրաստուկը տեղադրվում է քսուքով դեպի վեր՝ լոգանքի վերևում գտնվող ապակե կամրջի վրա: Նշված ներկերից մեկը քսվում է քսուքի մակերեսին խողովակով կամ կաթիլային կաթիլից։ Ֆուկսինը քսուք 1-ի վրա պահվում է 3 րոպե, իսկ կապույտ 3-ի վրա՝ 5 րոպե։ Ներկը քամում են քսուքից, պատրաստուկը լվանում ջրով, չորացնում օդում կամ նրբորեն քամում ֆիլտրի թղթով։ Չորացրած քսուքի վրա քսվում է ընկղման յուղի մի կաթիլ, պատրաստուկը տեղադրվում է մանրադիտակի բեմի վրա և մանրադիտակով անցնում ընկղմման օբյեկտով (90) հաղորդվող լույսի ներքո: Բակտերիաների ներկման տարբեր մեթոդներ. Բարդ գունազարդման մեթոդներն ունեն մեծ նշանակությունսահմանման և տարբերակման մեջ տարբեր տեսակներմանրէներ. Դրանք հիմնված են մանրէաբանական բջջի ֆիզիկաքիմիական կառուցվածքի առանձնահատկությունների վրա և օգտագործվում են բջջի կառուցվածքի մանրամասն ուսումնասիրության և նույնականացման համար։ բնորոշ նշաններորոշ ներկերի համար: Այս մեթոդներով քսուքը ներկվում է մի քանի ներկերով և լրացուցիչ մշակվում մուրանտներով կամ սպիտակեցնող նյութերով, սպիրտով, թթվով և այլն: Այս մեթոդները ներառում են բակտերիաների տարբերակման ամենակարևոր ներկման մեթոդը՝ Գրամ բիծը: Այս մեթոդը բացահայտում է 29

30 բակտերիաների կարողությունը պահպանել ներկը կամ գունաթափվել ալկոհոլի մեջ, ինչը կապված է բջջային պատի քիմիական կառուցվածքի հետ: Բոլոր բակտերիաները բաժանվում են երկու խմբի՝ ըստ բջջային պատի կառուցվածքի. Գրամ բիծի հետ կապը բակտերիաների այնպիսի կարևոր դիֆերենցիալ հատկանիշ է, որ այն անպայմանորեն նշվում է դրանց բնութագրման մեջ և ծառայում է որպես տաքսոնոմիկ հատկանիշ: 30 գրամ բիծի տեխնիկա Զտիչ թղթի շերտը, որը նախկինում ներծծված էր ժանտային մանուշակով, դրվում է ֆիքսված քսուքի վրա: 3-5 կաթիլ ծորակից ջուր քսեք շերտի վրա։ 1-2 րոպե հետո թուղթը հեռացնում են պինցետով, իսկ Լուգոլի լուծույթը լցնում են պատրաստուկի վրա։ 30 վայրկյան 1 րոպե հետո Լուգոլի լուծույթը քամվում է: Կիրառեք մի քանի կաթիլ 96 O սպիրտ: Գունաթափեք 1 րոպե, մինչև մոխրագույն-մանուշակագույն հոսքերը անհետանան: Դեղը լվանում է ջրով: Ֆուկսինը լցնում են քսուքի վրա և պահում 1-2 րոպե։ Ներկը քամում են, պատրաստուկը լվանում ջրով, չորացնում ֆիլտր թղթով։ Միկրոսկոպիկ՝ ընկղմման համակարգով: Գրամ-դրական բակտերիաները ներկում են մանուշակագույն-կապույտ (օրինակ՝ բուտիրային խմորման բացիլը Clostridium pasteurianum), իսկ գրամ-բացասական բակտերիաները ներկում են վարդագույն-կարմիր (Escherichia coli): Ի լրումն այս ավանդական Gram ներկման տեխնիկայի, կա արագ և հեշտ մեթոդ Գրամ տարբերակման համար առանց ներկելու: Բակտերիալ բջիջները (ցանկալի է 1-2 օրական) տեղադրվում են օղակի մեջ՝ 3% KOH կաթիլով ապակե սլայդի վրա, շրջանաձև շարժումներով խառնում և 5-8 վրկ հետո օղակը կտրուկ բարձրացվում է։ Գրամ-բացասական բակտերիաների կախոցը դառնում է մածուցիկ և ձգվում է օղակի հետևում՝ ձևավորելով լորձաթաղանթներ։ Գրամ դրական բակտերիաները հավասարաչափ բաշխված են մի կաթիլ ալկալիի մեջ (ինչպես ջրի մեջ): Արձագանքը համարվում է բացասական, եթե 60 վ-ի ընթացքում լորձաթաղանթների առաջացում չի նկատվում։ Մածուցիկության բարձրացումը պայմանավորված է լուծույթում գրամ-բացասական բակտերիաների բջջային պատերի լուծմամբ

31 ալկալիների և ԴՆԹ-ի թողարկում: Բակտերիաների գրամ տարբերակումն առանց ներկման պետք է օգտագործվի միայն նախնական ախտորոշման կամ Գրամ-դրական և գրամ-բացասական բակտերիաների գաղութների մոտավոր հարաբերակցությունը հաշվարկելու համար: Կենդանի և մեռած բջիջների նույնականացումը մեթիլեն կապույտով ներկելու միջոցով Կենդանի և մեռած բջիջների թիվը կարելի է որոշել մեթիլեն կապույտի լուծույթով ներկելու միջոցով: Մեթոդը հիմնված է միկրոօրգանիզմների կենդանի և մահացած բջիջների տարբեր թափանցելիության վրա։ Մահացած բջիջներում բջիջների թափանցելիությունը խաթարված է, ուստի ներկն ազատորեն անցնում է ցիտոպլազմային թաղանթով և ներծծվում պրոտոպլազմայի կողմից: Մանրադիտակի տակ մահացած բջիջները կապույտ են թվում, կենդանիները՝ անգույն կամ գունատ կապույտ։ Գունավորումն իրականացվում է հետևյալ կերպ. 2% մեթիլեն կապույտ լուծույթի կաթիլը կիրառվում է ապակե սլայդի վրա, որը ծածկված է ծածկով, ավելորդ ներկը հանվում է ֆիլտրի թղթի կտորով: Դեղը դիտվում է մանրադիտակի տակ, 10 տեսադաշտում հաշվվում է կենդանի և մահացած բջիջների քանակը. մահացած բջիջների թիվը արտահայտվում է տոկոսներով: Օրինակ՝ մեկ տեսադաշտում կենդանի բջիջների միջին թիվը 10 է, մեկ տեսադաշտում մահացած բջիջների միջին թիվը՝ 5, ընդհանուր թիվըբջիջները մեկ տեսադաշտի բջիջներում 100% 5 բջիջ X X 33,3% 15 Այսպիսով, միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրված կախույթում մահացած բջիջների թիվը կազմել է 33,3%: Բջիջների չափերի որոշում Միկրոօրգանիզմների բջիջների չափերը որոշելու համար անհրաժեշտ է ունենալ հատուկ կշեռք (աչքի միկրոմետր) և օբյեկտ-միկրոմետր: Աչքի միկրոմետր, 31-ում

32 ամենապարզ դեպքում դա ապակե սկավառակ է՝ վրան տպված գծային մասշտաբով, որը մտցվում է ակնաբույժի մեջ (նկ. 14ա)։ Օբյեկտ-միկրոմետրը ապակե սլայդ է, որի կենտրոնում փորագրված է 1 մմ երկարությամբ գծային սանդղակ՝ 10 մկմ բաժանման արժեքով։ Չափումից առաջ անհրաժեշտ է որոշել ակնային միկրոմետրի բաժանման արժեքը մանրադիտակի յուրաքանչյուր խոշորացման համար: Դրա համար միկրոմետրային առարկան տեղադրվում է մանրադիտակի բեմի վրա և դիտարկվում որպես պատրաստուկ; այս դեպքում օբյեկտ-միկրոմետրի տեսանելի բաժանումներից մեկը համընկնում է աչքի միկրոմետրի սանդղակի զրոյական նշանի հետ, և երկու մասշտաբների բաժանումները համընկնում են (նկ. 15): Հաշվեք, թե քանի աչքի և օբյեկտիվ բաժանումներ են ընկնում այս հատվածի վրա և հաշվարկեք աչքի միկրոմետրի բաժանումների արժեքը: Եթե ​​դրանից հետո օբյեկտ-միկրոմետրի փոխարեն օբյեկտի սեղանին տեղադրվի միկրոօրգանիզմների պատրաստուկ և այն հետազոտվի 32.

33 նույն խոշորացմամբ հնարավոր է չափել մանրէաբանական բջիջի չափը՝ օգտագործելով աչքի միկրոմետրի սանդղակը որպես քանոն: Ճշգրիտ չափումների համար օգտագործվում է հատուկ աչքի միկրոմետր՝ սահող զրոյական նշանով, որը կապված է չափիչ թմբուկի հետ (նկ. 14b): Այն թույլ է տալիս միկրոօրգանիզմների չափերը որոշել տասներորդական միկրոնի ճշգրտությամբ: Զրոյական նշանը կրկնակի ուղղահայաց գիծ է, որի մեջտեղը համապատասխանում է խաչի տեսքով երկու բարակ գծերի հատմանը։ Նախքան չափումները, անհրաժեշտ է պարզել չափիչ թմբուկի մասշտաբի բաժանման արժեքը: Հղման օբյեկտը միկրոմետր է: Չափիչ թմբուկը պտտելով՝ օբյեկտ-միկրոմետրի սանդղակի մի քանի բաժանումներ զրոյական նշանով պտտվում են։ Կրկնակի ուղղահայաց գիծը ցույց է տալիս չափիչ թմբուկի ամբողջական պտույտների թիվը: Կատարելով միկրոօրգանիզմների չափումներ, տեղափոխեք զրոյական նշանը օբյեկտի երկայնքով և կարդացեք չափիչ թմբուկի ընթերցումները: Գործնական մաս Աշխատանքի նպատակն է տիրապետել միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիայի ուսումնասիրության հիմնական մեթոդներին։ 33

34 Աշխատանքային կարգ 1. Կաթնաթթվային բակտերիաների ֆիքսված պատրաստուկներ պատրաստել բիոկեֆիրից և ացիդոֆիլից: 2. Gram- stain Bacillus subtilis (գրամ+) և Escherichia coli (գրամ-) բջիջները: 3. Որոշեք Saccharomyces cerevisiae խմորիչ բջիջների չափը: 4. Որոշեք Saccharomyces cerevisiae-ի կենդանի և մահացած բջիջների քանակը խմորիչի կախոցում: 34 Զեկույցի բովանդակությունը 1. Կաթնաթթվային բակտերիաների բջիջների մորֆոլոգիա (կաթնաթթվային բակտերիաների ֆիքսված պատրաստուկների գծագրեր՝ մանրադիտակի մեծացման ցուցումով): 2. Գրամ-բացասական և գրամ դրական բակտերիաների ֆիքսված պատրաստուկների գծագրեր. 3. Աչքի միկրոմետրի չափիչ թմբուկի բաժանման արժեքի որոշումը: 4. Saccharomyces cerevisiae խմորիչ բջիջի չափերը: 5. Թթխմորի կախույթի կենդանի և մահացած բջիջների քանակը: Վերահսկիչ հարցեր 1. Ինչպե՞ս պատրաստել բակտերիաների ֆիքսված պատրաստուկ: 2. Ինչո՞վ է պայմանավորված բակտերիաների տարբերությունը Գրամ ներկում: 3. Ի՞նչ է Գրամ ներկման մեթոդը: 4. Ինչպե՞ս որոշել միկրոօրգանիզմների չափերը: 5. Ինչպե՞ս որոշել միկրոօրգանիզմների կենդանի և մահացած բջիջների քանակը՝ ներկելով մեթիլեն կապույտով: Թեմա 2. Միկրոօրգանիզմների մշակում. սնուցող միջավայրի պատրաստման սկզբունքներ; ստերիլիզացման մեթոդներ; Միկրոօրգանիզմների մշակաբույսերի և ենթամշակույթների մեթոդներ. Սննդային միջավայրերի դասակարգում և պատրաստում Միկրոօրգանիզմներ մշակելը նշանակում է արհեստականորեն ստեղծել պայմաններ նրանց աճի համար: Մշակության համար

Լաբորատորիայում կամ արդյունաբերության մեջ 35 միկրոօրգանիզմներ, օգտագործվում են սնուցող միջավայրեր, որոնք պարունակում են միկրոօրգանիզմների կենսագործունեության համար անհրաժեշտ բոլոր նյութերը։ Շրջակա միջավայրից սննդանյութերը մտնում են միկրոօրգանիզմի բջիջ, և նյութափոխանակության արտադրանքները բջջից դուրս են բերվում շրջակա միջավայր: Միկրոօրգանիզմների կենսագործունեության համար անհրաժեշտ են ջուր, ածխածին, թթվածին, ազոտ, ծծումբ, ֆոսֆոր, կալիում, կալցիում, մագնեզիում, երկաթ և հետքի տարրեր։ Այս բոլոր նյութերը պետք է պարունակվեն սննդարար միջավայրում: Առանց դրանցից մեկի էլ կա՛մ ընդհանրապես աճ չի լինի, կա՛մ աննշան կլինի։ Ածխածինը, ջրածինը, ազոտը, ֆոսֆորը և ծծումբը կոչվում են կենսագեն տարրեր, քանի որ դրանք կազմում են բջիջների չոր զանգվածի մոտ 90-95%-ը: Կալիումը, մագնեզիումը, կալցիումը և նատրիումը կոչվում են մակրոէլեմենտներ կամ մոխրի տարրեր: Դրանք կազմում են բջիջների չոր զանգվածի մինչև 5-10%-ը։ Երկաթը, մանգանը, մոլիբդենը, կոբալտը, պղինձը, վանադիումը, ցինկը, նիկելը և մի շարք այլ ծանր մետաղների կատիոններ կոչվում են հետքի տարրեր և կազմում են բջիջների չոր զանգվածի տոկոսը: Ածխածինն ամենամեծ նշանակությունն ունի ցանկացած կենդանի օրգանիզմի համար։ Այն ներառված է բոլորի մեջ օրգանական մոլեկուլներխցում և կազմում է չոր կենսազանգվածի մոտ 50%-ը։ Ածխածնի առնչությամբ բոլոր օրգանիզմները բաժանվում են ավտոտրոֆ և հետերոտրոֆ։ Ավտոտրոֆներն օգտագործում են ածխածնի երկօքսիդը որպես ածխածնի աղբյուր։ Հետերոտրոֆներին անհրաժեշտ են պատրաստի օրգանական միացություններ։ Տարբեր օրգանական նյութեր կարող են ծառայել որպես ածխածնի աղբյուր միկրոօրգանիզմների մեծ մասի համար՝ սպիտակուցներ և դրանց քայքայման արտադրանք, ածխաջրեր, ճարպեր, ածխաջրածիններ: Ազոտի սնուցումն իր արժեքով երկրորդ տեղում է ածխածնից հետո։ Ազոտը ամինաթթուների և այլ բջջային բաղադրիչների մի մասն է, որոնք ապահովում են օրգանիզմների կենսունակությունը։ Ազոտը կազմում է բջիջների չոր նյութի 14%-ը։ Ազոտի աղբյուրը ազոտ պարունակող օրգանական կամ հանքային միացություններ են։ Հանքային ազոտի ամենատարածված աղբյուրներն են ամոնիումի աղերը և նիտրատները: Որպես ազոտի օրգանական աղբյուրներ օգտագործվում են սպիտակուցներ, ամինաթթուներ, նուկլեոտիդներ։ Որոշ պրոկարիոտներ կարող են օգտագործել մթնոլորտային ազոտ: 35

36 Ֆոսֆորը և ծծումբը բջջային կարևոր կենսապոլիմերների մի մասն են: Ֆոսֆորը (բջջային չոր նյութի 3%-ը) նուկլեոտիդների և ATP-ի մի մասն է, իսկ ծծումբը (1%-ից պակաս)՝ որոշ ամինաթթուների մաս։ Որպես ֆոսֆորի աղբյուր սովորաբար օգտագործվում են ֆոսֆատներ, իսկ ծծումբները սուլֆատներ են։ Ֆոսֆորն ու ծծումբը կարող են օգտագործվել նաև օրգանական միացությունների տեսքով։ Միկրոօրգանիզմների աճի համար փոքր քանակությամբ պահանջվում են մակրոէլեմենտներ՝ իոններ ալկալիական մետաղներ(Na+, K+) և հողալկալային մետաղներ(Mg 2+, Ca 2+), որոնք խաղում են կարևոր դերմիկրոօրգանիզմների գործունեության մեջ. Մանրէաբանական բջիջներում մակրոէլեմենտներն անհրաժեշտ են թափանցելիությունը, օսմոտիկ ճնշումը և pH-ը կարգավորելու համար: Բացի այդ մետաղներից, մանրէների աճի համար անհրաժեշտ են մի շարք հետքի տարրեր (հետքի տարրեր): Հանքային բաղադրությունսնուցող միջավայրը կազմում է բջջի մակերեսի վրա էլեկտրական լիցքերի բաշխումը: Բջիջների էլեկտրական ներուժի փոփոխությունը կարող է փոխել նրանց ֆիզիոլոգիական ակտիվությունը: Հետքի տարրերի հիմնական գործառույթներից է մասնակցությունը ֆերմենտային կատալիզմանը: Ներկայումս բջջի բոլոր ֆերմենտների չորրորդ մասի գործողությունը կապված է մետաղների հետ։ Սննդային միջավայրի հիմնական բաղադրիչներից բացի, որոշ մանրէների բնականոն զարգացման համար անհրաժեշտ են նաև լրացուցիչ նյութեր, որոնք կոչվում են «աճի գործոններ»։ Աճի գործոնները տարբերի համակցված անվանումն է քիմիական բնույթկապեր. Սրանք հիմնականում օրգանական նյութեր են, որոնց ավելացումը շատ փոքր քանակությամբ խթանում է միկրոօրգանիզմների աճն ու բազմացումը։ Նրանք միկրոբների համար նույնն են, ինչ վիտամինները բարձրակարգ օրգանիզմների համար: Աճի գործոնները հիմնականում B խմբի վիտամիններն են, որոնք խաղում են մանրէների նյութափոխանակության կարգավորիչների և խթանողների դերը կամ ամինաթթուները։ Որպես աճի գործոններ օգտագործվում են խմորիչի աուտոլիզատը, խմորիչի էքստրակտը, բնածին սպիտակուցները (արյուն, շիճուկ) և այլն:Միկրոօրգանիզմների սննդային պահանջները շատ բազմազան են: Այս պատճառով չկա ունիվերսալ 36

37 միջին, հավասարապես հարմար ցանկացած միկրոօրգանիզմի մշակման համար: Կախված աճեցման նպատակներից և տվյալ միկրոօրգանիզմի կարիքներից՝ սննդանյութերը տարբերվում են երեք եղանակով՝ կազմով. ֆիզիկական վիճակև նշանակում։ Կազմով սննդանյութերը բաժանվում են երկու խմբի՝ 1) բնական (բնական); 2) արհեստական ​​(սինթետիկ). Բնական միջավայրերը նրանք են, որոնք ունեն անորոշ քիմիական բաղադրություն, քանի որ դրանք ներառում են բուսական կամ կենդանական ծագման արտադրանք, օրգանական միացություններ պարունակող տարբեր արդյունաբերության թափոններ: Բնական սննդանյութերը ապահովում են միկրոօրգանիզմների լայն տեսականի ինտենսիվ աճ: Դրանք պարունակում են օրգանական և անօրգանական միացությունների հարուստ հավաքածու՝ ներառյալ բոլոր անհրաժեշտ տարրերը և լրացուցիչ նյութերը։ Օրինակ, լաբորատորիայում առավել հաճախ օգտագործվում են հետևյալ մշակութային միջավայրերը. 1. Մսային պեպտոն արգանակի (ՄՊԲ) քաղվածք մսից, պարունակում է սպիտակուցի թերի քայքայման պեպտոնների արտադրանք, որոնք պարունակում են օրգանական ածխածին, օրգանական ազոտ, ֆոսֆոր պարունակող, ծծումբ պարունակող օրգանական նյութեր։ BCH-ը պարունակում է նաև միկրոօրգանիզմների համար անհրաժեշտ բոլոր հանքանյութերը: MPB-ն օգտագործվում է բազմաթիվ տեսակի բակտերիաների մշակման մեջ։ 2. Բողբոջած գարու հատիկներից գարեջուրի քաղվածք, որը պարունակում է շաքար (հիմնականում մալթոզա) որպես ածխածնի աղբյուր, ազոտային նյութեր, մոխիրի տարրեր, աճի տարբեր գործոններ և B խմբի վիտամիններ: Գարեջուրը լավ միջավայր է բազմաթիվ միկրոօրգանիզմների, մասնավորապես խմորիչի զարգացման համար: , բորբոս սնկերը. Լավ բնական միջավայրն են կաթը, կարտոֆիլը, մրգերի և բանջարեղենի եփուկները: Արդյունաբերության մեջ սովորաբար օգտագործվում են կիսասինթետիկ կամ բնական կրիչներ։ Շատ հաճախ որպես ածխածնի աղբյուր օգտագործվում են մանրէաբանական կամ սննդի արդյունաբերության թափոնները՝ մելասը (շաքարի արտադրության թափոններ), 37

Ռուսաստանի Դաշնության Գյուղատնտեսության նախարարության ՖԵԴԵՐԱԼ ՁԿՆՈՐՍԱԿԱՆ ԳՈՐԾԱԿԱԼՈՒԹՅՈՒՆ ԿԱՄՉԱՏԿԱ ՊԵՏԱԿԱՆ ՏԵԽՆԻԿԱԿԱՆ ՀԱՄԱԼՍԱՐԱՆ ԿԵՆՍԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ ԵՎ ՔԻՄԻԱՅԻ ՔԻՄԻԱՅԻ ԵՎ ՋՐԱՅԻՆ ՄԱՆՐԵԲԱՆՈՒԹՅԱՆ ՊԱՏՐԱՍՏՄԱՆ ԲԱԺԻՆ.

Ազգանունը Կոդ Անունը Աշխատանքային տեղամասի ծածկագիրը Ընդհանուր. XXXII Համառուսաստանյան տարածաշրջանային փուլի գործնական փուլի առաջադրանքները: ԿԵՆՍԱՔԻՄԻԱ. ԷՔՍՏՐԱՔՏՆԵՐԻ ՆԱՍԿԱՑՈՒՄ Սարքավորումներ.

Ազգանուն Կոդ Անունը Շրջանի/քաղաքի Աշխատանքային վայրի ծածկագիրը Ընդամենը՝ XXVIII մարզային փուլի գործնական փուլի ԱՌԱՋԱԴՐԱՆՔՆԵՐ. Համառուսական օլիմպիադակենսաբանության ուսանողներ. 2011-12 ուսումնական տարի տարին։ 11-րդ դասարան Կենսաքիմիա. Սարքավորումներ,

Մանրէաբանություն Բացատրական Ծանոթագրություն «Մանրէաբանություն» ԴԱՍԸՆԹԱՑԻ ԱՇԽԱՏԱՆՔԱՅԻՆ ԾՐԱԳՐԻ 9-րդ դասարանի «Մանրէաբանություն» ընտրովի դասընթացի հեղինակային ծրագրի հիման վրա Ավերչինկովա Օ.Է.Կենսաբանություն. ընտրովի դասընթացներ. Բժշկական

ԱՌԱՋԱԴՐԱՆՔՆԵՐ ՄԱՆՐԱԲԻՈԼՈԳԻԱ (առավելագույնը 20 միավոր) Աշխատանքի նպատակը. Պատրաստել և վերլուծել պատրաստուկներ երկու հայտնի ֆերմենտացված կաթնամթերքից։ Սարքավորումներ՝ մանրադիտակներ, այրիչներ կամ ոգեղեն լամպեր, ապակե սլայդներ,

ՊՐՈԿԱՐԻՈՏՆԵՐԻ ԹԱԳԱՎՈՐՈՒԹՅՈՒՆ ԲԱԿՏԵՐԻԱՅԻ ԵՆԹԱԹԱԳԱՎՈՐՈՒԹՅՈՒՆ Բակտերիաները պրոկարիոտներ են։ Սրանք ամենապարզ, ամենափոքր և ամենատարածված օրգանիզմներն են, որոնք գոյություն ունեն երկրի վրա ավելի քան 2 միլիարդ տարի, բայց միասին.

Համակարգ ՕՐԳԱՆԱԿԱՆ ԱՇԽԱՐՀԻԵրկրի վրա գոյություն ունեցող բոլոր օրգանիզմները բաժանված են չորս թագավորությունների՝ Դրոբյանկի, Սունկ, Բույսեր, Կենդանիներ։ Որսորդական հրացանները պատկանում են պրոկարիոտներին (նախամիջուկային օրգանիզմներ), սնկերին, բույսերին,

Նախագծի թեման Մոսկվայի Բուտովսկու անտառի լճացած ջրամբարում ապրող միկրոօրգանիզմների ուսումնասիրություն Հեղինակ(ներ) Դիանա Կասաևա, Քրիստինա Կասաևա, Ալիսա Տկաչենկո Դպրոց՝ GBOU SOSH 1945 Դասարան՝ 5-րդ դասարան Ղեկավար.

Լաբորատոր աշխատանք «Կափարիչ սնկերի մարմինների կառուցվածքը» Նպատակը. ուսումնասիրել գլխարկային սնկերի մարմնի կառուցվածքը Սարքավորումներ՝ գլխարկային սունկ (խոզի սունկ, ռուսուլա, շամպինիոն, բուլետուս, կարագ, մեղրի ագարիկ և այլն), պատրաստ.

ԲԱՐՁՐԱԳՈՒՅՆ ՄԱՍՆԱԳԻՏԱԿԱՆ ԴԱՇՆԱԿԱՆ ՊԵՏԱԿԱՆ ՈՒՍՈՒՄՆԱԿԱՆ ՈՒՍՈՒՄՆԱԿԱՆ ՀԱՍՏԱՏՈՒԹՅՈՒՆ «Պ.Ա.

Ես հաստատում եմ Ռուսաստանի Դաշնության գլխավոր պետական ​​սանիտարական բժշկի տեղակալ - Ռուսաստանի Առողջապահության նախարարության Պետական ​​սանիտարահամաճարակային հսկողության դաշնային կենտրոնի գլխավոր բժիշկ Է.Ն. ԲԵԼՅԱԵՎ 2004 թվականի փետրվարի 20 N 24FTs / 900 Ամսաթիվ

ՀետազոտությունԽմորիչ. փոքրիկ սնկերի հուզիչ կյանքը Աշխատանքի հեղինակ՝ 5 «B» դասարանի GBOU Gymnasium 1748 «Ուղղահայաց» Կուտայցև Գեորգի Վալերիևիչ Ղեկավար՝ Նոսովա Ելենա Վլադիմիրովնա,

Սննդամթերքի մեջ խմորիչների և բորբոսների հայտնաբերման մեթոդ ՄԵԹՈԴԱԿԱՆ ԱՌԱՋԱՐԿՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐ Սննդի մեջ խմորիչների և բորբոսների հայտնաբերման մեթոդներ Ուղեցույցներ.- Մ.: դաշնային կենտրոն

Թեմա 4. Բակտերիաներ. Սունկ. Քարաքոսեր. Մաս Ա. 1. Քարաքոսում ցիանոբակտերիաների առկայությունը ապահովում է 1) մթնոլորտի և հողի խոնավության կլանումը 2) լույսի օգտագործումը սննդանյութեր ձևավորելու համար.

ԿԵՆՍԱԲԱՆՈՒԹՅՈՒՆ ԿԵՆԴԱՆԻ ԲՆՈՒԹՅԱՆ ԳԻՏՈՒԹՅՈՒՆԸ Կենսաբանությունը ուսումնասիրում է. z օրենքներ անհատի եւ պատմական զարգացումօրգանիզմներ. 3 ՀԱՄԱԿԱՐԳ ՕՐԳԱՆԱԿԱՆ

1. Նիտրացնող բակտերիաները դասակարգվում են որպես 1) քիմոտրոֆներ 2) ֆոտոտրոֆներ 3) սապրոտրոֆներ 4) հետերոտրոֆներ ԹԵՄԱ «Ֆոտոսինթեզ» 2. Արևի լույսի էներգիան բջիջներում վերածվում է քիմիական էներգիայի 1) ֆոտոտրոֆների.

ՄԱՆՐԱՊԵՏՈՒԹՅՈՒՆ ԵՎ ԳԵՆԵՏԻԿԱ Առաջադրանք 1. Պատրաստել և վերլուծել պատրաստուկներ երկու հայտնի ֆերմենտացված կաթնամթերքից: (առավելագույնը 10 միավոր) Սարքավորումներ. մանրադիտակներ, այրիչներ կամ ոգելից լամպեր, ապակե սլայդներ,

«Մանրէաբանություն» մասնագիտության որակավորման թեստեր Հավաստագրմանը նախապատրաստվելու համար թեստային առարկաների բանկ Ընտրեք մեկ կամ մի քանի ճիշտ պատասխան.

Առաջադրանքներ 3. Միաբջիջ և բազմաբջիջ օրգանիզմներ. Սնկի թագավորություն 1. Ի՞նչ են պարունակում լորձաթաղանթի երկար ճյուղերի ծայրերում գտնվող սև գնդիկները: 1) մանրադիտակային մրգեր 2) սննդանյութեր 3)

ԴԱՇՆԱԿԱՆ ՊԵՏԱԿԱՆ ԲՅՈՒՋԵՏԱՅԻՆ ՈՒՍՈՒՄՆԱԿԱՆ ՈՒՍՈՒՄՆԱԿԱՆ ՀԱՍՏԱՏՈՒԹՅՈՒՆ «ՕՐԵՆԲՈՒՐԳԻ ՊԵՏԱԿԱՆ ԱԳՐԱՐԱՅԻՆ ՀԱՄԱԼՍԱՐԱՆ» Ուղեցույց ուսանողների ինքնուրույն աշխատանքի համար.

Միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիա Տարբերակ 1 1. Gracilicutes են՝ A. բարակ պատերով բակտերիաներ B. հաստ պատերով բակտերիաներ C. բակտերիաներ՝ թերի բջջային պատով: G. բակտերիաներ նուրբ բջջային պատով: 2. Կ

Առաջադրանք ուսանողների համար. անհրաժեշտ է ընտրել ճիշտ պատասխանները (կարող են լինել մեկից մի քանիսը): Միկրոօրգանիզմների մորֆոլոգիա Տարբերակ 1 1. Gracilicutes են՝ A. բարակ պատերով բակտերիաներ B. հաստ պատերով.

Ջրիմուռներ Ջրիմուռների ստորին բույսեր Ջրիմուռը ստորին բույսերի ընդարձակ և տարասեռ խումբ է: Ջրիմուռները մոլորակի համար ամենաբազմաթիվ և ամենակարևոր ֆոտոսինթետիկ օրգանիզմներից մեկն են։ Նրանք հանդիպում են

Քաղաքային բյուջետային ուսումնական հաստատություն Ալարի միջն հանրակրթական դպրոց«Վերանայված» ՊՆ պետի արձանագրություն 0 թ. «Համաձայնեցված» Ջրային ռեսուրսների կառավարման գծով փոխտնօրեն MBOU 0 y «Հավանություն եմ տալիս».

1 Միկրոօրգանիզմների հետ աշխատանքի հիմնական մեթոդներ Առաջադրանք 1. Ներածություն մանրէաբանության մեջ Անվտանգության նախազգուշական միջոցներ միկրոօրգանիզմների հետ աշխատելիս Առաջադրանքի նպատակը. Այս առաջադրանքը ձեզ կծանոթացնի անվտանգ աշխատանքի կանոններին

Առաջադրանքներ 2. Օրգանիզմների բջջային կառուցվածքը 1. Ինչ քիմիական տարրարդյո՞ք բջջի կենսական օրգանական միացությունների մի մասն է: 1) ֆտոր 2) ածխածին 3) պղինձ 4) կալիում 2. Որպես պահեստային նյութ.

Բորբոսը սնկերի ֆիզիկական գործոնների ազդեցությունը սնկերի աճի և զարգացման վրա: Լոգունով Ստեփան 7գ Ծրագրի ղեկավար Բուլիչևա Մ.Բ. Հետազոտության համապատասխանությունը Սնկերի սպորները բարձր դիմացկուն են անբարենպաստ գործոնների նկատմամբ

Թեստ 5 Տարբերակ 1. Թեմա «Սունկ» Առաջադրանքներ մեկ ճիշտ պատասխանի ընտրությամբ. 1. Սնկերի և բույսերի հիմնական տարբերությունն այն է, որ նրանք՝ ունեն բջջային կառուցվածք, հողից կլանում են ջուրը և հանքային աղերը,

1. Բացատրական նշում Ծրագիրը նախատեսված է FGBOU VPO BSU մասնագիտությամբ ասպիրանտուրայի դիմորդների համար 03.02.03 - Մանրէաբանություն Բարձր որակավորում ունեցող մասնագետների վերապատրաստման ծրագիր ուղղությամբ

ԸՆԴՀԱՆՈՒՐ ՄԱՆՐԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ
Գլուխ I. Մանրադիտակ և մանրադիտակի տեխնիկա
1. Լույսի օպտիկական մանրադիտակ
2. Մութ դաշտի մանրադիտակ
3. Ֆազային կոնտրաստային մանրադիտակ
4. Լյումինեսցենտային (լյումինեսցենտ) մանրադիտակ
Գլուխ II. Մշակության, ցանքի տեխնիկայի և միկրոօրգանիզմների հետ աշխատելու համար անհրաժեշտ սարքավորումների ընդհանուր պատկերացում
Գլուխ III. Միկրոօրգանիզմների պատրաստուկների պատրաստման մեթոդներ
Գլուխ IV. մանրէաբանական բջիջների հետազոտություն
1. Միկրոօրգանիզմների բջիջների ձեւերը
2. Միկրոօրգանիզմների բջիջների կառուցվածքը (ցիտոքիմիական հետազոտության մեթոդներ)
3. Միկրոօրգանիզմի բջիջների գրամ գունավորում
4. Բակտերիաների մեջ սպորների գունավորում
5. Պարկուճի գունավորում
6. Դրոշակների գունավորում
7. Բակտերիաների միջուկային նյութի գունավորում
8. Միկրոօրգանիզմների բջիջների ներդիրների ներկում
Գլուխ V. Միկրոօրգանիզմների սնուցում
1. Առանձին սննդանյութերի նշանակությունը
2. Մշակույթի կրիչների պատրաստում
3. Ստերիլիզացման մեթոդներ
Գլուխ VI. Բակտերիաների քանակի հաշվառում և մաքուր մշակույթի մեկուսացում
1. Հողում բակտերիաների քանակի հաշվառում
2. Բակտերիաների որակական կազմի որոշում
3. Ջրի և այլ հեղուկների մեջ միկրոօրգանիզմների քանակի հաշվառում
4. Օդի մեջ բակտերիաների քանակի հաշվառում
5. Մաքուր բակտերիալ կուլտուրաների մեկուսացում
Գլուխ VII. Բակտերիաների տեսակի որոշում
Գլուխ VIII. Միկրոօրգանիզմների կողմից ազոտի փոխակերպումը օրգանական նյութեր
Ֆերմենտացման գործընթացներ
1. Ալկոհոլային խմորում
2. Կաթնաթթվային խմորում
3. Բուտիրային խմորում
4. Պեկտինային նյութերի խմորում
5. Ցելյուլոզային խմորում
6. Մանրաթելերի օքսիդացում
7. Ճարպի օքսիդացում
8. Ածխաջրածինների օքսիդացում
Գլուխ IX. Օրգանական և հանքային ազոտային միացությունների փոխակերպումը միկրոօրգանիզմների կողմից
1. Ամոնիֆիկացում
2. Նիտրացում
3. Դենիտրիֆիկացում (նիտրատային շնչառություն)
4. Մթնոլորտային ազոտի կենսաբանական ֆիքսացիա
Գլուխ X
1. Ծծմբի միացությունների փոխակերպումը միկրոօրգանիզմների կողմից
2. Միկրոօրգանիզմների մասնակցությունը երկաթի փոխակերպմանը
3. Ֆոսֆորի միացությունների փոխակերպումը միկրոօրգանիզմների կողմից
ԳՅՈՒՂԱՏՆՏԵՍԱԿԱՆ ՄԱՆՐԱԲԱՆՈՒԹՅԱՆ
Գլուխ XI. Հողի ընդհանուր մանրէաբանական վերլուծություն
1. Հետազոտության մեթոդներ
2. Միկրոօրգանիզմների խմբեր, կուլտուրայի միջավայրի բաղադրություն և պատրաստում
3. Հողի միջին նմուշի վերցում և մանրէաբանական անալիզի նմուշի պատրաստում
4. Հողի կախոցի պատրաստում
5. Միկրոօրգանիզմների տարբեր խմբերի հաշվառում
6. Հողի մեջ միկրոօրգանիզմների ընդհանուր թվի որոշումը մանրադիտակի տակ ուղղակի հաշվման միջոցով.
Գլուխ XII. Միկրոօրգանիզմների ցենոզների ուսումնասիրություն
1. Ապակու աղտոտման մեթոդը ըստ N. G. Kholodny
2. Հողում մանրէաբանական ցենոզների ուսումնասիրությունը Պերֆիլիևի և Գաբեի մեթոդով
3. Արիստովսկայայի կողմից ձևափոխված Պերֆիլիև մազանոթային մեթոդը
4. Հումիկ նյութերի տարրալուծման մեջ ներգրավված ավտոխթոն խմբի միկրոօրգանիզմների նույնականացում՝ ըստ Վինոգրադսկու մեթոդի՝ Թեպերի մոդիֆիկացիայում
5. Հումուսային նյութերի տարրալուծման մեջ ներգրավված միկրոօրգանիզմների նույնականացում՝ համաձայն Tepper մեթոդի.
Գլուխ XIII. Հողի կենսաբանական ակտիվության որոշում
1. Հողի կենսաբանական ակտիվության որոշում կտավի քայքայման ինտենսիվությամբ (Միշուստինի, Վոստրովի և Պետրովայի մեթոդ)
2. Հողի ընդհանուր մանրէաբանական ակտիվության որոշում արտազատման միջոցով ածխաթթու գազ
3. Հողի ամոնիֆիկացնող գործունեության որոշում
4. Միկրոօրգանիզմների ամոնիֆիկացնող ակտիվության որոշում
5. Հողի նիտրացնող ակտիվության որոշում
6. Հողի ապանիտրացման ակտիվության որոշում
7. Միկրոօրգանիզմների ազոտի ամրագրման ակտիվության որոշում
Գլուխ XIV. Բակտերիաների ուսումնասիրություն բույսերի արմատային գոտում և արմատների վրա
1. Ռիզոսֆերայում բակտերիաների հաշվառում Կրասիլնիկովի մեթոդով
2. Ռիզոսֆերայի և արմատային միկրոֆլորայի հաշվառում արմատների հաջորդական լվացման մեթոդով ըստ Ե.
3. Հանգույց բակտերիաների մաքուր կուլտուրաների մեկուսացում, քանակական հաշվառում հողում, դրանց ակտիվության և վիրուսայինության որոշում.
Գլուխ XV. Բակտերիալ պատրաստուկների վերլուծություն
Գլուխ XVI. Կերի մանրէաբանություն
1. Հացահատիկի էպիֆիտիկ միկրոֆլորան և դրա փոփոխությունը կերի պահպանման ժամանակ
2. Սիլոսի վերլուծություն
3. Կերակրման խմորիչ
Գլուխ XVII. Կաթի և կաթնամթերքի միկրոֆլորան
1. Կաթի մանրէաբանական վերլուծություն
2. Կաթնաթթվային բակտերիաների մեկուսացման մեթոդները մաքուր մշակույթի մեջ
3. Ծանոթություն կարագի միկրոֆլորայի հետ
Գրականության ինդեքս